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重組大腸桿菌生產(chǎn)磷脂酶D及轉(zhuǎn)酯化產(chǎn)品開發(fā)
磷脂酶D（PLD, EC 3.1.4.4）是一類廣泛存在于各種生物體的酶，具有水解作用和磷酰基轉(zhuǎn)移作用（見圖1）。作為一種酶制劑，PLD的轉(zhuǎn)磷脂酰活性尤為重要，被用于制備具有生物活性的稀有磷脂。其中，以大豆磷脂酰膽堿（PC）為底物，PLD酶法制備磷脂酰絲氨酸（PS），受到廣泛關(guān)注。PS作為腦健康營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑，相繼被美國(guó)FDA、日本HBM和中國(guó)國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委所認(rèn)證，列為新資源食品。相較于提取自牛腦和植物的PS，生物酶法制備的PS，避免了食品安全和植物源含量低的問(wèn)題。進(jìn)一步，一些新的結(jié)構(gòu)和功能磷脂，通過(guò)P
廈門大學(xué)
2021-01-12
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基于固定化酶生產(chǎn)低分子量肝素的新工藝
低分子量肝素(LMWH)是臨床上最主要的天然抗凝劑，目前主要是通過(guò)動(dòng)物來(lái)源的肝素進(jìn)行酶降解制得。歐洲藥典要求 LMWH 的分子量為 6000~8000，質(zhì)量控制是生產(chǎn) LMWH 的重要環(huán)節(jié)。而肝素酶的活性和利用率直接影響 LMWH 生產(chǎn)成本和產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)。 本項(xiàng)目組利用融合肝素酶 I (Hep I)與甲殼素之間的親和作用，實(shí)現(xiàn)酶的循環(huán)利用，同時(shí)融合酶活性和穩(wěn)定性提高。利用綠色溶劑體系制備形態(tài)完好、尺寸均一的甲殼素微球。用固定化酶制備的 LMWH 產(chǎn)品達(dá)到歐洲藥典要求，實(shí)現(xiàn)了分子量可控，生產(chǎn)過(guò)程可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。該項(xiàng)目將對(duì) LMWH 產(chǎn)業(yè)的綠色和經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)提供技術(shù)支持。目前已發(fā)表 SCI 論文 2 篇，并與相關(guān)企業(yè)開展了合作。
江南大學(xué)
2021-04-13
業(yè)大學(xué).jpg){kind=logo}
一種具有增強(qiáng)的抑菌效果的噬菌體裂解酶
本發(fā)明將裂解酶Bp7e氨基酸的第99位亮氨酸和102位蛋氨酸分別進(jìn)行突變?yōu)楸彼岷凸劝彼幔?jīng)原核表達(dá)技術(shù)得到了突變體蛋白并經(jīng)Western-blot對(duì)其進(jìn)行了鑒定，命名為Bp7c突變體蛋白。對(duì)Bp7e和Bp7e突變體蛋白進(jìn)行了純化及濃度測(cè)定，通過(guò)體外裂解實(shí)驗(yàn)及裂解譜檢測(cè)得知，純化的Bp7e和Bp7e突變體兩種蛋白具有廣譜的抑菌作用，對(duì)溶壁微球菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和多種血清型大腸桿菌均有裂解效果，且Bp7e突變體裂解效果整體優(yōu)于天然裂解酶Bp7e。
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-13
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自然界中首例 [6+4] 環(huán)加成反應(yīng)的酶
鑒定首個(gè)高階環(huán)加成酶，拓展了環(huán)加成酶的認(rèn)知
一、項(xiàng)目分類
重大科學(xué)前沿創(chuàng)新
二、成果簡(jiǎn)介
