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中試階段/n該項目利用該室自己分離鑒定篩選到的增殖滴度高、免疫原性好的鄂A地方標(biāo)準(zhǔn)毒株，采用基因工程與病毒分子生物學(xué)的方法與原理，構(gòu)建了6株基因缺失重組病毒，其中TK-/gG-/LacZ+已按新獸藥證書的要求，完成了中試與區(qū)域試驗，經(jīng)動物實驗和中試應(yīng)用證明該產(chǎn)品在產(chǎn)生抗體的時間和保護效果優(yōu)于目前的國內(nèi)外同類產(chǎn)品。克隆、鑒定、測序，在原核大腸桿菌、真核酵母和桿狀病毒表達系統(tǒng)表達了gG和gE兩個基因，用其表達產(chǎn)物建立了gG-ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）、gE-ELISA、gG-LAT（乳膠凝集試驗）和

形成了具有中國自身特色的材料基因工程數(shù)據(jù)共享平臺技術(shù)，并據(jù)此建成便捷實用的數(shù)據(jù)服務(wù)平臺?；诓牧匣蚬こ趟枷?，在國家“863”計劃（2015AA034201）支持下，建設(shè)國家材料科學(xué)數(shù)據(jù)共享網(wǎng) 2.0 版。2017 年 5 月完成建設(shè)并實現(xiàn)上線運行訪問，滿足材料基因工程數(shù)據(jù)存儲與管理需要（http://www.materdata.cn/）。該平臺同時承擔(dān)國家“863”計劃和北京市科技支撐計劃材料基因工程項目（D16110300240000）的數(shù)據(jù)匯交任務(wù)。材料基因工程數(shù)據(jù)共享平臺于2018年4月3日在北京舉辦的“863”課題驗收會議上成功驗收，并得到專家認(rèn)可。專家委員會主席秦高梧教授認(rèn)為：初步構(gòu)建了材料基因工程數(shù)據(jù)共享平臺的框架，具有查詢、檢索、統(tǒng)計、下載以及對接數(shù)據(jù)挖掘等功能；初步形成了集熱力學(xué)計算、動力學(xué)計算、有限元模擬、神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析的多層次跨尺度一體化設(shè)計方法。為滿足該平臺的數(shù)據(jù)匯交和數(shù)據(jù)共享，開發(fā)了材料科學(xué)數(shù)據(jù)DOI 注冊軟件[MaterDataDOI] v1.0，并獲得了該軟件的著作權(quán)（北京科技大學(xué)，2017SR056658）。除公益性數(shù)據(jù)互聯(lián)網(wǎng)共享服務(wù)外，同時面向鋼鐵、有色等行業(yè)，提供定向資源共享以及專題性定制服務(wù)，探索公益性共享與定向服務(wù)數(shù)據(jù)共享機制和方式。

本發(fā)明的心房肽基因轉(zhuǎn)染細胞微囊，涉及醫(yī)藥中的基因制品。旨在解決心房肽基因治療疾病帶來的免疫耐受、安全、使用時間和劑量限制等問題。本發(fā)明的微囊在中空的聚己內(nèi)酯微囊或聚氨酯微囊中包被人類心房肽基因編碼序列轉(zhuǎn)染永生化細胞，上述聚己內(nèi)酯微囊或聚氨酯微囊的囊體上的孔徑為5-10nm，人類心房肽基因編碼序列是人ANPcDNA(CANP)編碼全部序列，即核苷酸1到456。永生化細胞是CHO細胞、COS細胞、EVC304人臍靜脈內(nèi)皮細胞、骨髓基質(zhì)細胞、3T3TK成纖維細胞和人胚肺細胞中的一種。本發(fā)明的微囊適用于植入人體，能長時間不斷地釋放人類心房肽，治療高血壓、心力衰竭、腎功能不全等疾病。

