网上赌博游戏犯法吗-哪里网上赌博合法_网上百家乐游戏玩法_全讯网600cc (中国)·官方网站

可以量產(chǎn)/n該項(xiàng)目提出多病因系統(tǒng)防控的科學(xué)構(gòu)思和總體目標(biāo)，針對(duì)豬病防控中存在基礎(chǔ)研究薄弱、防控技術(shù)與產(chǎn)品缺乏等重大科技問題，圍繞豬流感（SI）、豬細(xì)小病毒病（PPV）、豬圓環(huán)病毒病（PCV2）、豬鏈球菌病（SS）、副豬嗜血桿菌病（HPS）、豬萎縮性鼻炎（AR）和豬痢疾（SD）等重大豬病，重點(diǎn)開展新型疫苗和診斷制劑等防控技術(shù)研發(fā)，最終形成產(chǎn)品及防控技術(shù)的集成新，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化、高效轉(zhuǎn)化及推廣應(yīng)用。形成了45 項(xiàng)新產(chǎn)品。獲8 項(xiàng)新獸藥注冊(cè)證書。疫苗系列創(chuàng)新產(chǎn)品為解決臨床上重大豬病危害，多病因共

產(chǎn)品詳細(xì)介紹 壁球場(chǎng)建設(shè)簡(jiǎn)介一、 場(chǎng)地標(biāo)準(zhǔn)（國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)競(jìng)賽場(chǎng)地）寬6.4米，長(zhǎng)9.75米，前高4.57米，后高2.13米，天花高度5～6米，響板高度48厘米，正面發(fā)球線高度1.83米，地面發(fā)球線距后墻4.26米，半場(chǎng)線將地面發(fā)球線與后墻從中心向左右平分，發(fā)球區(qū)為1.6米見方。二、 技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)　　墻體系統(tǒng)：美國(guó)SPORTWALL彈力批蕩系統(tǒng)　　地板系統(tǒng)：18mm厚楓木地板　　玻璃后墻系統(tǒng)：12mm厚合資鋼化玻璃和五金配件三、 壁球場(chǎng)產(chǎn)品組合　　（一）墻體系統(tǒng)　　品牌：SPORTWALL　　材料性能：　　1. 本產(chǎn)品為樹脂基體,非一般水溶性系統(tǒng),在灰料完成后之養(yǎng)護(hù)期內(nèi),墻身不會(huì)因水分蒸發(fā)而收縮出現(xiàn)裂縫，更不會(huì)出現(xiàn)滋生海藻或青苔的問題；　　2. 不需要重復(fù)灑水來促使灰料基體有足夠強(qiáng)度,因此不會(huì)對(duì)地板造成不良的影響或破壞；　　3. 本產(chǎn)品因不含纖維,可以減少墻身灰層之厚度而又有足夠之抗壓功能;　　4. 當(dāng)灰料完成后，其感觀平滑、均勻；　　5. 在球的高速撞擊和球拍的不斷打擊下依然不改變其顏色；　　6. 極好地預(yù)防球的反作用力；　　7. 易維護(hù)。（二）地板系統(tǒng)　　材料性能： 　　1. 對(duì)球的反彈性能良好；　　2. 減震、抗震；　　3. 隔音效果好；　　4. 獨(dú)有彈力軟墊，為堅(jiān)硬的楓木地板提供特有彈性及承受重壓，降低運(yùn)動(dòng)員在地板上因彈跳所帶來的震傷機(jī)會(huì)。施工工藝：

