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葡萄糖響應(yīng)型的伴刀豆球蛋白?淀粉納米顆粒的制備方法及其應(yīng)用。本發(fā)明涉及納米顆粒制備和食品醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及伴刀豆球蛋白和支鏈淀粉通過組裝得到葡萄糖響應(yīng)性的納米顆粒及其制備工藝。該制備工藝為配制含氯化鈉的伴刀豆球蛋白(ConA)濃度為0.5?1.5mg/mL的乙酸緩沖溶液，加入一定量的濃度為1?10mg/mL的糊化淀粉乳，制得氯化鈉濃度為0.013?0.120g/mL的懸浮液，在15?35℃下不斷攪

研發(fā)背景：抗凝血藥物的臨床應(yīng)用極為廣泛，在骨科手術(shù)，心臟手術(shù)，抗腦卒中等方面具有數(shù)十年的使用歷史。肝素類藥物，包括目前大范圍應(yīng)用的低分子肝素與合成肝素等是針對諸多臨床適應(yīng)癥不可替代的抗凝血藥物。作為肝素結(jié)構(gòu)上的類似物，巖藻糖基化硫酸軟骨素(FuCS)是近年來被重點關(guān)注的具有抗凝血活性的新結(jié)構(gòu)分子。其可從天然海參中提取得到，深入的天然產(chǎn)物化學研究表明FuCS九糖片段具有與市售低分子量肝素相當?shù)目鼓钚裕乙延^測到此類結(jié)構(gòu)多糖的口服抗凝活性。繼續(xù)研究這一新結(jié)構(gòu)多糖的抗凝活性機制并對相關(guān)分子結(jié)構(gòu)進行優(yōu)化是開發(fā)新一代類肝素抗凝藥物的必要舉措。 前景預(yù)測：肝素的抗凝活性極為出色，目前每年的全球銷售額可達數(shù)十億美元并繼續(xù)保持著較高的增長率。但由于其口服無活性的性質(zhì)，使得相關(guān)臨床應(yīng)用僅局限于醫(yī)院等專業(yè)醫(yī)療機構(gòu)。另一方面，肝素的潛在出血風險是限制肝素大范圍應(yīng)用的另一問題。我們所研究的FuCS九糖是肝素寡糖的結(jié)構(gòu)類似物，同屬于糖胺聚糖家族，但由于FuCS獨特的化學結(jié)構(gòu)，使得其具有口服抗凝活性，且藥理活性機制表明其可選擇性激活內(nèi)源性凝血通路，因而在出血傾向方面相比肝素具有更高的安全性。項目團隊開發(fā)了一種可以簡便合成FuCS九糖的化學合成工藝。這一工藝的實現(xiàn)可以提高FuCS的可獲得性，降低目標藥物的獲取難度，并且保障其后續(xù)開發(fā)中的質(zhì)控水平。該工藝是支撐目前FuCS分子庫建立、后期藥物篩選與中式放大的最優(yōu)合成路線，應(yīng)用前景廣闊。