南京大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院梁勇教授，生命科學(xué)學(xué)院譚仁祥教授和戈惠明教授的科研團(tuán)隊(duì)，發(fā)現(xiàn)了抗幽門螺旋桿菌的潛在藥物-漢城霉素并對(duì)其生物合成途徑進(jìn)行深入研究。通過(guò)多菌株基因組序列比對(duì)，對(duì)漢城霉素類生物合成基因簇進(jìn)行了鑒定，利用微生物學(xué)，分子生物學(xué)、底物化學(xué)衍生化、體外酶促反應(yīng)等手段從該基因簇中鑒定出一個(gè)新穎、可催化高階環(huán)加成反應(yīng)的酶。團(tuán)隊(duì)基于蛋白質(zhì)晶體數(shù)據(jù)，量子化學(xué)計(jì)算和蛋白質(zhì)定點(diǎn)突變技術(shù)，對(duì)該酶促動(dòng)力學(xué)過(guò)程進(jìn)行了深入解析，最終確定該酶通過(guò)“雙過(guò)渡態(tài)”來(lái)同時(shí)催化產(chǎn)生6+4和4+2環(huán)加成產(chǎn)物。該特殊高階環(huán)加成酶的發(fā)現(xiàn)，解答了“自然界中是否存在酶催化的高階環(huán)加成反應(yīng)”，這一持續(xù)五十余年的謎題。這類酶的發(fā)現(xiàn)將進(jìn)一步拓展人們對(duì)周環(huán)反應(yīng)酶的認(rèn)識(shí)，啟發(fā)科學(xué)家們將來(lái)利用和改造周環(huán)反應(yīng)酶來(lái)實(shí)現(xiàn)有價(jià)值的分子轉(zhuǎn)化。
成果于2019年4月以Letter形式發(fā)表于Nature。F1000評(píng)述該研究“鑒定首個(gè)高階環(huán)加成酶，拓展了環(huán)加成酶的認(rèn)知”，諾貝獎(jiǎng)得主霍夫曼評(píng)述“這是在酶促反應(yīng)中直接觀察到的[6+4]環(huán)加成產(chǎn)物的首個(gè)例子……，該研究對(duì)酶促高階環(huán)加成研究具有深遠(yuǎn)影響”。
南京大學(xué)
2022-08-12
高性能角蛋白酶的高效表達(dá)與應(yīng)用研究
角蛋白酶是一種特異性蛋白酶類，可降解結(jié)構(gòu)復(fù)雜、硬質(zhì)難溶的角蛋白，具有多種優(yōu)良的催化特性，在生物加工、綠色制藥、廢棄生物質(zhì)處理、生物制革、生態(tài)紡織、洗滌劑等實(shí)際應(yīng)用中備受關(guān)注，被認(rèn)為是有著巨大應(yīng)用潛力和市場(chǎng)前景的新一代蛋白酶類。 本項(xiàng)目從角蛋白酶基因挖掘、高效表達(dá)、性能改造及其應(yīng)用研究等方面開展了一系列工作。課題組目前建立了角蛋白酶資源庫(kù)，是我國(guó)擁有角蛋白酶基因資源產(chǎn)權(quán)最多和最具多樣性來(lái)源的單位；實(shí)現(xiàn)了角蛋白酶基因在大腸桿菌及枯草芽孢桿菌等外源宿主中的克隆及高效表達(dá)；在 5L 罐上發(fā)酵酶活最高可達(dá)10000 U/mL 以上，是目前文獻(xiàn)報(bào)道的重組角蛋白酶表達(dá)最高水平；項(xiàng)目已完成了 1M3 規(guī)模中試試驗(yàn)，成本降低 30%以上。在應(yīng)用方面，本項(xiàng)目成功將角蛋白酶用于生物法制備納米銀粒子 AgNPs，與傳統(tǒng)化學(xué)法相比，酶法合成的納米銀具有更好的抑菌活性。另外，項(xiàng)目組已首次開發(fā)出無(wú)膠原活力的高特異性角蛋白酶，具有高角蛋白活力，不會(huì)對(duì)皮革膠原造成破壞，能保護(hù)膠原結(jié)構(gòu)完整性，可開發(fā)出不傷及皮膚真皮的洗滌劑產(chǎn)品、藥品及化妝品，在生物制革領(lǐng)域也具有極大應(yīng)用價(jià)值，可緩解制革工業(yè)中的爛皮現(xiàn)象；同時(shí)本研究所開發(fā)的角蛋白酶在活性多肽制備中也表現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。
江南大學(xué)
2021-04-13
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一種由生物油提取單酚化合物和熱解木質(zhì)素的方法
本發(fā)明公開了一種由生物油提取單酚化合物和熱解木質(zhì)素的方法，室溫下將過(guò)濾后的生物油加入到去離子水中，超聲震蕩下分離得到水相和有機(jī)相；將得到的有機(jī)相溶于強(qiáng)堿溶液中，保證pH＞12，并利用有機(jī)溶劑A萃取分離得到混合溶液中的中性組分；利用稀酸溶液將經(jīng)過(guò)萃取后得到的堿溶液Ⅰ酸化至pH為5～7，過(guò)濾得到重均分子量大于1526的高分子熱解木質(zhì)素，濾液經(jīng)有機(jī)溶劑B萃取分離得到單酚化合物，將再次萃取后得到的堿溶液Ⅱ酸化至pH為1～2，過(guò)濾得到重均分子量為319～1068的低分子熱解木質(zhì)素。本方法解決了生物油水不溶相的進(jìn)一步利用問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)提取生物油高附加值化學(xué)品與制取燃料的有機(jī)統(tǒng)一，提高生物油的總體利用率。
浙江大學(xué)
2021-04-11
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一種采用酸性離子液體預(yù)處理提高褐煤熱解焦油產(chǎn)率與品質(zhì)的方法
（專利號(hào)：ZL 201410182363.1） 簡(jiǎn)介：本發(fā)明公開了一種利用酸性離子液體在溫和條件下預(yù)處理褐煤來(lái)提高其熱解焦油產(chǎn)率并改善油品品質(zhì)的方法，屬于褐煤綜合利用技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過(guò)選擇能高效破壞褐煤中弱鍵合結(jié)構(gòu)的酸性離子液體，將褐煤粉與酸性離子液體加入反應(yīng)釜中，在溫和條件下預(yù)處理；然后利用水或有機(jī)溶劑將酸性離子液體洗出后將煤樣干燥，有機(jī)溶劑和酸性離子液體回收后循環(huán)使用。預(yù)處理后的褐煤進(jìn)行熱解，相比于原煤酸性離子液體預(yù)處理后褐煤熱解焦
安徽工業(yè)大學(xué)
2021-01-12
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一種六自由度串聯(lián)機(jī)器人運(yùn)動(dòng)學(xué)反解的求解方法
本發(fā)明公開了一種六自由度串聯(lián)機(jī)器人運(yùn)動(dòng)學(xué)反解的求解方法， 該方法包括:讀入連桿參數(shù)建立機(jī)器人連桿坐標(biāo)系模型;已知連桿末 端關(guān)節(jié)位置，建立關(guān)節(jié)位置約束方程;根據(jù)各關(guān)節(jié)位置約束方程，確 定各關(guān)節(jié)位置;建立機(jī)器人各關(guān)節(jié)坐標(biāo)系的姿態(tài)約束方程;將之前求 得的關(guān)節(jié)位置坐標(biāo)解分別代入姿態(tài)約束方程中，根據(jù)姿態(tài)約束方程， 求解各組關(guān)節(jié)變量中間值;對(duì)關(guān)節(jié)變量中間值進(jìn)行分析處理，選取最 佳關(guān)節(jié)變量解。本發(fā)明采用空間幾何理論將機(jī)器人運(yùn)動(dòng)學(xué)反解中位置 和姿態(tài)進(jìn)行分離求解，大大降低了幾何法運(yùn)動(dòng)學(xué)反解運(yùn)算的復(fù)雜性， 并能夠應(yīng)用于
華中科技大學(xué)
2021-04-14
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一種微波真空冷凍干燥制備螺旋藻粉的方法
本發(fā)明公開了一種螺旋藻微波真空冷凍干燥方法。本發(fā)明以新鮮螺旋藻為原料，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)、采收、預(yù)凍、微波真空冷凍干燥，最終得到螺旋藻粉。干燥得到的產(chǎn)物通過(guò)感官品質(zhì)、水分含量、流動(dòng)性等物性參數(shù)以及藻膽蛋白的含量的測(cè)定，表明微波真空冷凍干燥螺旋藻粉不僅具有優(yōu)良的品質(zhì)，而且大大降低了能耗，可作為最佳干燥工藝應(yīng)用于螺旋藻的生產(chǎn)中，且可應(yīng)用于保健食品開發(fā)領(lǐng)域。
北京林業(yè)大學(xué)
2021-02-01
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全截面非接觸燃煤電站一次風(fēng)粉靜電檢測(cè)技術(shù)
燃煤電站鍋爐一次風(fēng)粉傳感器為全截面環(huán)狀非接觸式結(jié)構(gòu)，其基本原理是利用燃煤電站制粉系統(tǒng)中煤粉顆粒物的摩擦起電原理，結(jié)合先進(jìn)的測(cè)量模型實(shí)現(xiàn)煤粉流速、濃度及流量進(jìn)行在線實(shí)時(shí)測(cè)量，誤差優(yōu)于5%。主要技術(shù)特點(diǎn)： 全截面結(jié)構(gòu)，其內(nèi)徑與一次風(fēng)管相同，不存在盲區(qū)，保證了測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。 非接觸式，無(wú)磨損，使用壽命長(zhǎng)。 采用被動(dòng)式靜電檢測(cè)原理，傳感器只對(duì)移動(dòng)煤粉敏感，測(cè)量系統(tǒng)免維護(hù)。 傳感器安裝在近燃燒器端，真實(shí)反映了入爐的各一次風(fēng)管內(nèi)煤粉濃度和流速分配狀態(tài)。 結(jié)合風(fēng)粉調(diào)節(jié)手段，可優(yōu)化燃燒，減低污染物排放，防止鍋爐結(jié)焦、腐蝕、水冷壁爆管等，對(duì)鍋爐安全經(jīng)濟(jì)環(huán)保運(yùn)行具有重要意義。
東南大學(xué)
2021-04-11