電力機(jī)車運(yùn)輸方式在保護(hù)環(huán)境的同時(shí)也對(duì)電網(wǎng)造成了嚴(yán)重“污染”，因電力機(jī)車為單相供電,這種單相負(fù)荷就造成了供電網(wǎng)的嚴(yán)重三相不平衡及低的功率因數(shù)，并產(chǎn)生負(fù)序電流。目前世界各國(guó)解決這一問題的唯一途徑就是在鐵路沿線適當(dāng)位置安裝SVC系統(tǒng)，通過SVC的分相快速補(bǔ)償功能來平衡三相電網(wǎng)，并通過濾波裝置來提高功率因數(shù)。 系統(tǒng)具有如下特點(diǎn)： ■消除無功倒送，提高功率因數(shù) SVC投運(yùn)前，原有電容器在區(qū)段無機(jī)車運(yùn)行狀態(tài)下向系統(tǒng)注入大量無功，變電所的平均功率因數(shù)為0.88； SVC投運(yùn)后，可有效解決電容器無功倒送問題，將變電所功率因數(shù)提到0.92以上。 ■抑制高次諧波 SVC的濾波裝置對(duì)電氣化鐵道所產(chǎn)生的高次諧波具有很好的治理作用，特別是對(duì)3次、5次、7次諧波的治理效果尤為明顯。SVC投運(yùn)后，各次諧波電壓的畸變率均無超標(biāo)現(xiàn)象，滿足了用戶的運(yùn)行要求。 ■降低電壓不平衡度、減少負(fù)序干擾 SVC投運(yùn)后，對(duì)改善電壓的不平衡狀態(tài)起到了很好的作用，電壓不平衡度明顯降低，完全滿足各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)的要求。 ■減少機(jī)車所引起的電流沖擊、電壓波動(dòng)，優(yōu)化電能質(zhì)量，提高運(yùn)輸能力。 SVC的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)無功補(bǔ)償效能，有效降低了因機(jī)車所引起的電流沖擊及電壓波動(dòng)，使電能質(zhì)量得以優(yōu)化，顯著提高了電鐵的運(yùn)輸能力。技術(shù)數(shù)據(jù)應(yīng)用：電鐵牽引變電站觸發(fā)方式：光電觸發(fā)電網(wǎng)電壓：27.5kV閥組結(jié)構(gòu)：開放式、熱管自冷型    式：TCR+FC控制系統(tǒng)：雙CPU 全數(shù)字控制系統(tǒng)TCR容量：3.6Mvar響應(yīng)時(shí)間：<10msFC 容量：4.8Mvar調(diào)節(jié)范圍：-100％ - +100％濾波通道：H3

天網(wǎng)工程是指為滿足城市治安防控和城市管理需要，利用GIS地圖、圖像采集、傳輸、控制、顯示等設(shè)備和控制軟件組成，對(duì)固定區(qū)域進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控和信息記錄的視頻監(jiān)控系統(tǒng)。 天網(wǎng)工程通過在交通要道、治安卡口、公共聚集場(chǎng)所、賓館、學(xué)校、醫(yī)院以及治安復(fù)雜場(chǎng)所安裝視頻監(jiān)控設(shè)備，利用視頻專網(wǎng)、互聯(lián)網(wǎng)、移動(dòng)等網(wǎng)絡(luò)通網(wǎng)閘把一定區(qū)域內(nèi)所有視頻監(jiān)控點(diǎn)圖像傳播到監(jiān)控中心（即“天網(wǎng)工程”管理平臺(tái)），對(duì)刑事案件、治安案件、交通違章、城管違章等圖像信息分類，為強(qiáng)化城市綜合管理、預(yù)防打擊犯罪和突發(fā)性治安災(zāi)害事故提供可靠的影像資料。 ? 一、天網(wǎng)工程覆蓋范圍 我司建設(shè)的天網(wǎng)工程基于“防衛(wèi)空間理論的場(chǎng)景式布建模型”，利用“圈、塊、格、線、點(diǎn)”的布局建設(shè)，重點(diǎn)加強(qiáng)出入口、路口、路段、重點(diǎn)區(qū)域、案件高發(fā)區(qū)等區(qū)域布控，完善靜態(tài)防控網(wǎng)、地面防控網(wǎng)、空中防控網(wǎng)三張網(wǎng)的建設(shè)，并最終形成全市“閉環(huán)布控”，打造一個(gè)“立體化前端防控系統(tǒng)”。 ? 依靠三張防控網(wǎng)的建設(shè)，完善如下場(chǎng)景前端點(diǎn)位建設(shè)，形成閉環(huán)布控： （1）出入口布控：縣際交界處主要出入口、高速路及快速路出入口、高速樞紐站、縣出入城鎮(zhèn)治安卡口和執(zhí)法站。 （2）路口布控：主干道與主干道、主干道與次干道、次干道與次干道、次干道與支路、支路與支路等交叉口。 （3）路段布控：對(duì)于人流密集及重點(diǎn)道路，沿道路每個(gè)50米布設(shè)1個(gè)監(jiān)控點(diǎn)位，同時(shí)監(jiān)控車流及人流情況。 （4）重點(diǎn)區(qū)域布控：黨政行政機(jī)關(guān)駐地、金融機(jī)構(gòu)、科教文衛(wèi)機(jī)構(gòu)、娛樂場(chǎng)所、公交車場(chǎng)站、火車站、鐵路沿線及其他人員密集區(qū)域。 （5）案件高發(fā)區(qū)布控：案件高發(fā)區(qū)域點(diǎn)位作為重點(diǎn)監(jiān)控點(diǎn)位。 二、天網(wǎng)工程系統(tǒng)組成 1.智慧感知前端 根據(jù)具體應(yīng)用場(chǎng)景不同，天網(wǎng)工程采用多種樣式的攝像機(jī)： 在商業(yè)區(qū)、公園、小區(qū)口等公共場(chǎng)所布置帶探針功能星光級(jí)高速球。 在城市制高點(diǎn)布置全景攝像機(jī)，在重點(diǎn)區(qū)域布置無人機(jī)進(jìn)行航拍。 在國(guó)、省道與支線道路交叉口安裝道路智慧監(jiān)控?cái)z像機(jī)，進(jìn)行交通視頻監(jiān)控、交通違法行為監(jiān)測(cè)等。 在超市、大樓、火車站、港口等出入口設(shè)置人臉識(shí)別攝像機(jī)，實(shí)時(shí)視頻檢測(cè)和照片信息檢索，與人臉注冊(cè)庫(kù)內(nèi)高危人臉進(jìn)行實(shí)時(shí)比對(duì)識(shí)別。 2.數(shù)據(jù)傳輸 天網(wǎng)工程結(jié)合運(yùn)營(yíng)商光接入網(wǎng)絡(luò)，實(shí)現(xiàn)端到端的高速連接。 天網(wǎng)工程中，視頻監(jiān)控前端通過運(yùn)營(yíng)商獨(dú)立的光接入網(wǎng)，接入到運(yùn)營(yíng)商的機(jī)房中，與核心交換機(jī)連接，同時(shí)保證信息安全性和傳輸速率高效性。 視頻存儲(chǔ)和服務(wù)器部署在運(yùn)營(yíng)商機(jī)房中，通過高速光網(wǎng)絡(luò)與核心交換機(jī)連接。 公安部門機(jī)構(gòu)通過運(yùn)營(yíng)商的光接入網(wǎng)絡(luò)，接入到運(yùn)營(yíng)商的機(jī)房中，方便訪問和調(diào)看視頻監(jiān)控及相關(guān)數(shù)據(jù)。 3.視頻云存儲(chǔ) 視頻云存儲(chǔ)系統(tǒng)采用前端攝像機(jī)直寫存儲(chǔ)設(shè)備的方式，使用集群方案解決單節(jié)點(diǎn)失效問題，并利用負(fù)載均衡技術(shù)充分利用各存儲(chǔ)節(jié)點(diǎn)的性能；采用統(tǒng)一接口與平臺(tái)對(duì)接，降低平臺(tái)維護(hù)和用戶管理的復(fù)雜度。 平臺(tái)管理中心僅和云存儲(chǔ)系統(tǒng)中的云存儲(chǔ)管理集群完成各種具體業(yè)務(wù)的信令交互工作，其他數(shù)據(jù)存儲(chǔ)和讀取工作直接由存儲(chǔ)節(jié)點(diǎn)完成。