以工業(yè)發(fā)酵檸檬酸的廢棄玉米渣（含菌絲體）和食用菌工廠化栽培產(chǎn)生的大 量菌根、菌渣為原料，采用高效生物轉(zhuǎn)化和膜譜分離技術(shù)制備新一代植物源氨糖 產(chǎn)品，具有高純度、無甲殼致敏源、無腥味、無重金屬污染的特點，能夠促進關(guān) 節(jié)軟骨恢復(fù)、緩解骨關(guān)節(jié)痛、輔助治療骨關(guān)節(jié)炎，是重要的醫(yī)藥和功能食品原料。 項目申報專利 13 件，其中授權(quán)發(fā)明專利 3 件，授權(quán)實用新型專利 2 件；獲得省高新技術(shù)產(chǎn)品 5 個；獲國家星火計劃 1 項、江蘇省重大成果轉(zhuǎn)化 A 類項目 1 項、國際科技合作計劃（中以合作項目）1 項、江蘇省重點技術(shù)創(chuàng)新計劃項目 1 項江蘇省綠色制造清潔生產(chǎn)及工業(yè)循環(huán)經(jīng)濟項目 1 項；獲具有國際先進水平的省級鑒定成果 2 項；獲中國發(fā)明創(chuàng)業(yè)銀獎 1 項。項目實施應(yīng)用單位建立了新型氨糖柔性生產(chǎn)線，生產(chǎn)的產(chǎn)品總量占國內(nèi)生產(chǎn)總量的 20%以上，近三年來新增銷售 11.3億元，新增利潤 1.22 億元，稅收 5088 萬元，出口創(chuàng)匯 5947 萬美元。項目解決了原料幾丁質(zhì)含量低、提取效率低、精制工藝難等瓶頸問題，提升了氨糖產(chǎn)業(yè)的技術(shù)水平和綜合效益。 

項目簡介研發(fā)背景：抗凝血藥物的臨床應(yīng)用極為廣泛，在骨科手術(shù)，心臟手術(shù)，抗腦卒中等方面具有數(shù)十年的使用歷史。肝素類藥物，包括目前大范圍應(yīng)用的低分子肝素與合成肝素等是針對諸多臨床適應(yīng)癥不可替代的抗凝血藥物。作為肝素結(jié)構(gòu)上的類似物，巖藻糖基化硫酸軟骨素(FuCS)是近年來被重點關(guān)注的具有抗凝血活性的新結(jié)構(gòu)分子。其可從天然海參中提取得到，深入的天然產(chǎn)物化學研究表明 FuCS 九糖片段具有與市售低分子量肝素相當?shù)目鼓钚裕乙延^測到此類結(jié)構(gòu)多糖的口服抗凝活性。繼續(xù)研究這一新結(jié)構(gòu)多糖的抗凝活性機制并對相關(guān)分子結(jié)構(gòu)進行優(yōu)化是開發(fā)新一代類肝素抗凝藥物的必要舉措。前景預(yù)測：肝素的抗凝活性極為出色，目前每年的全球銷售額可達數(shù)十億美元并繼續(xù)保持著較高的增長率。但由于其口服無活性的性質(zhì)，使得相關(guān)臨床應(yīng)用僅局限于醫(yī)院等專業(yè)醫(yī)療機構(gòu)。另一方面，肝素的潛在出血風險是限制肝素大范圍應(yīng)用的另一問題。我們所研究的 FuCS 九糖是肝素寡糖的結(jié)構(gòu)類似物，同屬于糖胺聚糖家族，但由于 FuCS 獨特的化學結(jié)構(gòu)，使得其具有口服抗凝活性，且藥理活性機制表明其可選擇性激活內(nèi)源性凝血通路，因而在出血傾向方面相比肝素具有更高的安全性。項目團隊開發(fā)了一種可以簡便合成 FuCS 九糖的化學合成工藝。這一工藝的實現(xiàn)可以提高 FuCS 的可獲得性，降低目標藥物的獲取難度，并且保障其后續(xù)開發(fā)中的質(zhì)控水平。該工藝是支撐目前 FuCS 分子庫建立、后期藥物篩選與中式放大的最優(yōu)合成路線，應(yīng)用前景廣闊項目團隊 團隊由藥學院李中軍教授領(lǐng)導。李教授是北京大學天然藥物與仿生藥物國家重點實驗室學術(shù)委員會成員，北京大學藥學院學術(shù)委員會成員，其在糖類藥物的基礎(chǔ)研究與技術(shù)開發(fā)方面具有 30 年的實操經(jīng)驗。獲得包括施維雅科學獎在內(nèi)的眾多學術(shù)榮譽，發(fā)表超過 150 篇 SCI 論文，擁有超過 20 項授權(quán)發(fā)明專利。團隊成員包括 3 名副教授，1 名講師，5 名博士研究生及 10 名碩士研究生。李教授領(lǐng)導的團隊與國內(nèi)領(lǐng)先的疫苗生產(chǎn)企業(yè)康希諾生物股份公司保持密切的合作關(guān)系；李教授本人曾長期擔任上市公司——深圳信立泰股份公司的獨立董事；李教授曾開發(fā)一條紅景天苷的合成工藝并成功實現(xiàn)了技術(shù)轉(zhuǎn)讓。李教授在國內(nèi)糖化學與糖類藥物領(lǐng)域積累了深厚的學術(shù)經(jīng)驗，擁有廣泛的人際關(guān)系。應(yīng)用范圍 臨床抗凝血用，包括手術(shù)抗凝血，居家日常抗凝血使用等。項目階段 候選藥物（細胞水平研究階段）。知識產(chǎn)權(quán) 已申報兩項中國發(fā)明專利：  1、 巖藻糖基化硫酸軟骨素寡糖及其制備方法、組合物和用途，申請?zhí)枺?018107787336  2、 巖藻糖基化硫酸軟骨素寡糖糖簇及其制備方法，申請?zhí)?2017103131376合作方式 技術(shù)入股、技術(shù)轉(zhuǎn)讓。

研發(fā)背景：抗凝血藥物的臨床應(yīng)用極為廣泛，在骨科手術(shù)，心臟手術(shù)，抗腦卒中等方面具有數(shù)十年的使用歷史。肝素類藥物，包括目前大范圍應(yīng)用的低分子肝素與合成肝素等是針對諸多臨床適應(yīng)癥不可替代的抗凝血藥物。作為肝素結(jié)構(gòu)上的類似物，巖藻糖基化硫酸軟骨素(FuCS)是近年來被重點關(guān)注的具有抗凝血活性的新結(jié)構(gòu)分子。其可從天然海參中提取得到，深入的天然產(chǎn)物化學研究表明FuCS九糖片段具有與市售低分子量肝素相當?shù)目鼓钚裕乙延^測到此類結(jié)構(gòu)多糖的口服抗凝活性。繼續(xù)研究這一新結(jié)構(gòu)多糖的抗凝活性機制并對相關(guān)分子結(jié)構(gòu)進行優(yōu)化是開發(fā)新一代類肝素抗凝藥物的必要舉措。 前景預(yù)測：肝素的抗凝活性極為出色，目前每年的全球銷售額可達數(shù)十億美元并繼續(xù)保持著較高的增長率。但由于其口服無活性的性質(zhì)，使得相關(guān)臨床應(yīng)用僅局限于醫(yī)院等專業(yè)醫(yī)療機構(gòu)。另一方面，肝素的潛在出血風險是限制肝素大范圍應(yīng)用的另一問題。我們所研究的FuCS九糖是肝素寡糖的結(jié)構(gòu)類似物，同屬于糖胺聚糖家族，但由于FuCS獨特的化學結(jié)構(gòu)，使得其具有口服抗凝活性，且藥理活性機制表明其可選擇性激活內(nèi)源性凝血通路，因而在出血傾向方面相比肝素具有更高的安全性。項目團隊開發(fā)了一種可以簡便合成FuCS九糖的化學合成工藝。這一工藝的實現(xiàn)可以提高FuCS的可獲得性，降低目標藥物的獲取難度，并且保障其后續(xù)開發(fā)中的質(zhì)控水平。該工藝是支撐目前FuCS分子庫建立、后期藥物篩選與中式放大的最優(yōu)合成路線，應(yīng)用前景廣闊。

項目成果/簡介:本發(fā)明提供了一種從紅豆杉中培養(yǎng)篩選產(chǎn)紫杉醇菌的方法.本發(fā)明的方法包括以下步驟:1)對紅豆杉植物的組織進行培養(yǎng),分離純化獲得內(nèi)生真菌;2)培養(yǎng)步驟1)中獲得的內(nèi)生真菌,利用薄層層析對發(fā)酵代謝物進行初篩,篩出可產(chǎn)紫杉醇或其類似物的菌株;3)結(jié)合細胞毒性實驗,測定出代謝物對CHO細胞的抑制率;4)利用高效液相色譜對其作了進一步分析,確定產(chǎn)紫杉醇菌株.本發(fā)明提供的從紅豆杉分離產(chǎn)紫杉醇的方法過程簡單,成本較低.并且通過本發(fā)明提供的方法提取得到的產(chǎn)紫杉醇菌用于微生物培養(yǎng)時,獲得紫杉醇的含量大大增加,該方法為微生物工程提供了更廣闊的途徑.

將β-環(huán)糊精和偶氮苯基團分別修飾于紫杉醇分子上，利用紫杉醇分子骨架與微管蛋白的特異性結(jié)合能力，以及在紫外和可見光照射下偶氮苯分子與β-環(huán)糊精空腔可逆鍵合的性質(zhì)，來調(diào)控微管蛋白的聚集狀態(tài)，進而影響細胞活性。光譜實驗表明，含有紫杉醇的偶氮苯分子在溶液中具有優(yōu)異的光致異構(gòu)性質(zhì)、掃描電鏡實驗發(fā)現(xiàn)，只有在反式偶氮苯修飾紫杉醇和β-環(huán)糊精修飾紫杉醇共同存在下，微管蛋白間才能發(fā)生明顯的聚合現(xiàn)象，同時微管蛋白的形貌由絲狀聚合物轉(zhuǎn)變成了粒徑較大的球狀納米粒子。通過對細胞染色進一步發(fā)現(xiàn)，聚集后的微管廣泛分布在細胞中，能夠強烈改變細胞的形態(tài)并最終導致細胞死亡。該工作為調(diào)控生物大分子的聚集行為提供了一種新的策略。

本發(fā)明提供了一種從紅豆杉中培養(yǎng)篩選產(chǎn)紫杉醇菌的方法.本發(fā)明的方法包括以下步驟:1)對紅豆杉植物的組織進行培養(yǎng),分離純化獲得內(nèi)生真菌;2)培養(yǎng)步驟1)中獲得的內(nèi)生真菌,利用薄層層析對發(fā)酵代謝物進行初篩,篩出可產(chǎn)紫杉醇或其類似物的菌株;3)結(jié)合細胞毒性實驗,測定出代謝物對CHO細胞的抑制率;4)利用高效液相色譜對其作了進一步分析,確定產(chǎn)紫杉醇菌株.本發(fā)明提供的從紅豆杉分離產(chǎn)紫杉醇的方法過程簡單,成本較低.并且通過本發(fā)明提供的方法提取得到的產(chǎn)紫杉醇菌用于微生物培養(yǎng)時,獲得紫杉醇的含量大大增加,該方法為微生物工程提供了更廣闊的途徑.

其他成果/n一種3-MCPD的高效液相色譜-熒光檢測方法，該方法包括如下步驟：1)將3-MCPD水溶液經(jīng)高碘酸鹽溶液處理使其中的3-MCPD裂解成氯乙醛；2)去除過量高碘酸鹽，消除副反應(yīng)；3)熒光衍生化反應(yīng)：將氯乙醛與熒光衍生化試劑反應(yīng)生成具有熒光效應(yīng)的目標物質(zhì)；4)HPLC-FLD測定：對目標物質(zhì)進行分離，并根據(jù)其色譜峰面積對3-MCPD進行定量；所述熒光衍生化試劑為鄰氨基N雜二元環(huán)狀化合物。本發(fā)明通過將一類方便易得、選擇性好、熒光效率高、疏水性較強的新型熒光衍生化試劑用于高效液相色譜-熒光檢測3