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本發(fā)明涉及一種綠盲蝽唾液酶中果膠酶與淀粉酶的體外提取測(cè)定方法，利用Paraflim膜，采取膜夾營(yíng)養(yǎng)法提取綠盲蝽唾液酶，并測(cè)定綠盲蝽中果膠酶、淀粉酶活性，Paraflim膜法提取綠盲蝽唾液酶利用Paraflim膜、膠卷盒、紗布、橡皮筋、位于兩層Paraflim膜間的液體營(yíng)養(yǎng)介質(zhì)，利用酶與底物反應(yīng)的原理，測(cè)定綠盲蝽唾液中果膠酶、淀粉酶活性。本方法材料易得，操作簡(jiǎn)單方便，制作成本低，占空間小，可實(shí)現(xiàn)綠盲蝽唾液酶的大量、批量提取，并且綠盲蝽可繼續(xù)回收利用。

懸賞金額：10萬(wàn)元 發(fā)榜企業(yè)：深圳市一正科技有限公司 支柱產(chǎn)業(yè)集群：生物醫(yī)藥與健康產(chǎn)業(yè)集群 需求領(lǐng)域：生物工程與檢測(cè)技術(shù)；輕工和化工生物技術(shù)；生物催化與發(fā)酵；智能制造裝備 技術(shù)關(guān)鍵詞：連續(xù)流酶催化；酶固定床；酶循環(huán)壽命；酯化反應(yīng)或酰化反應(yīng)

【發(fā) 明 人】陳軍；蔡寶昌；程冬【技術(shù)領(lǐng)域】本發(fā)明涉及藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種可以調(diào)節(jié)相變溫度的脂質(zhì)體復(fù)合磷脂及其在藥物制劑中的應(yīng)用。【摘要】 本發(fā)明公開(kāi)了一種可以調(diào)節(jié)相變溫度的脂質(zhì)體復(fù)合磷脂及其應(yīng)用，該脂質(zhì)體復(fù)合磷脂由1~10份摩爾份數(shù)的二棕櫚酰磷酸膽堿和1~10份摩爾份數(shù)的氫化大豆磷脂制成，該脂質(zhì)體復(fù)合磷脂可以用于制備熱敏靶向脂質(zhì)體制劑，本發(fā)明通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)篩選不同的磷脂材料，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明二棕櫚酰磷酸膽堿和氫化大豆磷脂科學(xué)組合后得到能靈活調(diào)節(jié)相變溫度的脂質(zhì)體復(fù)合磷脂，該復(fù)合磷脂制備成脂質(zhì)體膜時(shí)能夠形成新相，不存在相分離，具有單一的相變溫度，能夠克服現(xiàn)有技術(shù)兩種不同磷脂材料存在二種相變溫度的缺點(diǎn)；且與單一DPPC材料脂質(zhì)體相比具有更好的穩(wěn)定性和靶向釋藥效果，與單一HSPC材料脂質(zhì)體相比具有人體耐受性更好的相變溫度，應(yīng)用范圍廣泛。