采用信令和視頻數(shù)據(jù)的完全分離，降低整個(gè)系統(tǒng)的網(wǎng)絡(luò)壓力，提高整體性能。 ? 視頻云存儲(chǔ)邏輯架構(gòu)圖 視頻云存儲(chǔ)系統(tǒng)的特點(diǎn)： ??采用目前技術(shù)領(lǐng)先的視頻云存儲(chǔ)方式，新建視頻云存儲(chǔ)系統(tǒng)，有效解決海量高清視頻圖像數(shù)據(jù)的存儲(chǔ)和管理需求，實(shí)現(xiàn)分布式存儲(chǔ)，虛擬化集中管理。 ??為充分利舊，將原有的視頻存儲(chǔ)系統(tǒng)改造融入視頻云存儲(chǔ)系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)管理范圍內(nèi)可利用視頻資源的統(tǒng)一存儲(chǔ)、統(tǒng)一管理、統(tǒng)一調(diào)閱，避免重復(fù)投資。? ??視頻云存儲(chǔ)系統(tǒng)提供高速數(shù)據(jù)接口，為應(yīng)用平臺(tái)提供視頻數(shù)據(jù)高效檢索、快速調(diào)取等服務(wù)功能，為公安業(yè)務(wù)應(yīng)用提供有力支撐。 ??視頻云存儲(chǔ)系統(tǒng)提供標(biāo)準(zhǔn)的運(yùn)維接口，維護(hù)便捷，實(shí)現(xiàn)高效實(shí)用的管理及使用機(jī)制。 4.數(shù)據(jù)挖掘 ? 天網(wǎng)工程的數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)能夠自動(dòng)采集到的車輛圖像進(jìn)行分析，提取關(guān)鍵信息，包括顏色、車型、車牌等。最常用的是對(duì)車輛跟蹤放大，自動(dòng)識(shí)別車牌號(hào)碼，減少人工識(shí)別輸入車牌的工作，提高效率。 采用高效使用的人臉監(jiān)控和比對(duì)系統(tǒng)，第一可幫助公安偵查人員快速識(shí)別+辨別特定人員真實(shí)身份，把過去難以想象的千萬級(jí)的海量照片庫(kù)比對(duì)需求變成現(xiàn)實(shí)，從而有效的為公安視頻偵查、治安管理、刑偵立案等工作提供實(shí)戰(zhàn)上的有效幫助和解決方法。第二可幫助公安偵查人員辦案時(shí)候追查和通緝，真正從打變?yōu)榉溃軌驑O大的減少警力資源浪費(fèi)和事故發(fā)生概率。 使用行為分析系統(tǒng)，可以識(shí)別視頻中特定人的動(dòng)作，對(duì)出現(xiàn)危險(xiǎn)和異常的情況，及時(shí)報(bào)警，幫助相關(guān)管理人員及時(shí)介入。

公共安全連著千家萬戶，確保公共安全事關(guān)人民群眾生命財(cái)產(chǎn)安全，事關(guān)改革發(fā)展穩(wěn)定大局。十八大報(bào)告強(qiáng)調(diào)“要深化平安建設(shè)，完善立體化社會(huì)治安防控體系”，中央已將公共安全視頻監(jiān)控系統(tǒng)建設(shè)納入“十三五”規(guī)劃和國(guó)家安全保障能力建設(shè)規(guī)劃，部署開展“雪亮工程”建設(shè)。近年來國(guó)家安防事業(yè)不斷向鄉(xiāng)村推進(jìn)，“雪亮工程”不僅是視頻監(jiān)控全覆蓋工程的鞏固和延伸也是“互聯(lián)網(wǎng)+”環(huán)境下加強(qiáng)和創(chuàng)新社會(huì)治安防控體系建設(shè)的重要途徑。因?yàn)椤叭罕姷难劬κ茄┝恋摹保虼私醒┝凉こ蹋且豁?xiàng)群眾性的民安工程、民心工程。 