基因治療可用于包括癌癥、艾滋病、心血管病、傳染性疾病等在內(nèi)的各種獲得性和遺傳性疾病。近幾年來核酸及基因藥物得到快速發(fā)展，已有多個核酸藥物經(jīng)FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床治療。基因治療相對其它治療方法有著若干優(yōu)勢，但在實際應(yīng)用過程中也面臨著一些挑戰(zhàn)。其中，基因輸送載體對于基因治療來說是十分關(guān)鍵。目前開發(fā)基因輸送載體的策略主要分為病毒和非病毒介導(dǎo)的輸送系統(tǒng)。病毒載體具有非常高的輸送效率并且可以保證基因的長期表達，因此是目前臨床上應(yīng)用最多的載體。但病毒載體在臨床使用過程中也暴露出了許多缺陷，這些缺陷大大限制了病毒載體的應(yīng)用。為了克服病毒載體的諸多不足，近些年來非病毒載體得到了迅速發(fā)展。這其中就包括研究最廣泛的非病毒載體聚乙烯亞胺。PEI是最好的體外轉(zhuǎn)染試劑之一并且已經(jīng)被一些研究工作者當(dāng)成聚合物類基因轉(zhuǎn)染試劑的“金標(biāo)準(zhǔn)”。 PEI的轉(zhuǎn)染效率和細胞毒性主要受其分子量、支化程度、表面電勢和粒徑的影響。隨著分子量的升高，支鏈PEI轉(zhuǎn)染效率升高；然而，細胞毒性也同時升高。為了消除或降低與PEI有關(guān)的細胞毒性，目前已經(jīng)發(fā)展出了多種不同的策略。這些策略主要包括使用直鏈高分子量PEI，用多糖、親水性聚合物（如PEG）、二硫鍵連接臂、脂質(zhì)基團等取代或連接高分子量和低分子量的支鏈PEI市場上銷售的PEI分子量范圍非常廣泛，從1000 Da以下到1.6 × 103 kDa都有。 維生素E是一種脂溶性化合物，它包括生育酚和生育三烯酚，其中α-生育酚是自然界中分布最廣泛、含量最豐富并且活性最高的維生素E形式。維生素E的生物功能除了最熟知的抗氧化功能之外，還涉及酶活性的調(diào)節(jié)、基因表達調(diào)控以及神經(jīng)生物學(xué)功能等。通過消化道吸收進入血漿的維生素E經(jīng)受體介導(dǎo)進入肝細胞，進入肝細胞的維生素E又在維生素E結(jié)合蛋白的運輸下進入肝外組織。維生素E本身的疏水性質(zhì)、豐富的生物調(diào)節(jié)功能以及其受體介導(dǎo)的肝細胞攝取方式都預(yù)示著用它來修飾PEI有助于實現(xiàn)基因的器官靶向的遞送。 因此，我們開發(fā)了維生素E修飾的聚乙烯亞胺衍生物及其合成方法和應(yīng)用。維生素E的修飾有利于基因質(zhì)粒的包載、遞送和釋放，其毒性隨著PEI上的維生素E飾數(shù)目的增加而降低，維生素E的修飾能夠大大增加pDNA質(zhì)粒的細胞攝取后基因編碼蛋白的表達。動物體內(nèi)實驗表明PEI衍生物可成功將pDNA質(zhì)粒輸送到小鼠的肝臟和肺臟中，該復(fù)合物（PEI/pDNA）能進入肝臟和肺臟細胞并進一步釋放質(zhì)粒DNA和基因表達。本成果具有聚乙烯亞胺衍生物作為基因輸送載體具有毒性低、轉(zhuǎn)染效率高和基因藥物已釋放等優(yōu)點。

產(chǎn)品詳細介紹1. 樣品臺，標(biāo)準(zhǔn)模塊96×0.2ml+77×0.5ml模塊；另可選384well模塊和原位板模塊；模塊更換更加方便、快捷2. 溫度范圍：0~100℃3. 超高的升降溫速率，升溫速度：≥4.0℃/s，降溫速率≥3.5℃/s4. 精確的溫度準(zhǔn)確性控制和均勻度控制；5. 超寬的溫度梯度范圍：30~100℃6. 溫度梯度寬度：1~30℃7. 熱蓋溫度可調(diào)，并帶有壓力調(diào)整及指示8. 程序存儲量：200個9. 最大循環(huán)數(shù)：9910. 5.7寸大屏幕TFT彩屏中英文顯示，帶圖形顯示功能，更方便程序設(shè)定及過程觀察11. 帶USB2.0接口，支持多機聯(lián)網(wǎng)運行，支持程序無限量下載及轉(zhuǎn)移12. 支持U盤13. 帶時間/溫度遞增/遞減功能，適合長鏈基因擴增及支持TouchDown PCR實驗14. 高品質(zhì)的基因擴增儀產(chǎn)品，適合于科研用戶高標(biāo)準(zhǔn)的PCR實驗要求。

產(chǎn)品參數(shù)：1、三個32×0.2 ml模塊可以獨立運行2、10.1英寸彩色TFT電容式觸摸屏設(shè)計3、系統(tǒng)采用安卓操作系統(tǒng)4、樣品座采用拉式直動電磁鐵開蓋5、半導(dǎo)體制冷技術(shù)6、溫度控制范圍為0-100℃7、升溫速率不降溫速率，有效的節(jié)省程序時間8、溫度均一性≤0.2℃（(低溫區(qū)，恒定10s)）。9、熱蓋溫度范圍：室溫～110 ℃10、循環(huán)數(shù)達到99911、具有梯度功能、斷電保護、低溫保存功能12、預(yù)留緊急開蓋功能13、系統(tǒng)自帶8GB的存儲空間14、具有用戶權(quán)限密碼功能

項目成果/簡介:在中國癌癥發(fā)病率和死亡率呈持續(xù)增長趨勢，癌癥的治療效果不令人滿意。腫瘤靶向藥物是癌癥治療的新希望，具有方便、見效快的特點，在臨床已表現(xiàn)出較大的優(yōu)勢，能顯著改善患者的生存質(zhì)量和延長患者的生存期，是癌癥治療的首先藥物，但靶向藥物的應(yīng)用面臨兩個主要問題，一是靶向藥物的適用性問題，其治療效果與患者的基因突變類型密切相關(guān)，需要通過腫瘤患者的基因突變檢測來篩選適用患者；二是靶向藥物的耐藥問題，一般靶向藥物使用幾個月即可出現(xiàn)耐藥，可能產(chǎn)生新的耐藥基因。因此盲目使用靶向藥物，可能只對少數(shù)患者有效，治療效果很差，而如果采用基因突變檢測來指導(dǎo)靶向藥物的個性化治療，并且在治療過程中通過對耐藥基因的檢測了解靶向藥物的療效變化進一步指導(dǎo)靶向用藥，則患者的治療效果可明顯改善，同時可避免無效用藥，節(jié)約社會成本。顯然采用靶向藥物的個性化治療方案可使患者受益最多，但受現(xiàn)有技術(shù)檢測靈敏度和特異性的限制該方案目前還難以實現(xiàn)。由于目前的基因突變檢測靈敏度和特異性不夠高，大都以腫瘤組織為檢測標(biāo)本，但很多晚期癌癥病人不適合手術(shù)治療無法獲取組織樣本，而細針穿刺等方法取樣較痛苦，患者往往難以接受，另外，對于手術(shù)患者腫瘤組織樣本難以再次取樣獲得，因此治療監(jiān)測過程中會出現(xiàn)無樣可取的情況；同時由于檢測靈敏度和特異性不夠高，現(xiàn)有技術(shù)只能進行單一突變檢測，不能同時檢測多種點突變，由于突變種類較多，臨床檢測操作繁瑣，工作量較大。本項目針對現(xiàn)有檢測技術(shù)的缺點進行技術(shù)創(chuàng)新，采用特殊的TB-ARMS基因突變檢測技術(shù)使基因突變檢測靈敏度和特異性較現(xiàn)有技術(shù)提高十倍以上，從而可以血液樣品為檢測對象，并且可同時檢測多種點突變，簡化了操作流程，節(jié)約了成本。 本項目的目的是開發(fā)可以血液和組織樣品為檢測對象的高靈敏度和特異性的基因突變檢測試劑盒，用于臨床指導(dǎo)靶向藥物的個性化用藥，并將其推廣應(yīng)用。應(yīng)用范圍:與目前存在的基因突變檢測技術(shù)相比，本項目所采用的檢測技術(shù)具有更廣泛的適用性。本項目所采用的技術(shù)以病人血液為主要檢測標(biāo)本，可適用于所有肺癌和結(jié)直腸癌病人。由于具有高度的靈敏度和特異性，可在高野生型基因背景下進行檢測，解除了傳統(tǒng)檢測技術(shù)對病人標(biāo)本的限制。血液標(biāo)本采樣簡單方便，與手術(shù)穿刺相比，極大的減輕了病人痛苦，也降低了取樣的成本，更容易得到病人的配合。對于繼發(fā)性耐藥的病人而言，使動態(tài)實時檢測耐藥基因稱為可能。項目階段:試驗階段效益分析:與目前存在的基因突變檢測技術(shù)相比，本項目研究采用的基因突變檢測技術(shù)具有更高的靈敏度和特異性，靈敏度可達到0.1％，即可在大于103個野生型基因的背景下檢測到一個突變基因。本項目研究已在基因突變檢測方面積累了一定經(jīng)驗，已完成了對EGFR和K-ras基因檢測的實驗室研發(fā)工作，前期的研究結(jié)果顯示，采用本項目的技術(shù)方法檢測EGFR 29種常見突變和K-ras基因8種常見的突變至少可達到0.1%的檢測選擇性，具有高度的靈敏度和特異性，并且可在同一反應(yīng)中同時檢測8種類型K-ras點突變，這是目前其他ARMS技術(shù)所無法達到的。并且采用本項目技術(shù)，我們進一步研發(fā)了針對肺癌和結(jié)直腸癌靶向治療的EGFR C797S、braf、PIK3CA等突變檢測的試劑盒，其中EGFR C797S突變檢測試劑盒目前尚無上市產(chǎn)品，C797S為靶向藥物治療過程中產(chǎn)生的突變，可用于靶向藥物的耐藥監(jiān)測，以便及時指導(dǎo)病人改變治療方案。

