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一種海洋黑曲霉生產(chǎn)耐鹽纖維素酶的液體發(fā)酵方法
本發(fā)明公開(kāi)了一種海洋黑曲霉生產(chǎn)耐鹽纖維素酶的液體發(fā)酵方法。包括如下步驟:1)從東海近海10～20m深處的泥土里篩選得到一株海洋黑曲霉;2)海洋黑曲霉接種于PDA培養(yǎng)基上,32～40℃下培養(yǎng)60～90小時(shí),得到斜面孢子,斜面孢子保藏于4℃;3)斜面孢子接種于PDA-1培養(yǎng)基,在32～40℃下培養(yǎng)60～90h,得到活化的孢子;4)活化的孢子接種于茄子瓶斜面,42℃培養(yǎng)74小時(shí),得到擴(kuò)培的茄子瓶斜面孢子;5)擴(kuò)培得到的茄子瓶斜面孢子用滅菌人工海水稀釋到108個(gè)孢子/ml,接種于液體發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基,發(fā)酵5～10天,得到纖維素酶。本發(fā)明具有產(chǎn)酶活高、酶穩(wěn)定、耐鹽性好等優(yōu)點(diǎn),生產(chǎn)的纖維素酶可以在較高鹽含量的條件下降解纖維素,為該水解物的后續(xù)應(yīng)用打下基礎(chǔ)。
浙江大學(xué)
2021-04-13
一類具酪氨酸酶抑制活性的化合物的制備方法與用途
本發(fā)明提供一類具有酪氨酸酶抑制活性的化合物的制備方法，包括六種從桑葉中提取的具有酪氨酸酶抑制活性的多酚類化合物。通過(guò)將藥材經(jīng)乙醇水溶液加熱提取，濃縮，硅膠柱分離，洗脫，洗脫液濃縮干燥，再用制備液相色譜繼續(xù)分離，收集溶液，溶液濃縮干燥后得到樣品并進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。本發(fā)明還提供了從桑葉中分離上述多酚類化合物的方法。本發(fā)明提供的六種多酚類化合物具有較強(qiáng)的酪氨酸酶抑制活性，能夠有效預(yù)防和治療黑色素合成異常導(dǎo)致的人體色素沉著性疾病、黑色素瘤以及其它需要抑制酪氨酸酶活性的病癥，可用于制備治療此類疾病的藥物。
浙江大學(xué)
2021-04-13
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組織特異性表達(dá)的24-脫氫膽固醇還原酶編碼重組腺病毒開(kāi)發(fā)
本項(xiàng)目涉及阿爾茨海默癥基因治療法與治療領(lǐng)域。更具體地，本發(fā)明涉及利用基因工程技術(shù)構(gòu)建含有 dhcr24 基因的復(fù)制缺陷型重組腺病毒，以及這些腺病毒載體在將 dhcr24 基因轉(zhuǎn)移入細(xì)胞以及實(shí)現(xiàn) DHCR24 蛋白在神經(jīng)細(xì)胞等細(xì)胞中特異性過(guò)表達(dá)的應(yīng)用。制備的重組腺病毒有望在阿爾茨海默癥以及糖尿病等疾病的基因治療中獲得肯定的療效。
遼寧大學(xué)
2021-04-11
組織特異性表達(dá)的24-脫氫膽固醇還原酶編碼重組腺病毒開(kāi)發(fā)
本項(xiàng)目涉及阿爾茨海默癥基因治療法與治療領(lǐng)域。涉及利用基因工程技術(shù)構(gòu)建含有DHCR24基因的復(fù)制缺陷型重組腺病毒，以及這些腺病毒載體在將DHCR24基因轉(zhuǎn)移入細(xì)胞以及實(shí)現(xiàn)DHCR24蛋白在神經(jīng)細(xì)胞等細(xì)胞中特異性過(guò)表達(dá)的應(yīng)用。制備的重組腺病毒有望在阿爾茨海默癥以及糖尿病等疾病的基因治療中獲得肯定的療效。 主要指標(biāo)： 1. 在療效確認(rèn)的基礎(chǔ)上，進(jìn)行藥物代謝動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，研究其腺病毒表達(dá)蛋白DHCR24在體內(nèi)表達(dá)及到達(dá)高峰及降解時(shí)間，提供藥代研究的一系列資料。 2. 安全性確認(rèn)：利用急性毒性試驗(yàn)采用大劑量注射方法，對(duì)選定候選重組腺病毒進(jìn)行臨床前安全性評(píng)價(jià)。
遼寧大學(xué)
2021-04-11
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樂(lè)昌含笑3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶蛋白編碼序列
一種樂(lè)昌含笑Mc-Hmgr蛋白編碼序列，屬于基因工程領(lǐng)域。所分離出的DNA分子包括：編碼具有樂(lè)昌含笑Mc-Hmgr蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.3中從核苷酸第56-1726位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO.3中從核苷酸第56-1726 位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明是一種3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A的還原酶，有助于提高樂(lè)昌含笑中次生代謝產(chǎn)物或其前體的含量，次生代謝產(chǎn)物具有雙向調(diào)節(jié)人體血壓的作用，并可降低人體膽固醇含量，預(yù)防心腦血管硬化等功能。對(duì)于保護(hù)人民的健康生長(zhǎng)有所幫助。
江蘇師范大學(xué)
2021-04-11
南京椴3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶蛋白編碼序列
一種南京椴tm-Hmgr蛋白編碼序列，屬于基因工程領(lǐng)域。所分離出的DNA 分子包括：編碼具有南京椴tm-Hmgr蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.3中從核苷酸第131-1888位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO.3中從核苷酸第131-1888位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明是一種3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A的還原酶，有助于提高南京椴中萜類化合物次生代謝產(chǎn)物或其前體的含量，且可以開(kāi)拓新蛋白資源，對(duì)于保護(hù)人民的健康生長(zhǎng)將有所幫助，同時(shí)對(duì)我國(guó)的農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥的研究和發(fā)展具有重要的意義。
江蘇師范大學(xué)
2021-04-11
一對(duì)轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶及其編碼基因與應(yīng)用
本發(fā)明公開(kāi)了一對(duì)轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶及其編碼基因與應(yīng)用。這對(duì)轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶(TALEN)由一對(duì)DNA識(shí)別蛋白分別與Fok1？DNA內(nèi)切酶的兩個(gè)異源亞基融合得到，可以特異性地識(shí)別山羊或綿羊朊蛋白基因(PRNP)exon2上的兩個(gè)相鄰位點(diǎn)。將這對(duì)轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶同時(shí)轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞時(shí)，其能對(duì)宿主細(xì)胞PRNP基因的exon2位點(diǎn)打靶，并使打靶位點(diǎn)發(fā)生基因突變，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)山羊或綿羊PRNP基因的靶向修飾，具有特異性強(qiáng)、打靶效率高、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)。
浙江大學(xué)
2021-04-11
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RNA修飾m6A去甲基酶FTO對(duì)多種RNA修飾底物的去甲基分子機(jī)理
FTO對(duì)人體發(fā)育至關(guān)重要，F(xiàn)TO酶活功能的紊亂會(huì)影響發(fā)育和多種疾病的發(fā)生，包括肥胖和癌癥等。N6-甲基腺嘌呤（m6A）作為mRNA上含量最為豐富的甲基化修飾，是首個(gè)被報(bào)道的FTO去甲基酶活生理底物。之后陸續(xù)報(bào)道FTO生理底物還包括mRNA上5’帽端后的N6，2'-O-二甲基化腺嘌呤（cap m6Am），snRNA的m6A和m6Am，tRNA的N1-甲基腺嘌呤（m1A），除此之外還有體外活性底物單鏈DNA上的N6-甲基脫氧腺嘌呤（6mA）和N3-甲基胸腺嘧啶（3mT）與單鏈RNA上的N3-甲基尿嘧啶（m3U）。FTO如何識(shí)別眾多的核酸修飾堿基，是否有催化選擇性，如何結(jié)合多種RNA，F(xiàn)TO為什么對(duì)cap m6Am的活性高于單鏈RNA上的m6A，及FTO為什么對(duì)單鏈RNA或DNA上的m1A沒(méi)有活性卻對(duì)tRNA或莖環(huán)結(jié)構(gòu)上的m1A有活性？回答這些FTO的酶催化分子機(jī)制有待于蛋白-核酸復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)的解析。然而FTO蛋白與核酸底物結(jié)合力太弱，致使獲得FTO蛋白-核酸復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)一直是該領(lǐng)域的挑戰(zhàn)和難點(diǎn)。
北京大學(xué)
2021-04-11
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反應(yīng)分離耦合技術(shù)及其在酶法合成手征性化合物中的應(yīng)用
該項(xiàng)目在利用微生物細(xì)胞中的酶進(jìn)行生物催化生產(chǎn)手征性化合物時(shí)采用過(guò)程集成技術(shù)，通過(guò)分離與反應(yīng)耦合優(yōu)化生產(chǎn)過(guò)程，大大提高了生物催化轉(zhuǎn)化體系的效率，降低生產(chǎn)成本，簡(jiǎn)化生產(chǎn)過(guò)程，形成具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的L-蘋果酸與L-丙氨酸創(chuàng)新的生產(chǎn)工藝流程。采用反應(yīng)與分離耦合技術(shù)，對(duì)系統(tǒng)整體過(guò)程的集成優(yōu)化，可通過(guò)分離耦合解決反應(yīng)過(guò)程轉(zhuǎn)化率低的問(wèn)題，通
南京工業(yè)大學(xué)
2021-01-12
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高活力菊粉內(nèi)切酶酶制劑生產(chǎn)及其在菊粉低聚果糖 生產(chǎn)中的應(yīng)用
菊粉內(nèi)切酶是能夠使菊科植物菊芋或菊苣所含多糖（-鍵連接的聚果糖）在 糖鏈內(nèi)部隨機(jī)降解，生產(chǎn)低聚果糖的生物酶。低聚果糖具有增殖腸道雙歧桿菌、 排除體內(nèi)有害物質(zhì)、增強(qiáng)免疫力、降低膽固醇、預(yù)防結(jié)腸癌、抗衰老等多種生 理功能，作為保健品具有巨大的市場(chǎng)。目前亞洲國(guó)家和地區(qū)，如中、日、韓、 臺(tái)灣等，都是以蔗糖為原料利用果糖基轉(zhuǎn)移酶合成的（合成法）。產(chǎn)品純度低、 工藝復(fù)雜、成本高，需要色譜分離才能得到純度高的產(chǎn)品。菊芋或菊苣產(chǎn)量高、 種植成本低、富含菊糖（-鍵連接的聚果糖）。
山東大學(xué)
2021-04-13