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一、成果簡介 “雙歧桿菌胞外多糖結(jié)構(gòu)鑒定、功能評價及活性產(chǎn)品的研制”受到國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863 項目)項目(編號：2008AA10Z324)與國家科技支撐計劃項目(編號：2006BABO4A06)的資助。該研究以我國廣西巴馬百歲以上長壽老人腸道分離到的雙歧桿菌及其胞外多糖(EPS)為材料，較系統(tǒng)、全面地進行了結(jié)構(gòu)鑒定、功能評價及活性產(chǎn)品的研制。 

產(chǎn)品詳細介紹

胞內(nèi)寄生性單增李斯特菌和綿羊李斯特菌能在吞噬細胞等抗原遞呈細胞內(nèi)繁殖，引發(fā)高水平的抗原遞呈作用，分別通過MHCⅠ和Ⅱ類途徑引起宿主抗原特異性的CD8+和CD4+ T細胞免疫反應，建立長期有效的免疫保護記憶，因此可作為一種通用的疫苗載體。本項目以上述兩種李斯特菌為活菌載體搭建新型疫苗構(gòu)建通用平臺，該平臺具有以下優(yōu)勢：生物安全——敲除了菌株致病基因，降低了毒性；外源蛋白表達穩(wěn)定——外源抗原基因整合至細菌基因組，永遠不會丟失；外源抗原具有分泌性——抗原基因融合有分泌信號肽，使蛋白能分泌到胞外，更有利于免疫刺激；對環(huán)境、公共健康安全——重組疫苗菌株不攜帶耐藥基因，不會給環(huán)境和公共健康帶來危害。本平臺技術(shù)目前已獲得授權(quán)專利，成果屬于國際先進水平，已在結(jié)核疫苗及豬繁殖與呼吸綜合癥病毒疫苗的研制上應用。該平臺還可應用于腫瘤治療性疫苗及其他預防病毒和慢性細菌感染的疫苗的研發(fā)，是一種通用的疫苗構(gòu)建平臺。

從寒假到現(xiàn)在，清華大學天津高端裝備研究院表界面微納技術(shù)研究所（以下簡稱清華高端院表界面所）的實驗室里，科研人員已連續(xù)忙碌了好多天。為了趕制捐獻給抗疫醫(yī)務人員的消毒除菌凝膠，留在天津的研究所員工幾乎全部上崗。由于生產(chǎn)線工人沒有復工，這些科研工作者們就成了“臨時工”，實驗室成了“臨時生產(chǎn)線”。“相比傳統(tǒng)噴灑消毒液的方式，緩釋二氧化氯可以實現(xiàn)長期持續(xù)消毒，無死角覆蓋，是一種更好的消毒方式。”清華高端院表界面所常務副所長杜川說。在北京清華長庚醫(yī)院執(zhí)行院長董家鴻院士的建議下，大年初二，高端院應急專項小組緊急集結(jié)，針對除菌消毒的應用需求，在之前技術(shù)儲備的基礎(chǔ)上，以最快的速度研發(fā)出以緩釋二氧化氯技術(shù)為核心的消毒除菌凝膠，為這場特殊戰(zhàn)“疫”提供綠色、安全、長期高效的消毒除菌新手段。經(jīng)廣東省微生物分析檢測中心檢測，殺菌率達到99.9%。一瓶消毒除菌凝膠可以在10—20平方米的房間使用1—2個月，而且其揮發(fā)濃度僅為美國國家職業(yè)安全衛(wèi)生協(xié)會建議暴露限值0.1ppm濃度（parts per million）的三分之一，在保證消殺效果的同時，不會對人體健康產(chǎn)生影響。