一、介紹 雪亮工程是以縣，鄉(xiāng)，鎮(zhèn)為基礎(chǔ)的三級(jí)綜治中心為指揮平臺(tái)、以綜治信息化為支撐、以網(wǎng)格化管理為基礎(chǔ)、以公共安全視頻監(jiān)控聯(lián)網(wǎng)應(yīng)用為重點(diǎn)的“群眾性治安防控工程”。它通過三級(jí)綜治中心建設(shè)把治安防范措施延伸到群眾身邊，發(fā)動(dòng)社會(huì)力量和廣大群眾共同監(jiān)看視頻監(jiān)控，共同參與治安防范，從而真正實(shí)現(xiàn)治安防控“全覆蓋、無死角”。 二、解決方案 1.雪亮工程系統(tǒng)前端解決方案 （1）道路（車道行人支路口）監(jiān)控子系統(tǒng) 加強(qiáng)對(duì)干線道路過往車輛的監(jiān)控，可以為及時(shí)快速偵破以交通工具為線索的案件提供強(qiáng)有力的技術(shù)支撐手段；加強(qiáng)對(duì)人行道上過往行人的監(jiān)控，可以為詐騙、搶劫，盜竊等案件的偵破提供有力的線索。 （2）復(fù)雜場(chǎng)所監(jiān)控系統(tǒng) 一是公共復(fù)雜場(chǎng)所，包括體育場(chǎng)館、火車站、碼頭等等；二是各類專業(yè)市場(chǎng)，包括花鳥市場(chǎng)，農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)，證券交易市場(chǎng)；三是治安復(fù)雜區(qū)域，包括特色商品街、城市步行街等；四是人口集中區(qū)域，包括城中村，居民小區(qū)、大型企業(yè)宿舍區(qū)等。 （3）高空巡檢系統(tǒng) 高空監(jiān)控系統(tǒng)最主要的作用就是對(duì)城市空間領(lǐng)域進(jìn)行全方位立體化綜合視頻監(jiān)控，通過高空瞭望系統(tǒng)的巡檢功能，電視不間斷地對(duì)城市進(jìn)行全方位的立體式監(jiān)控掃描，及時(shí)發(fā)現(xiàn)可以點(diǎn)。第一時(shí)間進(jìn)行力量調(diào)度，并對(duì)時(shí)間的發(fā)展情況和事態(tài)的全程變化狀況全程跟蹤、實(shí)時(shí)錄像、調(diào)查取證。 （4）前端智能感知系統(tǒng) 槍機(jī)、球機(jī)以及智能跟蹤系統(tǒng)均擁有對(duì)于監(jiān)控場(chǎng)景中所有運(yùn)動(dòng)目標(biāo)物的提取及特征分析工程，不僅可以對(duì)運(yùn)動(dòng)目標(biāo)物進(jìn)行人、車類型分類，同事可對(duì)運(yùn)動(dòng)目標(biāo)的顏色、尺寸。方向、速度等特征進(jìn)行分析提取，以快照和結(jié)構(gòu)化數(shù)據(jù)的方式在系統(tǒng)呈現(xiàn)。 2.雪亮工程后臺(tái)系統(tǒng)解決方案 為配合前端設(shè)備的正常工作以及數(shù)據(jù)收集后的處理，雪亮工程系統(tǒng)解決方案至關(guān)重要。其中包括了，數(shù)據(jù)的傳輸，儲(chǔ)存，分類，對(duì)比，分析等解決手段，極大的支撐了雪亮工程的進(jìn)行。 （1）監(jiān)控系統(tǒng)定標(biāo)設(shè)置 監(jiān)控系統(tǒng)定標(biāo)設(shè)置是指調(diào)校槍機(jī)和球機(jī)的圖像位置，使圖像和實(shí)際位置產(chǎn)生聯(lián)系，將槍，球視頻畫面的對(duì)應(yīng)點(diǎn)進(jìn)行精確匹配的過程。 （2）多級(jí)警戒區(qū)域 高清智能跟蹤系統(tǒng)可便捷設(shè)置三級(jí)警戒區(qū)域。用戶可根據(jù)實(shí)際場(chǎng)景和監(jiān)控區(qū)域的重要性劃分各級(jí)警戒區(qū)域，同時(shí)也可以設(shè)置對(duì)某些特定區(qū)域的屏蔽，來保障跟蹤效果和提高跟蹤效率。 （3）多種跟蹤模式 高清智能跟蹤系統(tǒng)有自動(dòng)跟蹤、半自動(dòng)兩種跟蹤模式，同時(shí)也支持手動(dòng)控制，在自動(dòng)模式，系統(tǒng)自動(dòng)對(duì)移動(dòng)目標(biāo)定位跟蹤，并在多個(gè)目標(biāo)間切換，切換時(shí)間可設(shè)置。半自動(dòng)下，單點(diǎn)某一目標(biāo)，則系統(tǒng)自動(dòng)對(duì)某一目標(biāo)持續(xù)跟蹤。在手動(dòng)控制模式下，可手動(dòng)控制球機(jī)，秋季不再自動(dòng)跟蹤。 （4）特征識(shí)別算法系統(tǒng) 通過目標(biāo)特征進(jìn)行建模，與照片任務(wù)特征進(jìn)行對(duì)比，自動(dòng)分類，對(duì)特征物體數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，通過與公安系統(tǒng)的對(duì)接，判斷目標(biāo)人或車是否有違法行為，精確尋找犯罪分子。 ? 3.雪亮工程實(shí)施解決方案 （1）以縣，鎮(zhèn)，鄉(xiāng)全面的網(wǎng)絡(luò)覆蓋，建立健全基層工作人員、網(wǎng)格員每日巡檢，網(wǎng)絡(luò)運(yùn)營(yíng)公司定期的維護(hù)保養(yǎng)常態(tài)機(jī)制，并在先期建設(shè)中，組織基層工作人員、網(wǎng)格員了解該地區(qū)雪亮工程線路、點(diǎn)位，學(xué)習(xí)設(shè)備運(yùn)行及日常維護(hù)知識(shí)，以便于后期的日常巡線檢查工作，隨時(shí)的解疑工作，及時(shí)的維修調(diào)度工作及時(shí)的運(yùn)行故障報(bào)告工作等。 （2）鄉(xiāng)鎮(zhèn)全面監(jiān)控布點(diǎn)，按照“圈、塊、格、線、點(diǎn)”的布局要求。在區(qū)域內(nèi)主要走道、公共區(qū)域安裝高清網(wǎng)絡(luò)槍機(jī)，以實(shí)現(xiàn)對(duì)人員流動(dòng)走向有效監(jiān)控；在廣場(chǎng)、密集樓宇拐角處安裝高清網(wǎng)絡(luò)球機(jī)，以實(shí)現(xiàn)對(duì)人員密集區(qū)靈活有效監(jiān)控防范，進(jìn)一步清除了監(jiān)控盲區(qū)、縮小點(diǎn)位間距，視頻監(jiān)控全覆蓋、無縫隙，確保人過留像、車過留牌，以有效提升社會(huì)治安防控體系的整體防控效能。 （3）鄉(xiāng)鎮(zhèn)多密集報(bào)警點(diǎn)位布置，一鍵報(bào)警直接傳達(dá)縣，鎮(zhèn)，村三級(jí)報(bào)警，考慮到鄉(xiāng)鎮(zhèn)地區(qū)人員報(bào)警的不及時(shí)性，安裝報(bào)警點(diǎn)位的一件報(bào)警系統(tǒng)，系統(tǒng)有語(yǔ)音對(duì)講、外部喊話功能，中心在發(fā)現(xiàn)可疑情況時(shí)，可通過喊話裝置，及時(shí)提醒、預(yù)警，中心發(fā)現(xiàn)或者接到報(bào)警時(shí)，管理員通過對(duì)講機(jī)發(fā)出警報(bào)，確定處理人員及時(shí)處置。 （4）連接信息化平臺(tái)到監(jiān)控地的居民視頻終端。“雪亮工程”可以下載安裝到每家每戶的電視和手機(jī)客戶端等終端。