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可以量產(chǎn)/n針對(duì)當(dāng)前工業(yè)發(fā)展對(duì)脂肪酶的大量需求與脂肪酶實(shí)際表達(dá)水平較低 的技術(shù)瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達(dá)技術(shù)關(guān)鍵，建立了真菌脂肪酶高 效表達(dá)技術(shù)平臺(tái)，構(gòu)建的米根霉脂肪酶基因工程菌 10L 發(fā)酵酶活力可達(dá) 40,000U/ml 以上，為當(dāng)前報(bào)道的最高水平，具有極強(qiáng)的國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力。產(chǎn) 品可用于油脂水解、轉(zhuǎn)酯，食品加工、烘焙，生物柴油制備，飼料添加 劑，再生紙脫墨等廣泛用途。建設(shè)其發(fā)酵生產(chǎn)線預(yù)計(jì)需要 800-1000 萬(wàn)元，經(jīng)濟(jì)效益可觀。米根霉脂肪酶可用于油脂水解、轉(zhuǎn)酯，食品加工、烘焙，生物柴油

油脂精煉過(guò)程中，脫膠是非常重要的一步工序，脫膠效果的好壞直接影響到油脂精煉的效率和最終產(chǎn)品的質(zhì)量。傳統(tǒng)的脫膠方法常存在產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定、消耗大、得率低、“三廢”排放量大等問(wèn)題。酶法脫膠工藝是現(xiàn)代工業(yè)生物催化技術(shù)在傳統(tǒng)油脂行業(yè)中的應(yīng)用，是對(duì)現(xiàn)有化學(xué)或物理脫膠工藝的改進(jìn)，以提高其經(jīng)濟(jì)性和環(huán)保性，有著廣泛的發(fā)展前景和重要的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)價(jià)值。本技術(shù)以自行篩選所得菌株BIT-18表達(dá)的磷脂酶為對(duì)象，開(kāi)發(fā)了該磷脂酶在大豆油、菜籽油等常見(jiàn)油脂酶法脫膠中的應(yīng)用，已完成了實(shí)驗(yàn)室工藝優(yōu)化，建立了適于工廠規(guī)模油脂酶法脫膠工藝

糖化酶是糖化工業(yè)的重要酶制劑，但生產(chǎn)上的主要問(wèn)題是：酶活力低、沒(méi)有常溫條件下的酶產(chǎn)品（使得糖化工藝中需要消耗大量能源）。利用定向進(jìn)化技術(shù)獲取較低溫度下活力提高數(shù)倍~數(shù)十倍的新的酶分子、并確定新基因序列，轉(zhuǎn)化受體菌。 我們的技術(shù)優(yōu)勢(shì)：基因分離技術(shù)是我們的優(yōu)勢(shì)，已報(bào)道全長(zhǎng)基因序列15條，在天津基金資助下最近已克隆了糖化酶基因。定向進(jìn)化是我們目前的主要研究方向之一，在留學(xué)回國(guó)科研啟動(dòng)基金資助下對(duì)谷胱苷肽-S-轉(zhuǎn)移酶脫氯活性進(jìn)行提高，已有研究進(jìn)展。