該技術(shù)利用不同食用菌子實體或加工副產(chǎn)物，制作不同功效的食用菌系列 凍干方便菌湯，適用于食品加工企業(yè)、凍干食品加工企業(yè)、果蔬加工企業(yè)。解 決了生鮮果、菜、菌加工副產(chǎn)物綜合高效利用問題；將生鮮果、菜、菌的營養(yǎng) 與保健功效與糕點、面點相結(jié)合，改善和提高了普通糕點及面食制品的營養(yǎng)與 功能；增加了糕點及面食制品的花色品種，以滿足消費者的多樣化需求。該技 術(shù)可直接對生鮮果、菜、菌加工副產(chǎn)物進行濕法打漿利用，省去了脫水干燥與 粉碎工序，簡化了工藝流程，降低了加工能耗。通過打發(fā)順序的調(diào)整和有關(guān)配 料的應用，提高了制品的性能，保護了原料中的營養(yǎng)與功效成分。

本實用新型涉及一種乳酸菌復合菌劑的制備裝置，包括外箱體，外箱體頂部設(shè)置有蒸汽接口，外箱體內(nèi)上部設(shè)置有上端開口的原料箱，原料箱通過管道連接有位于其下方的混合箱，混合箱兩端均通過轉(zhuǎn)軸轉(zhuǎn)動固定在固定板上，混合箱底部設(shè)置有凸輪，凸輪連接有位于外箱體外的驅(qū)動裝置，混合箱通過管道連接有菌種箱和培養(yǎng)箱，菌種箱通過管道與培養(yǎng)箱相連，菌種箱連接有伸出外箱體外的接種管，培養(yǎng)箱底部設(shè)置有加熱裝置，加熱裝置與控制器相連；本實用新型通過將原料箱、混合箱、菌種箱和培養(yǎng)箱均設(shè)置在外箱體內(nèi)，方便進行蒸汽滅菌消毒，保證培養(yǎng)過程中的無菌無氧環(huán)境，凸輪驅(qū)動混合箱搖晃，避免傳統(tǒng)攪拌葉污染培養(yǎng)液的隱患。

本項目涉及功能性醋酸菌/乳酸菌及其發(fā)酵調(diào)控技術(shù)，可用于果蔬飲品、酵素、新型調(diào)味品的發(fā)酵制造。水果、蔬菜等農(nóng)產(chǎn)品由于其保質(zhì)期短，運輸成本高，較適宜于在原產(chǎn)地或產(chǎn)地附近進行深加工，以延長保質(zhì)期及產(chǎn)品附加值。發(fā)酵類果蔬飲品由于經(jīng)過微生物處理，在口味、質(zhì)地以及營養(yǎng)成分等方面均得到了顯著改善，其中果蔬類益生菌類發(fā)酵飲品，更是得到關(guān)注健康的消費人群的青睞。然而目前市場中的發(fā)酵果蔬汁類產(chǎn)品，魚龍混雜，很多產(chǎn)品存在發(fā)酵程度不高；高度依賴后調(diào)配；微生物混亂及發(fā)酵過程控制不科學；食品安全性不能得到保障等問題。 針對這一類型的產(chǎn)品，本項目從發(fā)酵菌種、發(fā)酵工藝、功能成分分析以及產(chǎn)品標準化等方面系統(tǒng)的進行了研發(fā)。 1）豐富的菌種：本課題組擁有近百株背景明確、安全可靠、發(fā)酵性能優(yōu)良 的微生物，形成了完備的釀造用菌種庫，包括乳酸菌、醋酸菌、酵母菌、米曲霉等。可以針對不同的發(fā)酵原料以及最終產(chǎn)品口感及質(zhì)構(gòu)的要求，選擇一種益生菌或復合發(fā)酵菌種，實現(xiàn)個性化的定制需求。 2）科學工藝：通過科學的發(fā)酵工藝及過程控制，實現(xiàn)了乳酸菌等微生物的高密度培養(yǎng)，活菌數(shù)可達 100 億/ml。大幅降低生產(chǎn)成本和周期，混菌發(fā)酵可由幾個月縮短至 10 天內(nèi)，乳酸菌發(fā)酵縮短至 24 小時內(nèi)。實現(xiàn)高效的物質(zhì)轉(zhuǎn)化，總酸可以達到 6%，提高產(chǎn)品品質(zhì)及生產(chǎn)穩(wěn)定性。 3）成分分析：建立了完備的發(fā)酵產(chǎn)品成分分析技術(shù)平臺。針對與產(chǎn)品風味、以及腸道調(diào)節(jié)、增強免疫等健康功能緊密相關(guān)的有機酸、短鏈脂肪酸、多酚、多肽等功能成分進行精確定量分析以及健康功能評價。 4）產(chǎn)品風味: 本課題組研發(fā)的果蔬發(fā)酵產(chǎn)品口味濃郁、發(fā)酵特色明顯，無不良異味。避免了發(fā)酵后的過度調(diào)配及添加劑的使用，即可達到較優(yōu)的感官要求。符合健康、綠色的現(xiàn)代加工食品的需求。 

農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中許多病害發(fā)生、發(fā)展嚴重，目前在生產(chǎn)中仍以化學防治為主，由于田間化學用藥次數(shù)的提高，病菌已產(chǎn)生明顯的抗藥性。如番茄灰霉病是由灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)侵染引起的，是番茄生產(chǎn)中的主要病害，嚴重影響番茄的產(chǎn)量及品質(zhì)。由于缺乏抗灰霉病的抗原材料，通過常規(guī)方法很難育成番茄灰霉病的抗性品種。傳統(tǒng)的化學防治不僅高殘留、高污染，且對葉圍有益微生物區(qū)系造成破壞，自然抗病能力進一步減弱。隨著人們生活水平的提高，對番茄等果蔬產(chǎn)品的品質(zhì)要求越來越高，綠色和有機食品逐漸成為消費市場的主流，市場潛力巨大。在食品安全、環(huán)境保護、農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的時代潮流下，研發(fā)新型生物農(nóng)藥逐步取代化學農(nóng)藥已成為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要目標，也是經(jīng)濟和社會發(fā)展的必然趨勢。 利用生防微生物及其次生代謝產(chǎn)物是生物防治的重要手段，我國和世界上許多國家已有商品化微生物農(nóng)藥產(chǎn)品。目前對于番茄灰霉病的微生物防治研究多數(shù)處于實驗室和溫室階段，田間應用的極少，多數(shù)菌劑在田間應用過程中防效不穩(wěn)，這是制約微生物菌劑開發(fā)應用的一個瓶頸。此外，多數(shù)研究只是針對某一種病害，具有廣譜抗性的菌株很少。本實驗室在土壤中分離出一株新的粉紅粘帚菌（WY-1），初步研究表明，該菌對番茄灰霉病、葉霉病、枯萎病、黃萎病和綿疫病等病原菌均有抑制作用（已獲專利，專利號ZL2009 1 0072862.4）該菌株是可通過多種機制共同作用抑制數(shù)種植物病原菌的生防菌，能有效的防治番茄、辣椒等多種作物的灰霉病、葉霉病、枯萎病、黃萎病和綿疫病等，同時具有較好的促生作用，具有一菌多效的特點。其作用機制包括競爭、重寄生、溶菌、拮抗和誘導抗性等。由于該生物制劑是一種廣譜抗性的生防菌劑，對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有重要的社會意義。這種以防治番茄灰霉病為主的廣譜性生防菌劑，可以有效的控制保護地生產(chǎn)病害的發(fā)生，在滿足菜籃子需求的基礎(chǔ)上，更保證了有機蔬菜的安全生產(chǎn)。

一、成果簡介 “長壽老人源短雙歧桿菌生理功能研究及直投式發(fā)酵劑的制備”受國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃 (863 項目)的資助。本課題從我國廣西巴馬百歲以上長壽老人腸道篩選適于直投式發(fā)酵劑制備 的優(yōu)良雙歧桿菌菌株，構(gòu)建膜過濾高密度培養(yǎng)體系，優(yōu)化凍干發(fā)酵劑制備技術(shù)，生產(chǎn)高活性 直投式雙歧桿菌菌粉。 技術(shù)指標：分