桑色素是黃酮類(lèi)化合物中的一種，是從黃桑木、桑橙樹(shù)等桑科植物的樹(shù)皮和許多中草藥中提取的一種淺黃色色素，化學(xué)名為3, 5, 7, 2′, 4′-五羥基去氫黃酮。研究表明，桑色素具有抗癌、抗炎、抗氧化等廣泛的藥理作用，臨床上可用于抗病毒感染，治療頭痛、冠心病、慢性炎癥及癌癥的治療，與其他化療藥物聯(lián)用能提高療效，減少副作用，還有文獻(xiàn)報(bào)道桑色素具有明顯降低體內(nèi)尿酸水平的作用，可用于治療痛風(fēng)。 桑色素廣泛顯著的生物學(xué)效應(yīng)使其具有重要的研究?jī)r(jià)值，但其水溶性、脂溶性均較差，難以注射給藥，且口服生物利用度極低，影響了桑色素本身的藥效，也限制了它在臨床中的應(yīng)用，目前還沒(méi)有制劑上市。 桑色素的口服生物利用度低的原因較多，除了脂溶性和水溶性差之外，桑色素還能被胃腸道表面的P糖蛋白外排；另外，桑色素在5、7、4′三個(gè)位點(diǎn)均有羥基，所以在體內(nèi)清除很快。 針對(duì)上述原因和桑色素為黃酮類(lèi)化合物的特點(diǎn)，我們?cè)O(shè)想將桑色素和磷脂在特定條件下形成桑色素-磷脂復(fù)合物，利用復(fù)合物的性質(zhì)來(lái)促進(jìn)藥物在胃腸道的吸收，而且磷脂還可以通過(guò)與桑色素結(jié)構(gòu)上的羥基發(fā)生相互作用，從而降低桑色素的體內(nèi)清除速率。兩者有可能顯著提高桑色素的生物利用度。 目前，我們已經(jīng)完成了桑色素-磷脂復(fù)合物的制備工藝條件的篩選，并將其制備成口服自乳化給藥系統(tǒng)。在大鼠口服給藥后測(cè)定其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，結(jié)果表明桑色素原料、桑色素-磷脂復(fù)合物及其自乳化給藥系統(tǒng)的藥時(shí)曲線(xiàn)下面積（AUC）分別為638.9、3045.9、4310.0 mg/l min，后兩者口服生物利用度分別是原料藥的4.77倍和6.75倍，可見(jiàn)顯著提高了桑色素的口服生物利用度，證明了我們的設(shè)想。 目前，桑色素-磷脂復(fù)合物口服自乳化給藥系統(tǒng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究、藥效學(xué)研究、安全性評(píng)價(jià)等臨床前研究?jī)?nèi)容正在按計(jì)劃進(jìn)行。

該液體酶穩(wěn)定劑通用性強(qiáng)，適用于多種酶制劑，并且通用于未經(jīng)濃縮的酶液、中空纖維超濾濃縮或膜式超濾濃縮的酶液，都可在室溫保存三個(gè)月至八個(gè)月，剩余酶活力在80%。具體技術(shù)指標(biāo)為：1．未經(jīng)濃縮的液體α-淀粉酶，室溫保存9個(gè)月，剩余酶活力達(dá)80%以上。/line2．中空纖維超濾濃縮的液體α-淀粉酶，室溫保存6個(gè)月，剩余酶活力達(dá)80%以上。/line3．膜式超濾的液體堿性蛋白酶，室溫保存8個(gè)月，剩余酶活力在80%左右。/line4．未經(jīng)濃縮的液體糖化酶，室溫保存5個(gè)月，剩余酶活力接近90%。/line5．經(jīng)中空纖維超濾濃縮的液體糖化酶，室溫保存3個(gè)半月，剩余酶活力接近90%。未經(jīng)濃縮和膜式超濾的酶液添加穩(wěn)定劑后的液體酶穩(wěn)定性明顯好于經(jīng)中空纖維超濾濃縮的液體酶。因此膜式超濾較好。實(shí)驗(yàn)證明，液體酶添加劑能提高酶的抗變性能力，促進(jìn)變性酶的復(fù)性；不同添加劑之間有協(xié)同或拮抗作用，對(duì)穩(wěn)定劑配方的篩選提供了理論依據(jù)。/line所用的添加劑價(jià)格低廉，來(lái)源方便，并具有通用性。主要設(shè)備是超濾濃縮裝置及包裝容器。廠房面積約200平方米。可通過(guò)技術(shù)轉(zhuǎn)讓或技術(shù)入股方式進(jìn)行合作。

