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2020年3月3日，浙江大學(xué)在bioRxiv 預(yù)印本平臺上傳了題為Multi-epitopevaccine design using an immunoinformaticsapproach for 2019 novelcoronavirus in China (SARS-CoV-2)的研究成果。該研究基于可用病毒基因組數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算機(jī)模擬，以鑒定B細(xì)胞抗原決定簇和人白細(xì)胞抗原HLA限制性T細(xì)胞抗原決定簇。在鑒定出的61個(gè)B細(xì)胞表位中19個(gè)具有較高潛在的免疫原性，可用于疫苗設(shè)計(jì)。預(yù)測有499個(gè)T細(xì)胞表位和中國人群中34個(gè)較普遍的HLA等位基因具有親和力。點(diǎn)擊查看原文

2020年3月8日，福建師范大學(xué)在bioRxiv上上傳了一篇題為 Cryo-electron microscopy structure of the SADS-CoV spike glycoprotein provides insights into an evolution of unique coronavirus spike proteins 的研究，識別了SARS-CoV-2的S蛋白的低溫-EM的融合前結(jié)構(gòu)，分辨率為3.55埃。

2020年2月12日，武漢大學(xué)張?jiān)洌顭樇氨本┐髮W(xué)楊慧霞共同通訊在國際頂級醫(yī)學(xué)期刊Lancet 在線發(fā)表題為“Clinical characteristics and intrauterine vertical transmission potential of COVID-19 infection in nine pregnant women: a retrospective review of medical records”的研究成果，該研究成果回顧性分析了9名孕婦在實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)的COVID-19肺炎（即，孕婦咽拭子樣本中檢出的嚴(yán)重急性呼吸綜合征冠狀病毒2 [SARS-CoV-2]為陽性）的臨床記錄，實(shí)驗(yàn)室結(jié)果和胸部CT掃描 ），于2020年1月20日至1月31日在武漢大學(xué)中南醫(yī)院收治。通過檢測羊水，臍帶血中SARS-CoV-2的存在來評估宮內(nèi)垂直傳播的證據(jù)。 該研究表明在孕婦中COVID-19肺炎的臨床特征與發(fā)生COVID-19肺炎的非妊娠成年患者的報(bào)道相似。從這一小組病例中發(fā)現(xiàn)的研究結(jié)果表明，目前尚無證據(jù)表明妊娠晚期發(fā)生COVID-19肺炎的婦女由垂直傳播引起的宮內(nèi)感染。

2020年3月5日，浙江大學(xué)、中山大學(xué)和圣路易斯大學(xué)合作，在medRxiv上上傳了題為Genomic variations of SARS-CoV-2 suggest multiple outbreak sources of transmission 的研究成果成果，共分析了169個(gè)SARS-CoV-2基因組，發(fā)現(xiàn)根據(jù)突變位點(diǎn)（以MN938384.1為基準(zhǔn)點(diǎn)的8750,、28112和 29063三個(gè)位點(diǎn)）主要可以分為兩個(gè)類型，I型和II型。在29063位點(diǎn)的基礎(chǔ)上，I型可以進(jìn)一步分為IA 型和 IB 型。遺傳學(xué)分析表明，IA型最可能是祖先型，II型可能由I型進(jìn)化而來，在感染中占主導(dǎo)地位。結(jié)果表明，II型可能是SARS-CoV-2在武漢華南市場疫情的源頭，而I型引起的疫情應(yīng)該發(fā)生在其他地方，因?yàn)榛颊吲c市場沒有直接聯(lián)系。此外，通過分析三個(gè)基因組位點(diǎn)，區(qū)分I型和II型毒株，作者發(fā)現(xiàn)三個(gè)位點(diǎn)中的兩個(gè)位點(diǎn)的同義變化比I型毒株具有更高的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化效率，這或許可以解釋為什么II型占主導(dǎo)地位，這意味著II型比I型更具傳染性（可傳播）。這些發(fā)現(xiàn)對目前的流行病預(yù)防和控制可能很有價(jià)值。點(diǎn)擊查看原文

2020年3月17，復(fù)旦大學(xué)趙冰、張榮、林鑫華，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所梁俊波合作在生物預(yù)印本平臺bioRxiv上發(fā)表研究成果“Recapitulation of SARS-CoV-2 Infection and Cholangiocyte Damage with Human Liver Organoids”，建立了人源類器官的SARS-COV-2感染模型，確定SARS-COV-2可以感染膽管細(xì)胞，并下調(diào)膽管組織中細(xì)胞緊密連接及膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因的表達(dá)，為新冠病毒細(xì)胞嗜性、致病機(jī)制研究和后續(xù)藥物研發(fā)提供重要工具，并提示膽管功能紊亂可能是部分新型冠狀病毒感染者肝臟損傷的誘因。在本項(xiàng)研究中，研究者應(yīng)用人源肝臟類器官建立SARS-CoV-2感染模型，并研究其感染和損傷膽管組織的機(jī)制。人源類器官是由人體組織體外3D培養(yǎng)產(chǎn)生的，結(jié)構(gòu)功能與體內(nèi)組織器官高度相似的微型器官，可于體外模擬體內(nèi)生理病理過程中的組織細(xì)胞行為。 研究者從臨床肝臟手術(shù)中分離獲取人膽管細(xì)胞，培育出可穩(wěn)定傳代的肝臟膽管類器官，應(yīng)用單細(xì)胞RNA測序(scRNA-seq)對類器官中膽管細(xì)胞進(jìn)行了轉(zhuǎn)錄組分析，發(fā)現(xiàn)長期培養(yǎng)的肝臟膽管類器官保存了ACE2+的膽管細(xì)胞類群，而此細(xì)胞類群在小鼠肝臟膽管類器官中并未發(fā)現(xiàn)。提示人肝臟膽管類器官可以模擬ACE2介導(dǎo)的SARS-CoV-2感染。接下來，研究者檢測了類器官對SARS-CoV-2的易感性。研究者從上海一位COVID-19患者中分離并純化了SARS-CoV-2病毒，接種感染來不同個(gè)體的膽管類器官。感染24小時(shí)后對類器官進(jìn)行免疫熒光染色發(fā)現(xiàn)，SARS-CoV-2的核衣殼蛋白（N protein）在部分類器官膽管細(xì)胞中呈陽性，而未感染對照組無信號，顯示病毒已經(jīng)成功侵染并復(fù)制，受感染的膽管細(xì)胞還會經(jīng)膜融合形成合胞體。對SARS-CoV-2基因組RNA的qRT-PCR分析顯示，在感染后24小時(shí)類器官內(nèi)的病毒載量顯著增加。這些數(shù)據(jù)表明，人膽管上皮細(xì)胞是SARS-CoV-2的易感宿主，并可支持病毒的活躍復(fù)制，人源類器官可作為研究病毒嗜性和致病機(jī)制的工具。感染48小時(shí)后，類器官內(nèi)的病毒載量明顯下降，提示SARS-CoV-2感染可能導(dǎo)致宿主細(xì)胞死亡或抗病毒反應(yīng)的激活。研究者進(jìn)而關(guān)注和檢測了病毒感染對類器官整體行為特性的影響。在體內(nèi)穩(wěn)態(tài)條件下，膽管的主要功能是將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞分泌的膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)到膽管腔內(nèi)排出。膽管細(xì)胞之間的緊密連接維持了膽管上皮的屏障功能，對膽汁酸的收集和排泄至關(guān)重要。研究者發(fā)現(xiàn)SARS-CoV-2感染降低了類器官中Claudin1的表達(dá)，提示膽管細(xì)胞的屏障功能可能被破壞。更重要的是，兩個(gè)主要的膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，頂端鈉離子/膽汁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(ASBT)和囊性纖維化跨膜電導(dǎo)調(diào)節(jié)(CFTR)的表達(dá)在SARS-CoV-2感染后顯著下調(diào)。這些數(shù)據(jù)支持SARS-CoV-2感染可以通過下調(diào)膽管細(xì)胞中緊密連接形成和膽汁酸運(yùn)輸關(guān)鍵基因的表達(dá)水平，損傷膽管組織屏障和膽汁酸運(yùn)輸功能。提出COVID-19患者肝內(nèi)病毒感染誘發(fā)膽管功能紊亂和膽汁積淤，進(jìn)而導(dǎo)致肝臟損傷的可能性。新型冠狀病毒（SARS-COV-2）感染和損傷肝臟中膽管上皮細(xì)胞