通過終端，農(nóng)戶可以在家或者千里之外，看到實(shí)時(shí)監(jiān)控畫面，查看相關(guān)信息，同時(shí)利用電視遙控器或手機(jī)進(jìn)行報(bào)警。 ???????????????????? 三、雪亮工程建設(shè)主旨 作為天網(wǎng)向農(nóng)村延伸和深化的一項(xiàng)重要工程，“雪亮工程”充分運(yùn)用信息科技手段構(gòu)建起農(nóng)村治安監(jiān)控網(wǎng)絡(luò)，織密鄉(xiāng)鎮(zhèn)、村治安防控網(wǎng)。以“幸福美麗鄉(xiāng)村”為載體，在每一個(gè)村建設(shè)安裝監(jiān)控平臺(tái)，通過發(fā)動(dòng)群眾。專群結(jié)合，實(shí)現(xiàn)農(nóng)村治安防控和群防群治工作無縫覆蓋，最終推進(jìn)體系融合共享，與天網(wǎng)對(duì)接，與網(wǎng)格化服務(wù)管理融合，實(shí)現(xiàn)平臺(tái)互通、系統(tǒng)對(duì)接、信息共享、高效聯(lián)動(dòng)。 四.定制設(shè)備 ?

眼角膜作為視覺成像系統(tǒng)中一個(gè)至關(guān)重要的組織，是眼睛最前面的凸形高度透明物質(zhì)，可以保護(hù)眼內(nèi)的微結(jié)構(gòu)及組織，并為眼睛提供大部分屈光力。但是角膜損傷、感染及一些先天性因素導(dǎo)致角膜疾病成為全球第二大致盲疾病。同種異體角膜、人工角膜及人的羊膜移植是三類臨床上應(yīng)用最廣泛的角膜疾病治療方法，但是這些方法都會(huì)存在一定的問題或缺陷。因此，利用先進(jìn)的生物制造工程的方法（Biofabrication）開發(fā)出一種治療性的角膜支架，用于替代受疾病影響的角膜組織或誘導(dǎo)角膜組織自身再生，是至關(guān)重要的。目前，角膜組織誘導(dǎo)再生的難點(diǎn)在于角膜基質(zhì)層，該層組織是角膜的主要組成部分，具有多層正交定向的納米纖維板層組成的復(fù)雜結(jié)構(gòu)，利用傳統(tǒng)的生物工程的方法很難真實(shí)地模擬基質(zhì)層的結(jié)構(gòu)。纖維板層之間分布著角膜基質(zhì)細(xì)胞，這種細(xì)胞在體外培養(yǎng)及角膜組織損傷時(shí)很容易轉(zhuǎn)化為角膜成纖維細(xì)胞及肌成纖維細(xì)胞，導(dǎo)致角膜出現(xiàn)瘢痕。因此，制備能夠模擬天然角膜基質(zhì)結(jié)構(gòu)的支架，同時(shí)保持角膜基質(zhì)細(xì)胞的表型，誘導(dǎo)角膜基質(zhì)的再生，是一個(gè)重大的挑戰(zhàn)。針對(duì)這一難題，彌勝利和孫偉課題組提出了使用近場(chǎng)靜電紡絲技術(shù)制備網(wǎng)格狀的亞微米纖維支架，并和水凝膠技術(shù)結(jié)合，制備了纖維水凝膠復(fù)合支架，用于模擬正交定向的角膜基質(zhì)板層結(jié)構(gòu)和板層之間起連接作用的糖蛋白。課題組提出了一種最優(yōu)的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)及化學(xué)因子的組合，可以抑制角膜基質(zhì)細(xì)胞的成纖維分化，保持其表型，并最終實(shí)現(xiàn)角膜基質(zhì)的誘導(dǎo)再生。圖1：（a）近場(chǎng)靜電紡絲技術(shù)制備的具有不同纖維間距的PECL網(wǎng)格狀亞微米纖維支架在不同放大倍數(shù)下的SEM圖片；（b）接種在100um網(wǎng)格狀纖維支架上的角膜緣基質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞骨架及細(xì)胞核染色，細(xì)胞可以在支架上沿著纖維方向生長(zhǎng)；（c）5% GelMA水凝膠內(nèi)封裝的角膜緣基質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行活死染色圖片；（d）5% GelMA水凝膠內(nèi)封裝的角膜緣基質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞骨架及細(xì)胞核染色圖片；（e）纖維水凝膠復(fù)合支架的SEM圖片。目前近場(chǎng)靜電紡絲技術(shù)應(yīng)用最廣泛的材料是PCL，但是由于PCL是疏水材料，不利于細(xì)胞的粘附，因此該研究利用PEG作為引發(fā)劑，合成了PEG和PCL的共聚物PECL，顯著提高了PCL的親水性。課題組首次利用近場(chǎng)靜電紡絲技術(shù)成功制備了正交定向的PECL亞微米纖維支架 (圖1a)，角膜緣基質(zhì)干細(xì)胞可以在支架表面黏附并沿著纖維方向鋪展及生長(zhǎng) (圖1b)。研究通過將MA修飾到明膠大分子鏈上合成了GelMA，探究出最優(yōu)的MA修飾度及GelMA濃度，可以使封裝在GelMA水凝膠內(nèi)的角膜緣基質(zhì)干細(xì)胞保持高的細(xì)胞活性(圖1c)并能鋪展開(圖1d)。課題組采用模具灌注的方式制備了纖維水凝膠復(fù)合支架 (圖1e)，通過研究不同纖維間距的網(wǎng)格狀支架對(duì)纖維水凝膠復(fù)合支架理化性能的影響，找出了最優(yōu)的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)可以使纖維水凝膠在力學(xué)性能、透光度和溶脹性方面最接近于天然的角膜組織。研究將角膜緣基質(zhì)干細(xì)胞接種在2D的細(xì)胞培養(yǎng)皿、3D的GelMA水凝膠及最優(yōu)的纖維水凝膠復(fù)合支架內(nèi)，并研究角膜緣基質(zhì)干細(xì)胞在含血清及不含血清的培養(yǎng)基中的分化及角膜基質(zhì)細(xì)胞表型的維持。研究表明，這種最優(yōu)的纖維水凝膠的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)及無血清培養(yǎng)基可以抑制角膜基質(zhì)細(xì)胞向成纖維細(xì)胞分化。圖2 大鼠角膜基質(zhì)內(nèi)板層移植實(shí)驗(yàn)及評(píng)估：（a）5種支架移植后裂隙燈觀察圖片；（b）支架移植后OCT觀察圖片，標(biāo)尺是1000um；（c）術(shù)后不同時(shí)間段中央角膜的厚度；（d）術(shù)后1個(gè)月和3個(gè)月免疫熒光染色圖片觀察組織誘導(dǎo)再生情況，標(biāo)尺是100um；（e）術(shù)后1個(gè)月和3個(gè)月HE染色圖片觀察組織誘導(dǎo)再生情況，標(biāo)尺是100um。最后，研究使用大鼠進(jìn)行角膜內(nèi)的板層移植實(shí)驗(yàn)，分別進(jìn)行了3D GelMA水凝膠、含化學(xué)因子3D GelMA、最優(yōu)纖維水凝膠支架及含化學(xué)因子最優(yōu)纖維水凝膠支架的移植，對(duì)照組為自體角膜移植（圖2a）。術(shù)后通過OCT、免疫熒光染色及HE染色進(jìn)行3個(gè)月的研究觀察（圖2b-e）發(fā)現(xiàn)相比于其他的支架，含化學(xué)因子的最優(yōu)纖維水凝膠支架的移植可以最好地實(shí)現(xiàn)角膜基質(zhì)的誘導(dǎo)再生。?論文鏈接：https://doi.org/10.1038/s41467-020-14887-9