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研發(fā)階段/n研究開發(fā)了豬偽狂犬病油乳劑滅活苗及偽狂犬病乳膠凝集試驗診斷試劑盒兩項新產(chǎn)品，為我國預(yù)防與控制豬偽狂犬病填補(bǔ)了空白。豬偽狂犬病病毒油乳劑滅活疫苗獲得中華人民共和國農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的（一類）新獸藥證書。開發(fā)出新工藝3項，即豬偽狂犬病毒油乳劑滅活疫苗生產(chǎn)工藝、偽狂犬病乳膠凝集診斷試劑盒的制備工藝、高質(zhì)量酶標(biāo)記兔抗豬IgG的制備工藝。其中豬偽狂犬病毒油乳劑滅活疫苗生產(chǎn)工藝及兔抗豬IgG酶標(biāo)抗體制備工藝處于國際領(lǐng)先地位。除乳膠凝集試驗診斷試劑外還開發(fā)偽狂犬病診斷方法5種，包括聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）、血凝

研發(fā)階段/n該發(fā)明屬于動物病毒學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。利用基因工程方法和DNA重組方法將PrV的主要毒力基因TK和糖蛋白基因gI、gE編碼區(qū)刪除，導(dǎo)致PrV毒力下降，公開了一種三基因缺失的重組偽狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PrV)毒株的構(gòu)建、用該毒株制備的疫苗、構(gòu)建該毒株的方法以及制備該疫苗方法說的重組偽狂犬病毒株缺失了TK、gE、gI基因，且不含外源基因。所說的疫苗屬于含有該發(fā)明的病毒液和明膠制成的凍干活疫苗。發(fā)明的重組-突變株遺傳穩(wěn)定，不會返強(qiáng)。該發(fā)明還包括將所說的活疫苗接種于仔豬、育肥豬

本工作成果構(gòu)建了新型可離子化脂質(zhì)分子庫，可通過排列組合形成數(shù)十個新型可離子化脂質(zhì)，已掌握脂質(zhì)納米顆粒構(gòu)建的核心技術(shù)。 一、項目分類 關(guān)鍵核心技術(shù)突破 二、技術(shù)分析 相對傳統(tǒng)疫苗（如滅活疫苗、重組蛋白疫苗等），mRNA 疫苗具有應(yīng)變能力快、制備簡單、免疫效力強(qiáng)等特點，在控制病毒傳染性疾病中具有至關(guān)重要的作用。脂質(zhì)納米顆粒（LNP）是介導(dǎo)mRNA在人體內(nèi)發(fā)揮功能的最優(yōu)解。Pfizer和Moderna公司構(gòu)建的LNP依然被認(rèn)為是“best-in-class”的mRNA疫苗遞送技術(shù)。其中關(guān)鍵組分雙親性可離子化脂質(zhì)的合理設(shè)計可達(dá)到mRNA有效遞送和釋放。但脂質(zhì)納米顆粒核心技術(shù)專利集中于少數(shù)國外公司如Arbutus、Moderna、CureVac和BioNtech，專利壁壘高。目前，我國沒有自主研發(fā)的高效并安全的用于人體的mRNA遞送系統(tǒng)，致使歐美可隨時限制我國的mRNA疫苗生產(chǎn)。 本工作成果構(gòu)建了新型可離子化脂質(zhì)分子庫，可通過排列組合形成數(shù)十個新型可離子化脂質(zhì)，已掌握脂質(zhì)納米顆粒構(gòu)建的核心技術(shù)。目前已成功合成并進(jìn)行活性驗證的新型可離子化脂質(zhì)4個。其中，脂質(zhì)A1-D1-5的活性最佳，基于其制備的LNP不但成功地載荷小干擾RNA在小鼠體內(nèi)有效地治療了代謝疾病，還實現(xiàn)了高效的mRNA負(fù)載和體內(nèi)遞送。代謝疾病的治療成果發(fā)表在國際學(xué)術(shù)期刊Science Advances上，mRNA負(fù)載系統(tǒng)已經(jīng)與多家公司開展合作進(jìn)行臨床前開發(fā)工作。

本發(fā)明的目的是提供一種鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗，即采用生物技術(shù)對鴨坦布蘇病毒E蛋白進(jìn)行抗原表位分析、拼接，獲得一種鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE，并以該融合蛋白作為抗原來制備鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗。本發(fā)明中鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE，其編碼蛋白的氨基酸序列為SEQ ID NO:1；其中一種核苷酸序列為SEQ ID NO:2。本發(fā)明利用pET28a（+）表達(dá)性載體構(gòu)建了能表達(dá)鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE的大腸桿菌BL21(DE3)宿主菌。將重組表達(dá)的蛋白純化后制備成基因工程亞單位疫苗，可使免疫后鴨群獲得免疫保護(hù)。

本發(fā)明涉及一種利用噬菌體PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因轉(zhuǎn)化制備鴨疫里默氏菌前菌影疫苗的方法與應(yīng)用方法。該方案首先將噬菌體PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因通過柔性連接臂(Gly4Ser)3連接成串聯(lián)基因，并進(jìn)一步構(gòu)建溫控表達(dá)載體pBV-E-SN。將pBV-E-SN電擊轉(zhuǎn)化進(jìn)入鴨疫里默氏菌原生質(zhì)體，篩選陽性克隆28℃增菌培養(yǎng)。分離菌體加保護(hù)劑后分裝、冷凍干燥。本發(fā)明所制備的活菌疫苗經(jīng)飲水免疫，既可以刺激呼吸道和消化道黏膜的局部免疫，也可以激發(fā)體液免疫。

本產(chǎn)品為增強(qiáng)黏膜免疫的口服活載體疫苗，是新一代預(yù)防和治療乳仔豬腹瀉的特異 性免疫微生態(tài)制劑。主要成分為活菌乳酸重組菌，活菌總數(shù)≥3.5×109cfu/g，同時也 含有死菌以及代謝產(chǎn)物?；罹M(jìn)入機(jī)體后可定植在腸壁，通過生長繁殖，產(chǎn)生的乳酸和 乙酸，降低了腸道的PH及Eh值，改善內(nèi)部微環(huán)境，能抑制有害菌的生長，其代謝產(chǎn)物對 機(jī)體有營養(yǎng)作用，促進(jìn)免疫功能的作用。 該乳酸重組菌可促進(jìn)腸道有益菌落生長繁殖，拮抗和抑制腸道內(nèi)有害菌增殖，糾正 腸道菌群紊亂，產(chǎn)生特異性抗體，預(yù)防和治療豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉等病毒引起 的腹瀉、下痢、細(xì)菌性腸炎等疾病，增強(qiáng)免疫力和抗病力。

本產(chǎn)品為增強(qiáng)黏膜免疫的口服活載體疫苗，是新一代預(yù)防和治療乳仔豬腹瀉的特異性免疫微生態(tài)制劑。主要成分為活菌乳酸重組菌，活菌總數(shù)≥3.5×109cfu/g，同時也含有死菌以及代謝產(chǎn)物。活菌進(jìn)入機(jī)體后可定植在腸壁，通過生長繁殖，產(chǎn)生的乳酸和乙酸，降低了腸道的PH及Eh值，改善內(nèi)部微環(huán)境，能抑制有害菌的生長，其代謝產(chǎn)物對機(jī)體有營養(yǎng)作用，促進(jìn)免疫功能的作用。 該乳酸重組菌可促進(jìn)腸道有益菌落生長繁殖，拮抗和抑制腸道內(nèi)有害菌增殖，糾正腸道菌群紊亂，產(chǎn)生特異性抗體，預(yù)防和治療豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉等病毒引起的腹瀉、下痢、細(xì)菌性腸炎等疾病，增強(qiáng)免疫力和抗病力。

已有樣品/n表達(dá)副豬嗜血桿菌表面抗原的豬霍亂沙門氏菌減毒疫苗。　　成果簡介：利用仔豬副傷寒商品疫苗菌株豬霍亂沙門氏菌C500作為宿主菌株，插入已經(jīng)蛋白質(zhì)組學(xué)方法篩選鑒定的副豬嗜血桿菌重要免疫原性基因，從而獲得副豬嗜血桿菌-豬霍亂沙門氏菌二聯(lián)基因工程疫苗菌株，重組疫苗菌株能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生良好的體液免疫、細(xì)胞免疫以及粘膜免疫，對小鼠的免疫與攻毒試驗結(jié)果證實二聯(lián)重組疫苗具有同時抵抗副豬嗜血桿菌病和沙門氏菌病的能力，具有良好的應(yīng)用前景?！　?yīng)用前景：副豬嗜血桿菌-豬霍亂沙門氏菌二聯(lián)基因工程口服疫苗菌株對小鼠

已有樣品/n呼吸道合胞病毒（RSV）是引起嬰幼兒肺炎的首要病因，福爾馬林滅活疫苗產(chǎn)生低中和活性抗體以及偏向Th2型免疫應(yīng)答，反而引起“疫苗依賴的感染增強(qiáng)”，因此，國內(nèi)外均無疫苗上市。本發(fā)明采用抗原抗體免疫復(fù)合物的新思路，提供了一種RSV抗原蛋白F與抗體恒定區(qū)Fc的融合蛋白(F-Fc)的制備方法，及其作為RSV亞單位疫苗的應(yīng)用。融合蛋白經(jīng)粘膜途徑（滴鼻）免疫，使用安全方便，并可在呼吸道誘導(dǎo)強(qiáng)的體液免疫和偏向Th1型細(xì)胞免疫。

7月4日，著名期刊《SignalTransductionandTargetedTherapy》（IF:38.104）在線發(fā)表我?；A(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床藥學(xué)學(xué)院疫苗中心林昂、唐昕瑩團(tuán)隊在新冠疫苗領(lǐng)域的最新研究成果“UnravellingtheenhancedvaccineimmunitybyheterologousKCONVAC/Ad5-nCoVCOVID-19vaccination”。