2020年3月14日，空軍軍醫(yī)大學(xué)陳志南，朱平及邊惠潔共同通訊在預(yù)印版平臺bioRxiv 在線發(fā)表未經(jīng)同行評審的題為“SARS-CoV-2 invades host cells via a novel route: CD147-spike protein”的研究成果，該研究發(fā)現(xiàn)SARS-CoV-2通過CD147的新途徑侵入宿主細(xì)胞：S蛋白與宿主細(xì)胞上的受體CD147結(jié)合，從而介導(dǎo)病毒入侵。因此，針對侵襲SARS-CoV-2宿主細(xì)胞的新途徑CD147-S蛋白的發(fā)現(xiàn)為特定抗病毒藥物的開發(fā)提供了關(guān)鍵目標(biāo)。   首先，體外抗病毒試驗(yàn)表明，抗CD147人源化抗體Meplazumab可顯著抑制病毒入侵宿主細(xì)胞，EC50為24.86μg/ mL，IC50為15.16μg/ mL；其次，該研究ELISA也證實(shí)了這兩種蛋白的結(jié)合；最后，通過免疫電子顯微鏡觀察到SARS-CoV-2感染的Vero E6細(xì)胞中CD147和S蛋白的定位。因此，針對侵襲SARS-CoV-2宿主細(xì)胞的新途徑CD147-S蛋白的發(fā)現(xiàn)為特定抗病毒藥物的開發(fā)提供了關(guān)鍵目標(biāo)。

同濟(jì)大學(xué)曹志偉教授團(tuán)隊(duì)與上海市公共衛(wèi)生臨床中心合作，關(guān)于武漢新型冠狀病毒2019-nCoV抗原性計(jì)算的文章（Identification of potential cross-protective epitope between 2019-nCoV and SARS virus），2020年1月30日在 Journal of Genetics and Genomics在線發(fā)表。 研究表明，S蛋白是冠狀病毒與宿主細(xì)胞表面ACE2受體結(jié)合、進(jìn)而介導(dǎo)病毒入宿主細(xì)胞的關(guān)鍵表面蛋白，是疫苗抗體研發(fā)的重要靶點(diǎn)。基于具有自主知識產(chǎn)權(quán)的免疫原性計(jì)算工具CE-Blast，研究小組對所有冠狀病毒的S蛋白進(jìn)行了系統(tǒng)性的結(jié)構(gòu)模擬和免疫原性掃描，計(jì)算了新病毒與已知17種冠狀病毒亞型之間的免疫原性距離，發(fā)現(xiàn)新病毒S蛋白的免疫原性總體上與SARS更為接近。進(jìn)一步計(jì)算揭示，2019武漢新冠狀病毒與SARS冠狀病毒的S抗原在受體接合區(qū)域（RBD）上存在潛在交叉反應(yīng)表位。最為重要的是，其中一處與人ACE2受體結(jié)合位點(diǎn)緊密毗鄰。因此，針對該表位區(qū)域研發(fā)抗體，空間位阻效應(yīng)可能阻斷病毒與ACE2受體的結(jié)合，有望起到病毒感染保護(hù)作用。同時(shí)，針對該表位區(qū)域的SARS抗體，可能對2019新病毒具有潛在臨床治療價(jià)值。 

山東大學(xué)高等醫(yī)學(xué)研究院王培會課題組目前擁有SARS和COVID-19編碼的所有基因。為了減少科研人員重復(fù)工作和科研經(jīng)費(fèi)浪費(fèi)，現(xiàn)無償為學(xué)術(shù)界提供pcDNA6B-viral gene-FLAG載體。另外，對于擅長PCR和分子克隆的實(shí)驗(yàn)室，也可以自行合成（最快只需3-7天）。如果并不擅長PCR和分子克隆，推薦等待郵寄方式（聯(lián)系方式wphlab@163.com）。 

2020年3月5日，蘇州大學(xué)在preprints網(wǎng)站上上傳了一篇題為 Susceptibility Analysis of COVID-19 in Smokers Based on ACE2的研究，在公共數(shù)據(jù)庫下載了三個(gè)數(shù)據(jù)集（GSE994、GSE17913和GSE18344）。利用相關(guān)性和分析對ACE2的功能進(jìn)行評價(jià)。同時(shí)，分析了ACE2在三個(gè)數(shù)據(jù)集的不同組中的不同表達(dá)。結(jié)果表明，與ACE2相關(guān)的基因在病毒感染過程和免疫反應(yīng)等重要生物過程中富集，且ACE2高表達(dá)于吸煙者的肺內(nèi)氣道（GSE994）和口腔上皮細(xì)胞（GSE17913），非吸煙者則表達(dá)不高。在小鼠肺組織中觀察到吸煙和ACE2表達(dá)之間呈明顯的劑量和時(shí)間依賴關(guān)系，并且長時(shí)間不吸煙可顯著減少ACE2表達(dá)。該研究通過分析人和大鼠的ACE2表達(dá)情況，暗示吸煙可誘導(dǎo)呼吸道中ACE2增加，表明吸煙者可能對SARS-CoV-2的易感性較高。

2020年3月8日，安徽師范大學(xué)在bioRxiv上上傳了一篇題為Genome-widedata inferring the evolution and population demography of the novel pneumonia coronavirus (SARS-CoV-2) 的研究分析，作者使用10個(gè)新測序的SARS-CoV-2基因組，并結(jié)合GISAID數(shù)據(jù)庫中的136個(gè)基因組，通過不同的分析方法（如EBSP、錯(cuò)配和中性檢測等）研究前三個(gè)月數(shù)據(jù)的遺傳變異和統(tǒng)計(jì)。 結(jié)果顯示80個(gè)單倍型共有183個(gè)突變位點(diǎn)，包括27個(gè)簡約性信息位點(diǎn)和156個(gè)單一位點(diǎn)。對遺傳多樣性的滑動(dòng)窗口分析表明，SARS-CoV-2基因組豐度的變化有一定范圍，這可以解釋目前這種病毒的廣泛和高適應(yīng)性。遺傳學(xué)分析不支持穿山甲是中間宿主。在最初的單倍型（H14）中，一個(gè)患者樣本居住在華南海鮮市場附近（約2公里），這表明患者有無意識接觸該市場史的可能性很高。然而，基于這個(gè)線索，也無法準(zhǔn)確斷定這個(gè)市場是否是SARS-CoV-2的起源中心。此外，從這個(gè)市場收集的16個(gè)基因組，包含10個(gè)單倍型，表明市場在短期內(nèi)出現(xiàn)循環(huán)感染，這可能導(dǎo)致武漢和其他地區(qū)爆發(fā)SARS-CoV-2。EBSP結(jié)果顯示，第一個(gè)估計(jì)的擴(kuò)展日期從2019年12月7日開始，這表明SARS-CoV-2的傳染可能在11月中下旬開始。