全自動(dòng)酶標(biāo)儀318C+廣泛用于各大高校科研機(jī)構(gòu)、技術(shù)質(zhì)量監(jiān)督局、動(dòng)植物檢疫及食品飼料行業(yè)等，除開(kāi)展血液學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤免疫學(xué)、傳染病免疫學(xué)、TORCH感染免疫學(xué)、基因檢驗(yàn)項(xiàng)目外、還可以對(duì)食品安全三聚氰胺、黃曲霉素、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留等所有采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Elisa）進(jìn)行項(xiàng)目檢驗(yàn)，并且有相應(yīng)版本的軟件支持。   產(chǎn)品特點(diǎn)： 1、內(nèi)置嵌入式系統(tǒng)，無(wú)需外接電腦即可操作、存儲(chǔ)、打印; 2、測(cè)量模式：?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)檢測(cè)，雙波長(zhǎng)檢測(cè)，兩點(diǎn)法，動(dòng)力學(xué)法，酶抑制率，終點(diǎn)法、速率法。 3、*可選擇吸光度、Cut-Off定性計(jì)算、單點(diǎn)定標(biāo)、折線回歸、線性回歸、指數(shù)回歸、對(duì)數(shù)回歸、雙對(duì)數(shù)回歸、log-logit、冪回歸、四參數(shù)回歸、酶抑制率等計(jì)算方法；  4、在同一板上可進(jìn)行多至12個(gè)不同項(xiàng)目的測(cè)試，并可同一板檢測(cè)定性和定量項(xiàng)目。 5、*全面完善的質(zhì)控功能，包含westguard多規(guī)則質(zhì)控，即刻法質(zhì)控等多種質(zhì)控圖及質(zhì)控參數(shù)計(jì)算，具有質(zhì)控報(bào)警功能。   技術(shù)參數(shù)： 1、*波長(zhǎng)范圍： 400-800nm 2、*濾光片配置：10個(gè)濾光片位置，標(biāo)配405nm、450nm、492nm、630nm,選配6定制波長(zhǎng) 3、吸光度范圍：0.000―4.000A 4、*光通道數(shù)：8通道光路檢測(cè)，另設(shè)一個(gè)獨(dú)立參比通道（選配） 5、示值穩(wěn)定性：≤±0.002A或≤0.5%T/10min。 6、示值誤差（準(zhǔn)確性）：≤±0.005A或±0.2%T。 7、重復(fù)性：≤0.2%或≤0.2%T。 8、靈敏度：≥0.01（L/mg）。 9、通道差異：≤0.01A。 10、波長(zhǎng)示值誤差：±1nm 11、半寬度：≤8nm 12、分辨率：0.001A（顯示），0.0001A（內(nèi)部計(jì)算） 13、*讀板速度：?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)≤3秒/96孔，雙波長(zhǎng)≤6秒/96孔 14、振板功能：速度和時(shí)間可調(diào) 15、光源類型：進(jìn)口鹵鎢燈 16、板條類型：標(biāo)準(zhǔn)96孔或其他型酶標(biāo)板、條 17、適用孔型：平底、U型和V型 18、顯示方式：7寸彩色液晶顯示屏顯示 19、輸入方式：觸摸屏輸入，可選配鼠標(biāo)和鍵盤 20、打印：內(nèi)置熱敏打印機(jī)，可外接打印機(jī) 21、數(shù)據(jù)儲(chǔ)存：200,000個(gè)測(cè)試數(shù)據(jù)，500個(gè)以上測(cè)試項(xiàng)目（可擴(kuò)展） 22、接    口： USB(A)口、USB(B)口、串口、并口 23、使用環(huán)境：溫度5-40℃；濕度15%-80% 24、電源電壓：220V±10%，50/60Hz 25、體積：475mm×350mm×210mm（長(zhǎng)×寬×高） 27、重量：11.5Kg

低聚異麥芽糖作為一種健康糖源和功能性食品添加劑廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和飼料添加劑行業(yè)中。在低聚異麥芽糖的制備過(guò)程中，α-葡萄糖苷酶的轉(zhuǎn)糖苷作用是關(guān)鍵步驟。目前國(guó)內(nèi)用于低聚異麥芽糖生產(chǎn)的α-葡萄糖苷酶大多為進(jìn)口品。本項(xiàng)目獲得的?-葡萄糖苷酶生產(chǎn)菌株發(fā)酵液酶活達(dá)到 11 U/mL，為國(guó)內(nèi)外現(xiàn) 有報(bào)道中的最高水平，發(fā)酵工藝簡(jiǎn)單易控。重組菌發(fā)酵液經(jīng)過(guò)濾除菌并濃縮后可以直接作為酶液進(jìn)行轉(zhuǎn)化。酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)低聚異麥芽糖轉(zhuǎn)化率與進(jìn)口酶相似，可以替代進(jìn)口品。 

本項(xiàng)目針對(duì)上述問(wèn)題，從分子、細(xì)胞和個(gè)體水平三個(gè)層面上研究人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)生物學(xué)行為及相關(guān)技術(shù)的臨床應(yīng)用，旨在提高兒童腫瘤療效。 1、主要科技內(nèi)容和技術(shù)特點(diǎn)： 1） 率先在國(guó)內(nèi)外建立RT-PCR和實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)hTERT法，該法簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)、安全，適用于臨床推廣應(yīng)用。該項(xiàng)技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于兒童惡性腫瘤診斷、監(jiān)測(cè)和指導(dǎo)個(gè)體化治療，提高了兒童腫瘤的診療水平。 2）首次在國(guó)內(nèi)外研究體內(nèi)造血干細(xì)胞hTERT的生物學(xué)行為，證明了hTERT與促紅細(xì)胞生成素的關(guān)系，并系統(tǒng)研究了惡性腫瘤細(xì)胞hTERT的生物學(xué)行為， 探討腫瘤細(xì)胞中Aurora A與hTERT及端粒酶表達(dá)的相關(guān)性，提出hTERT與細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)紊亂相互作用促進(jìn)腫瘤發(fā)生和發(fā)展的新觀點(diǎn)，為惡性腫瘤在分子水平上的監(jiān)測(cè)和以hTERT為靶點(diǎn)的生物工程治療提供了依據(jù)。 3） 在國(guó)內(nèi)外首次闡明端粒酶重建對(duì)成纖維細(xì)胞遷移能力和生物節(jié)律的調(diào)控，把端粒酶、hTERT生物學(xué)行為和生物節(jié)律與腫瘤擇時(shí)治療有機(jī)結(jié)合，為腫瘤治療提供了一條新路徑。實(shí)踐證明，在該理論指導(dǎo)下進(jìn)行化療，可明顯提高腫瘤化療效果，且毒副作用明顯減少。

CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated proteins)是目前最常用的基因編輯工具酶，在科研領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用，而在臨床方面的應(yīng)用因?yàn)槠涿摪谢钚砸欢韧磺啊Ｋㄟ^(guò)guide RNA（gRNA）與靶向DNA序列的配對(duì)，從而將Cas9錨定在靶向基因并誘導(dǎo)產(chǎn)生DNA雙鏈斷裂（DSB）。在基因編輯誘發(fā)的DSB的修復(fù)過(guò)程中，一定幾率會(huì)產(chǎn)生基因突變或者外源DNA片段的插入，從而達(dá)到基因編輯的目的。在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中，一個(gè)好的基因編輯酶Cas9需要同時(shí)滿足高效切割靶位點(diǎn)、低脫靶活性和低染色體異常三個(gè)特點(diǎn)。目前在這三個(gè)方面，有一部分基于PCR的方法用于估算基因編輯效率，但其結(jié)果可靠性有待提高；有一些基于高通量測(cè)序的方法可以在體內(nèi)或者體外檢測(cè)基因編輯酶的脫靶活性；尚無(wú)系統(tǒng)的可定量的測(cè)量基因組異常結(jié)構(gòu)的方法。本項(xiàng)目開(kāi)發(fā)了一種新的方法，可以用來(lái)同時(shí)定量檢測(cè)Cas9編輯效率和脫靶活性以及編輯引起的染色體異常結(jié)構(gòu)，即primer-extension-mediated sequencing（PEM-seq）。這是對(duì)基因編輯和DNA損傷修復(fù)等領(lǐng)域都有巨大促進(jìn)作用的新技術(shù)。與此同時(shí)，該項(xiàng)目包括了該團(tuán)隊(duì)利用PEM-seq篩選出的一個(gè)相比于現(xiàn)有Cas9變體具有更低脫靶活性且與野生型Cas9切割效率相當(dāng)?shù)腃as9變體further enhanced Cas9 (FeCas9)。

發(fā)酵香腸是一類高檔肉制品，以其風(fēng)味受到消費(fèi)者歡迎。本技術(shù)利用酶法促 進(jìn)發(fā)酵香腸生產(chǎn)過(guò)程中風(fēng)味的形成，在保持產(chǎn)品原有風(fēng)味、香型不變的情況下， 使其風(fēng)味物質(zhì)形成量增大 7 倍（以 GC/MS 出峰面積計(jì)），生產(chǎn)時(shí)間明顯縮短，產(chǎn) 品風(fēng)味更濃、持久性更強(qiáng)。

5’-核苷酸為生物體內(nèi)重要的生化物質(zhì)，參與多種生理生化反應(yīng)。本項(xiàng)目即利用核糖核酸（RNA）為原料，通過(guò)酶催化反應(yīng)生成四種5’－核苷酸，再經(jīng)分離純化，最后獲得高品位的5’－腺苷酸（5’－AMP）、5’－鳥(niǎo)苷酸（5’－GMP）、5’－胞苷酸（ ’－CMP）和5’－尿苷酸（5’－UMP）等四種5’－核苷酸產(chǎn)品。這四種核苷酸目前作為營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化劑，添加到嬰兒配方奶粉中，或作為各種核酸藥物中間體。 本項(xiàng)目的特點(diǎn)是：1）提取高活力的磷酸二酯酶，代替桔青霉直接發(fā)酵液，大大減少了設(shè)備投資及生產(chǎn)成本，有效地消除了對(duì)環(huán)境的污染；2）通過(guò)對(duì)酶的預(yù)處理，有效地控制了酶反應(yīng)過(guò)程中的副反應(yīng)，使核苷酸轉(zhuǎn)化率明顯提高；3）通過(guò)新型離子交換樹(shù)脂的有序排列組合，可一次分離純化得到高純度單核苷酸，技術(shù)上收率達(dá)80%以上；4）使用本項(xiàng)目生產(chǎn)出來(lái)的產(chǎn)品，含量和純度均可達(dá) %以上。達(dá)到國(guó)外先進(jìn)水平。

已有樣品/n針對(duì)酶在工程化應(yīng)用中的缺陷，如易失活、不具回收性、抗逆性差 等，采用新型固定化技術(shù)，制備出具有高活性、高耐逆和工程化回用性 良好的固定化脂肪酶，提高酶活力 10-46 倍。如：以碳納米管為載體整 合其它方法固定化 BCL，固定化酶最大蛋白比活達(dá) 50,200 U/min/g protein，酶活回收率達(dá) 3,740%，為游離酶的 54 倍，是 MPR-NKA 固定化 酶的 1.5 倍，且大幅縮短了酶促反應(yīng)時(shí)間，10 分鐘就能使手性拆分反應(yīng) 達(dá)到平衡，較國(guó)際報(bào)道的最高水平提高 200 倍，