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一步酶法從頭孢菌素C（CPC）生產(chǎn)7－氨基頭孢烷酸（7－ACA）菌株及催化工藝
一步酶法從頭孢菌素c（ CPC） 生產(chǎn)7－氨基頭孢烷酸（7-ACA） 是繼我們研發(fā)的兩步酶法工藝成功應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)以后，在生產(chǎn)頭孢菌素類抗生素醫(yī)藥中間體技術(shù)的又一個突破。與化學(xué)法和兩步酶法相比，一步酶法有工藝簡單、環(huán)保和轉(zhuǎn)化率高、產(chǎn)品質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)。該技術(shù)采用基因工程技術(shù)對 CPC 酰化酶（一步酶法用酶）的基因進(jìn)行了改造，獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構(gòu)建的高效啟動子 HP 以及優(yōu)化組合的調(diào)控表達(dá)元件，構(gòu)建并篩選出了能夠高效、高活性表達(dá)一步酶法用酶——CPC ?；傅幕蚬こ碳?xì)胞株。這是國內(nèi)第一個使得 CPC 酰化酶活性能夠達(dá)到工業(yè)應(yīng)用水平的技術(shù)。由于采用了高效的表達(dá)系統(tǒng)和穩(wěn)定的質(zhì)粒，以及組成型表達(dá)結(jié)構(gòu)，使得該基因工程菌遺傳特性非常穩(wěn)定，在發(fā)酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導(dǎo)劑就可以實(shí)現(xiàn)高效、高活性表達(dá)。在高效表達(dá) CPC ?；傅幕A(chǔ)上，我們通過在表達(dá)基因上同時引入的特殊基因序列，使得蛋白的純化和固定化工藝一步進(jìn)行。通過自己開發(fā)研制的可重復(fù)使用的固定化載體，可以使得固定化酶活性達(dá)到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質(zhì)，可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶，酶收率在 90 ％以上，固定化酶活達(dá)到 60U/g 以上。固定化酶可以重復(fù)使用 20 批以上，純化和固定化用載體可以重復(fù)使用。
清華大學(xué)
2021-04-13
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一種從紅豆杉中培養(yǎng)篩選產(chǎn)紫杉醇菌的方法
項(xiàng)目成果/簡介:本發(fā)明提供了一種從紅豆杉中培養(yǎng)篩選產(chǎn)紫杉醇菌的方法.本發(fā)明的方法包括以下步驟:1)對紅豆杉植物的組織進(jìn)行培養(yǎng),分離純化獲得內(nèi)生真菌;2)培養(yǎng)步驟1)中獲得的內(nèi)生真菌,利用薄層層析對發(fā)酵代謝物進(jìn)行初篩,篩出可產(chǎn)紫杉醇或其類似物的菌株;3)結(jié)合細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn),測定出代謝物對CHO細(xì)胞的抑制率;4)利用高效液相色譜對其作了進(jìn)一步分析,確定產(chǎn)紫杉醇菌株.本發(fā)明提供的從紅豆杉分離產(chǎn)紫杉醇的方法過程簡單,成本較低.并且通過本發(fā)明提供的方法提取得到的產(chǎn)紫杉醇菌用于微生物培養(yǎng)時,獲得紫杉醇的含量大大增加,該方法為微生物工程提供了更廣闊的途徑.
安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-10
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表達(dá)雜合抗菌肽的乳酸菌的研制及在飼料中的應(yīng)用
成果描述：本課題采用理性設(shè)計(jì)的策略，通過基因重組的手段構(gòu)建雜合抗菌肽LfcinB-P-CB，具有活性高、穩(wěn)定性強(qiáng)、無毒等優(yōu)點(diǎn)。通過對抗菌肽工程菌發(fā)酵優(yōu)化，及抗菌肽純化、制劑工藝研究，建立中試規(guī)模的抗菌肽制劑的制備體系?？咕Ч_(dá)到雜合肽LPCB與Amp（50 μg/mL）抑菌直徑之比大于1.0；耐熱性強(qiáng)，在100 ℃條件下維持3 h活性無明顯降低；有一定的耐酸堿性，在pH 2~10的環(huán)境中仍能保持較高的活性；安全性高，對真核細(xì)胞幾乎無溶血性；實(shí)現(xiàn)雜合抗菌肽LfcinB-P-CB在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用，解決抗生素等化學(xué)抗菌材料造成了日益嚴(yán)重的環(huán)境問題，降低某些物質(zhì)會以原型或代謝物形式排泄造成環(huán)境污染使環(huán)境中出現(xiàn)耐菌株的可能性，從而給人類生存環(huán)境構(gòu)成危害。市場前景分析：據(jù)國外報道，歐洲各國的養(yǎng)牛業(yè)、養(yǎng)豬業(yè)及養(yǎng)禽場無一例外普遍在配合飼料中添加了上述獸用抗生素作為“動物生長促進(jìn)劑”。泰洛星已成為當(dāng)今世界上頭號獸用抗菌劑，去年泰洛星的銷售額高達(dá)2.75億美元。我國當(dāng)前的動物養(yǎng)殖面臨越來越嚴(yán)峻的疫病困擾，因此抗菌肽產(chǎn)品在動物保健方面的開發(fā)和應(yīng)用在我國需求巨大。2010年全國動物用抗菌肽類產(chǎn)品年銷售額接近一億元，但抗菌肽的總市場容量至少超過100億。因此本項(xiàng)目開發(fā)的抗菌肽具有廣闊的市場前景。與同類成果相比的優(yōu)勢分析：抗菌效果達(dá)到雜合肽LPCB與Amp（50 μg/mL）抑菌直徑之比大于1.0；耐熱性強(qiáng)，在100 ℃條件下維持3 h活性無明顯降低；有一定的耐酸堿性，在pH 2~10的環(huán)境中仍能保持較高的活性；安全性高，對真核細(xì)胞幾乎無溶血性；
四川大學(xué)
2021-04-11
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一種用于刺吸式小型昆蟲內(nèi)共生菌滅活的飼喂裝置
本實(shí)用新型涉及一種用于刺吸式小型昆蟲內(nèi)共生菌滅活的飼喂裝置。該裝置包括自上而下依次設(shè)置的蓋體結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)容器和通氣結(jié)構(gòu)；所述蓋體結(jié)構(gòu)包括頂蓋和設(shè)置在所述頂蓋的下側(cè)面的飼喂液腔；飼喂液腔的底面為PTFE濾膜；所述培養(yǎng)容器為兩端開口的圓筒形結(jié)構(gòu)。本實(shí)用新型所述用于刺吸式小型昆蟲內(nèi)共生菌滅活的飼喂裝置，結(jié)構(gòu)簡單，成本低廉，易于操作，同時有效降低刺吸式昆蟲的死亡率。
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-11
一種秸稈還田纖維分解性生防真菌及菌劑和應(yīng)用
本發(fā)明提出一種秸稈還田纖維分解性生防真菌及菌劑和應(yīng)用，其中該菌株F7JX993849的分類命名為綠木霉Trichoderma?virens，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC?No.3.17613。本發(fā)明的綠木霉Trichoderma?virens?F7JX993849對農(nóng)作物秸稈中的纖維素、半纖維素和果膠組分同時具有較強(qiáng)的分解能力。其次，本發(fā)明的綠木霉Trichoderma?virens?F7JX993849可以拮抗植物病源菌入侵，具有生物防治功能。再次，本發(fā)明的秸稈還田纖維分解性生防真菌所制成的菌劑，可以解決一般秸稈腐熟劑在應(yīng)用過程中效果不理想、不穩(wěn)定的問題，具有良好的應(yīng)用價值。
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-11
一種從紅豆杉中培養(yǎng)篩選產(chǎn)紫杉醇菌的方法
本發(fā)明提供了一種從紅豆杉中培養(yǎng)篩選產(chǎn)紫杉醇菌的方法.本發(fā)明的方法包括以下步驟:1)對紅豆杉植物的組織進(jìn)行培養(yǎng),分離純化獲得內(nèi)生真菌;2)培養(yǎng)步驟1)中獲得的內(nèi)生真菌,利用薄層層析對發(fā)酵代謝物進(jìn)行初篩,篩出可產(chǎn)紫杉醇或其類似物的菌株;3)結(jié)合細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn),測定出代謝物對CHO細(xì)胞的抑制率;4)利用高效液相色譜對其作了進(jìn)一步分析,確定產(chǎn)紫杉醇菌株.本發(fā)明提供的從紅豆杉分離產(chǎn)紫杉醇的方法過程簡單,成本較低.并且通過本發(fā)明提供的方法提取得到的產(chǎn)紫杉醇菌用于微生物培養(yǎng)時,獲得紫杉醇的含量大大增加,該方法為微生物工程提供了更廣闊的途徑.
安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-29
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功能性耐鹽微生物菌劑的開發(fā)與產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用
成果簡介： 微生物菌肥以其改良土壤、增加產(chǎn)量、提高品質(zhì)且保護(hù)環(huán)境等特點(diǎn)而受到人們的追捧。但這些菌劑產(chǎn)品主要是單獨(dú)或添加到低濃度的有機(jī)肥中使用的，無法在高養(yǎng)分復(fù)合微生物肥料中使用。這不僅增加了施用成本，還因時間差造成兩種肥料都不能發(fā)揮最大功效。 針對以上問題，本團(tuán)隊(duì)對功能性耐鹽微生物菌劑的制備關(guān)
南京工業(yè)大學(xué)
2021-01-12
一種具有舒筋活絡(luò)功效的食用菌方便湯及其制備方法
本發(fā)明具體涉及一種具有舒筋活絡(luò)功效的食用菌方便湯及其制備方法，屬于食品加工技術(shù)領(lǐng)域，該食用菌方便湯主料是通過以下重量份的原料復(fù)配而成：平菇400-450份，金針菇60-100份，杏鮑菇60-100份，雙孢菇60-100份，白靈菇60-100份，白玉菇60-100份，蛹蟲草5-10份，菠菜60-80份及胡蘿卜80-100份。本發(fā)明制備的食用菌方便湯食用菌含量高達(dá)80%以上，營養(yǎng)豐富，口感純正，具有舒筋活絡(luò)，提高人體免疫力的功效，適量添加中藥液，既提高了食用菌方便湯的營養(yǎng)價值，同時使復(fù)水后的方便湯湯汁分散均勻且分散穩(wěn)定性好，可使消費(fèi)者獲取優(yōu)質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)，調(diào)節(jié)其飲食結(jié)構(gòu)，改善其飲食品質(zhì)。
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-13
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用于富集甲烷氧化耦合高氯酸鹽還原菌群的MBBR反應(yīng)器
本實(shí)用新型涉及生物降解處理技術(shù)，旨在提供一種用于富集甲烷氧化耦合高氯酸鹽還原菌群的MBBR反應(yīng)器。其反應(yīng)器本體由兩根中空的玻璃管組成，分別為主管和副管，內(nèi)部沿長度方向填充了長條形的疏水性微孔聚乙烯膜；上端通過橡膠管相連，底部通過循環(huán)蠕動泵相連，內(nèi)部循環(huán)方向是由副管底部流向主管底部；副管的上端設(shè)出樣口，底部設(shè)有進(jìn)樣口，定量進(jìn)樣泵通過管路接至進(jìn)樣口；甲烷鋼瓶出口通過橡膠管分別接至主管底部和頂部及副管頂部。本實(shí)用新型所采用的MBBR反應(yīng)器能為生物膜生長提供良好的微環(huán)境。具有成本低，有效期長，降解效果穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，適合長時間地處理大量低高氯酸鹽污染的廢水。
浙江大學(xué)
2021-04-13
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曙古菌門（Aigarchaeota）微生物基因組代謝特征和起源進(jìn)化研究
通過比較基因組和進(jìn)化基因組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)：Aigarchaeota和Thaumarchaeota由共同祖先分化形成，其祖先早期共同生存于高溫環(huán)境中，至今生存于高溫?zé)崛械腡haumarchaeota與Aigarchaeota仍呈現(xiàn)較高的功能相似性。它們的共同祖先共享1154個基因家族，其數(shù)目甚至超過現(xiàn)存Aigarchaeota基因家族數(shù)目，表明二者祖先的高度相似性。廣為人知的Thaumarchaeota早期并無氨氧化能力，而是后期于高溫生境中進(jìn)化所得，隨后Thaumarchaeota擴(kuò)散至海洋生境中，由于海洋生境中氮源的匱乏，因此Thaumarchaeota展現(xiàn)出獨(dú)特的競爭優(yōu)勢，而被保留于海洋生境中，從而實(shí)現(xiàn)高溫氨氧化古菌向中溫環(huán)境的轉(zhuǎn)變。 本研究通過重構(gòu)未培養(yǎng)古菌類群Aigarchaeota基因組信息，揭示其潛在的代謝潛能及其遺傳多樣性獲得機(jī)制，并結(jié)合數(shù)據(jù)庫中已有Thaumarchaeota和Aigarchaeota基因組進(jìn)行比較基因組學(xué)和進(jìn)化基因組學(xué)分析，勾勒出這兩個近緣支系的演化歷史場景，指出古菌類群 Thaumarchaeota和Aigarchaeota的共同祖先起源于高溫生境，頻繁的水平基因轉(zhuǎn)移極大地提升了兩者對各自生境的適應(yīng)性，該研究極大地促進(jìn)了我們對古老且神秘的古菌支系的認(rèn)知。
中山大學(xué)
2021-04-13