鹽堿地是影響我國農(nóng)業(yè)增產(chǎn)的主要因素之一。近年來植物分子生物學(xué)研究表明，植物中存在耐鹽（抗鹽）基因，如果能將耐鹽基因克隆，然后通過遺傳轉(zhuǎn)化導(dǎo)入目標(biāo)植物，可以有效提高目標(biāo)植物的耐鹽性。我們從植物中克隆到了耐鹽相關(guān)基因，目前的研究工作正在將耐鹽基因?qū)肽敛莅ㄜ俎?、百脈根等植物中，已得到大量的遺傳轉(zhuǎn)化植株。

在中國癌癥發(fā)病率和死亡率呈持續(xù)增長趨勢，癌癥的治療效果不令人滿意。腫瘤靶向藥物是癌癥治療的新希望，具有方便、見效快的特點，在臨床已表現(xiàn)出較大的優(yōu)勢，能顯著改善患者的生存質(zhì)量和延長患者的生存期，是癌癥治療的首先藥物，但靶向藥物的應(yīng)用面臨兩個主要問題，一是靶向藥物的適用性問題，其治療效果與患者的基因突變類型密切相關(guān)，需要通過腫瘤患者的基因突變檢測來篩選適用患者；二是靶向藥物的耐藥問題，一般靶向藥物使用幾個月即可出現(xiàn)耐藥，可能產(chǎn)生新的耐藥基因。因此盲目使用靶向藥物，可能只對少數(shù)患者有效，治療效果很差，而如果采用基因突變檢測來指導(dǎo)靶向藥物的個性化治療，并且在治療過程中通過對耐藥基因的檢測了解靶向藥物的療效變化進一步指導(dǎo)靶向用藥，則患者的治療效果可明顯改善，同時可避免無效用藥，節(jié)約社會成本。顯然采用靶向藥物的個性化治療方案可使患者受益最多，但受現(xiàn)有技術(shù)檢測靈敏度和特異性的限制該方案目前還難以實現(xiàn)。由于目前的基因突變檢測靈敏度和特異性不夠高，大都以腫瘤組織為檢測標(biāo)本，但很多晚期癌癥病人不適合手術(shù)治療無法獲取組織樣本，而細針穿刺等方法取樣較痛苦，患者往往難以接受，另外，對于手術(shù)患者腫瘤組織樣本難以再次取樣獲得，因此治療監(jiān)測過程中會出現(xiàn)無樣可取的情況；同時由于檢測靈敏度和特異性不夠高，現(xiàn)有技術(shù)只能進行單一突變檢測，不能同時檢測多種點突變，由于突變種類較多，臨床檢測操作繁瑣，工作量較大。本項目針對現(xiàn)有檢測技術(shù)的缺點進行技術(shù)創(chuàng)新，采用特殊的TB-ARMS基因突變檢測技術(shù)使基因突變檢測靈敏度和特異性較現(xiàn)有技術(shù)提高十倍以上，從而可以血液樣品為檢測對象，并且可同時檢測多種點突變，簡化了操作流程，節(jié)約了成本。 本項目的目的是開發(fā)可以血液和組織樣品為檢測對象的高靈敏度和特異性的基因突變檢測試劑盒，用于臨床指導(dǎo)靶向藥物的個性化用藥，并將其推廣應(yīng)用。