可以量產(chǎn)/n針對(duì)當(dāng)前工業(yè)發(fā)展對(duì)脂肪酶的大量需求與脂肪酶實(shí)際表達(dá)水平較低 的技術(shù)瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達(dá)技術(shù)關(guān)鍵，構(gòu)建的白地霉脂肪酶 基因工程菌 10L 發(fā)酵酶活力可達(dá) 11,200 U/ml 以上，目前國(guó)際報(bào)道的白 地霉脂肪酶表達(dá)酶活力約 200U/ml，可見(jiàn)本技術(shù)之精湛。產(chǎn)品可以用于生 物柴油制備，不飽和脂肪酸富集，油脂水解、轉(zhuǎn)酯、酯化，食品加工、 烘焙等廣泛用途。建設(shè)其發(fā)酵生產(chǎn)線(xiàn)預(yù)計(jì)需要 800-1000 萬(wàn)元，經(jīng)濟(jì)效益 可觀。

成果簡(jiǎn)介： 本研究提供了一種基于ATP再生系統(tǒng)和雙功能谷胱甘肽合成酶（GshF）的酶法制備谷胱甘肽的方法。在谷胱甘肽合成過(guò)程中，經(jīng)典的酶法是由谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶兩步催化完成的。而 GshF可一步催化谷胱甘肽合成，簡(jiǎn)化的反應(yīng)步驟，且該酶反饋抑制作用小，非常適合應(yīng)用于酶法合成谷胱甘肽。酶法合成谷胱甘肽需要大量消耗ATP，通過(guò)引入高

包蟲(chóng)病是由棘球絳蟲(chóng)寄生于人體或宿主動(dòng)物而引起的嚴(yán)重寄生蟲(chóng)疾病。而我國(guó)是同時(shí)有囊型和泡狀兩種類(lèi)型的包蟲(chóng)病高發(fā)區(qū)。目前臨床應(yīng)用最廣泛的抗包蟲(chóng)病藥物是阿苯達(dá)唑，但是該藥的腸道吸收率很差，而且其一般只能抑制寄生蟲(chóng)生長(zhǎng)而不能徹底有效殺滅寄生蟲(chóng)，導(dǎo)致患者必須長(zhǎng)期大量服用該藥物才能達(dá)到治療效果。與此同時(shí)，大量的研究發(fā)現(xiàn)該藥可引起多系統(tǒng)的嚴(yán)重藥物不良反應(yīng)。因此，尋找或開(kāi)發(fā)療效顯著且副作用小的包蟲(chóng)病治療新藥物具有重大的意義。 棘球絳蟲(chóng)獲取能量的主要方式通過(guò)糖酵解過(guò)程。而甘油醛 3-

項(xiàng)目簡(jiǎn)介 該成果在國(guó)際上首次發(fā)現(xiàn)并研究了一種新的人類(lèi)細(xì)胞因子重組蛋白，可以用于治療炎癥和肥胖，實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示能夠明顯抑制急、慢性炎癥；抑制肥胖、抑制脂肪肝形成、降低血糖并提高胰島素的敏感性，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果明確。重組真核蛋白與重組原核蛋白（大腸桿菌表達(dá)）具有同樣的生物學(xué)活性。這個(gè)基因的轉(zhuǎn)基因老鼠未見(jiàn)任何異常（類(lèi)似長(zhǎng)毒實(shí)驗(yàn)）。希望尋求感興趣的企業(yè)，進(jìn)一步開(kāi)發(fā)該項(xiàng)目成為我國(guó)真正的I類(lèi)新的生物藥。應(yīng)用范圍 該成果主要用于治療潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸癌；抑制肥胖和脂肪肝；抑制血糖升高。具有良好的潛在應(yīng)用前景。 項(xiàng)目階段 該項(xiàng)目目前主要進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室的研究，包括細(xì)胞水平和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)以及作用機(jī)制研究。知識(shí)產(chǎn)權(quán) 已經(jīng)申請(qǐng)3項(xiàng)發(fā)明專(zhuān)利，其中2項(xiàng)已授權(quán)，具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)。合作方式 共同開(kāi)發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓。