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大連民族大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院曹際娟研發(fā)團(tuán)隊成功研發(fā)了針對新型冠狀病毒的新型檢測方法——恒溫?zé)晒饪焖贆z測法，檢測靈敏度可穩(wěn)定達(dá)到1fg/μL（100copies/μL）。該方法較現(xiàn)行通用的RT-PCR法具有快速靈敏、操作簡便、成本低廉、易于推廣的特點，已順利通過天津、廣州的三家實驗室驗證測試。此外，還同步研發(fā)了安全且無傳染性的新型冠狀病毒體外轉(zhuǎn)錄RNA質(zhì)控樣品，已上報全國標(biāo)準(zhǔn)樣品技術(shù)委員會申請國家標(biāo)準(zhǔn)樣品。研發(fā)團(tuán)隊將這些科研成果已無償提供給具有醫(yī)療器械資質(zhì)的企業(yè)用于申報試劑盒生產(chǎn)。 曹際娟研發(fā)團(tuán)隊利用技術(shù)專長，密切分析國際上公布的新型冠狀病毒全基因組序列，開展種內(nèi)保守性比對、種外同源性比對以及差異位點分析，設(shè)計并篩選確定了2 條內(nèi)引物、2 條外引物及2 條環(huán)引物為核心技術(shù)，增強(qiáng)了恒溫?zé)晒鈹U(kuò)增技術(shù)的特異性和靈敏度保證?？朔噭┚o缺、物流不暢等各種困難，聯(lián)合多家實驗室的資源，成功完成了方法的驗證測試。

產(chǎn)品名稱：法羅培南鈉 分子式：C12H14NNaO5S.2.5H2O 分子量：307.3 外觀：類白色結(jié)晶性粉末

一步酶法從頭孢菌素 c（CPC） 生產(chǎn) 7－氨基頭孢烷酸（ 7-ACA） 是繼我們研發(fā)的兩步酶法工藝成功應(yīng)用于工1 成果簡介一步酶法從頭孢菌素 c（CPC） 生產(chǎn) 7－氨基頭孢烷酸（ 7-ACA） 是繼我們研發(fā)的兩步酶法工藝成功應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)以后，在生產(chǎn)頭孢菌素類抗生素醫(yī)藥中間體技術(shù)的又一個突破。與化學(xué)法和兩步酶法相比，一步酶法有工藝簡單、環(huán)保和轉(zhuǎn)化率高、產(chǎn)品質(zhì)量好等優(yōu)點。該技術(shù)采用基因工程技術(shù)對 CPC ?；福ㄒ徊矫阜ㄓ妹福┑幕蜻M(jìn)行了改造，獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構(gòu)建的高效啟動子 HP 以及優(yōu)化組合的調(diào)控表達(dá)元件，構(gòu)建并篩選出了能夠高效、高活性表達(dá)一步酶法用酶——CPC ?；傅幕蚬こ碳?xì)胞株。這是國內(nèi)第一個使得 CPC ?；富钚阅軌蜻_(dá)到工業(yè)應(yīng)用水平的技術(shù)。由于采用了高效的表達(dá)系統(tǒng)和穩(wěn)定的質(zhì)粒，以及組成型表達(dá)結(jié)構(gòu)，使得該基因工程菌遺傳特性非常穩(wěn)定，在發(fā)酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導(dǎo)劑就可以實現(xiàn)高效、高活性表達(dá)。在高效表達(dá) CPC ?；傅幕A(chǔ)上，我們通過在表達(dá)基因上同時引入的特殊基因序列，使得蛋白的純化和固定化工藝一步進(jìn)行。通過自己開發(fā)研制的可重復(fù)使用的固定化載體，可以使得固定化酶活性達(dá)到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質(zhì)，可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC ?；?，酶收率在 90 ％以上，固定化酶活達(dá)到 60U/g 以上。固定化酶可以重復(fù)使用 20 批以上，純化和固定化用載體可以重復(fù)使用。2 技術(shù)指標(biāo)菌 種：基因工程大腸桿菌，卡那抗性，組成型表達(dá)。 發(fā)酵溫度： 37℃ 培 養(yǎng) 基：普通的大腸桿菌培養(yǎng)基，主要成分有玉米漿等廉價的營養(yǎng)源。 發(fā)酵周期： 20 小時 發(fā)酵酶活： 3U/ml 以上（ 5 升發(fā)酵罐） 特 點：遺傳特性穩(wěn)定，不需要添加誘導(dǎo)劑和抗生素，工藝簡單。3 合作方式小試技術(shù)轉(zhuǎn)讓或合作進(jìn)行中試。4 所屬行業(yè)領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生。業(yè)生產(chǎn)以后，在生產(chǎn)頭孢菌素類抗生素醫(yī)藥中間體技術(shù)的又一個突破。與化學(xué)法和兩步酶法相比，一步酶法有工藝簡單、環(huán)保和轉(zhuǎn)化率高、產(chǎn)品質(zhì)量好等優(yōu)點。該技術(shù)采用基因工程技術(shù)對 CPC ?；福ㄒ徊矫阜ㄓ妹福┑幕蜻M(jìn)行了改造，獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構(gòu)建的高效啟動子 HP 以及優(yōu)化組合的調(diào)控表達(dá)元件，構(gòu)建并篩選出了能夠高效、高活性表達(dá)一步酶法用酶——CPC ?；傅幕蚬こ碳?xì)胞株。這是國內(nèi)第一個使得 CPC ?；富钚阅軌蜻_(dá)到工業(yè)應(yīng)用水平的技術(shù)。由于采用了高效的表達(dá)系統(tǒng)和穩(wěn)定的質(zhì)粒，以及組成型表達(dá)結(jié)構(gòu)，使得該基因工程菌遺傳特性非常穩(wěn)定，在發(fā)酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導(dǎo)劑就可以實現(xiàn)高效、高活性表達(dá)。在高效表達(dá) CPC ?；傅幕A(chǔ)上，我們通過在表達(dá)基因上同時引入的特殊基因序列，使得蛋白的純化和固定化工藝一步進(jìn)行。通過自己開發(fā)研制的可重復(fù)使用的固定化載體，可以使得固定化酶活性達(dá)到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質(zhì)，可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶，酶收率在 90 ％以上，固定化酶活達(dá)到 60U/g 以上。固定化酶可以重復(fù)使用 20 批以上，純化和固定化用載體可以重復(fù)使用。

一步酶法從頭孢菌素c（ CPC） 生產(chǎn)7－氨基頭孢烷酸（7-ACA） 是繼我們研發(fā)的兩步酶法工藝成功應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)以后，在生產(chǎn)頭孢菌素類抗生素醫(yī)藥中間體技術(shù)的又一個突破。與化學(xué)法和兩步酶法相比，一步酶法有工藝簡單、環(huán)保和轉(zhuǎn)化率高、產(chǎn)品質(zhì)量好等優(yōu)點。該技術(shù)采用基因工程技術(shù)對 CPC ?；福ㄒ徊矫阜ㄓ妹福┑幕蜻M(jìn)行了改造，獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構(gòu)建的高效啟動子 HP 以及優(yōu)化組合的調(diào)控表達(dá)元件，構(gòu)建并篩選出了能夠高效、高活性表達(dá)一步酶法用酶——CPC ?；傅幕蚬こ碳?xì)胞株。這是國內(nèi)第一個使得 CPC 酰化酶活性能夠達(dá)到工業(yè)應(yīng)用水平的技術(shù)。由于采用了高效的表達(dá)系統(tǒng)和穩(wěn)定的質(zhì)粒，以及組成型表達(dá)結(jié)構(gòu)，使得該基因工程菌遺傳特性非常穩(wěn)定，在發(fā)酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導(dǎo)劑就可以實現(xiàn)高效、高活性表達(dá)。在高效表達(dá) CPC ?；傅幕A(chǔ)上，我們通過在表達(dá)基因上同時引入的特殊基因序列，使得蛋白的純化和固定化工藝一步進(jìn)行。通過自己開發(fā)研制的可重復(fù)使用的固定化載體，可以使得固定化酶活性達(dá)到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質(zhì)，可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶，酶收率在 90 ％以上，固定化酶活達(dá)到 60U/g 以上。固定化酶可以重復(fù)使用 20 批以上，純化和固定化用載體可以重復(fù)使用。

成果描述：酶脫毛是一種公認(rèn)的制革脫毛清潔工藝，在中國的豬皮制革中獲得了成功的應(yīng)用，但一直沒有成功用于牛皮制造。已經(jīng)報道的牛皮的酶脫毛工藝通常是在35℃至42℃的較高溫度下進(jìn)行，由于組織及纖維結(jié)構(gòu)的差異，較高溫度下牛皮膠原纖維容易受到破壞，容易發(fā)生松面、毛孔擴(kuò)大等質(zhì)量缺陷，甚至導(dǎo)致爛面等嚴(yán)重質(zhì)量事故，并且在該溫度條件下實施牛皮酶脫毛，工藝操作和控制難度極大。本技術(shù)提供了一種針對牛皮的低溫酶脫毛工藝，并且完全不使用硫化物。該工藝技術(shù)使用與之配套的脫毛酶制劑，能夠在較低溫度下對牛皮進(jìn)行脫毛處理，解決了長久以來本領(lǐng)域技術(shù)人員一直渴望解決但始終未獲得成功的牛皮酶脫毛制革的技術(shù)難題，并且產(chǎn)生的含蛋白廢水可以替代部分氮肥直接用于農(nóng)業(yè)或城市綠化的灌溉，低溫脫毛同時也節(jié)約了能源的消耗，降低了生產(chǎn)成本，提高了綜合效益。市場前景分析：牛皮制革廠。與同類成果相比的優(yōu)勢分析：國際先進(jìn)。

可以量產(chǎn)/n針對當(dāng)前工業(yè)發(fā)展對脂肪酶的大量需求與脂肪酶實際表達(dá)水平較低 的技術(shù)瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達(dá)技術(shù)關(guān)鍵，建立了真菌脂肪酶高 效表達(dá)技術(shù)平臺，構(gòu)建的米根霉脂肪酶基因工程菌 10L 發(fā)酵酶活力可達(dá) 40,000U/ml 以上，為當(dāng)前報道的最高水平，具有極強(qiáng)的國際競爭力。產(chǎn) 品可用于油脂水解、轉(zhuǎn)酯，食品加工、烘焙，生物柴油制備，飼料添加 劑，再生紙脫墨等廣泛用途。建設(shè)其發(fā)酵生產(chǎn)線預(yù)計需要 800-1000 萬元，經(jīng)濟(jì)效益可觀。米根霉脂肪酶可用于油脂水解、轉(zhuǎn)酯，食品加工、烘焙，生物柴油

糖化酶是糖化工業(yè)的重要酶制劑，但生產(chǎn)上的主要問題是：酶活力低、沒有常溫條件下的酶產(chǎn)品（使得糖化工藝中需要消耗大量能源）。利用定向進(jìn)化技術(shù)獲取較低溫度下活力提高數(shù)倍~數(shù)十倍的新的酶分子、并確定新基因序列，轉(zhuǎn)化受體菌。 我們的技術(shù)優(yōu)勢：基因分離技術(shù)是我們的優(yōu)勢，已報道全長基因序列15條，在天津基金資助下最近已克隆了糖化酶基因。定向進(jìn)化是我們目前的主要研究方向之一，在留學(xué)回國科研啟動基金資助下對谷胱苷肽-S-轉(zhuǎn)移酶脫氯活性進(jìn)行提高，已有研究進(jìn)展。

全自動酶標(biāo)儀318C+廣泛用于各大高?？蒲袡C(jī)構(gòu)、技術(shù)質(zhì)量監(jiān)督局、動植物檢疫及食品飼料行業(yè)等，除開展血液學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤免疫學(xué)、傳染病免疫學(xué)、TORCH感染免疫學(xué)、基因檢驗項目外、還可以對食品安全三聚氰胺、黃曲霉素、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留等所有采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（Elisa）進(jìn)行項目檢驗，并且有相應(yīng)版本的軟件支持。   產(chǎn)品特點： 1、內(nèi)置嵌入式系統(tǒng)，無需外接電腦即可操作、存儲、打印; 2、測量模式：單波長檢測，雙波長檢測，兩點法，動力學(xué)法，酶抑制率，終點法、速率法。 3、*可選擇吸光度、Cut-Off定性計算、單點定標(biāo)、折線回歸、線性回歸、指數(shù)回歸、對數(shù)回歸、雙對數(shù)回歸、log-logit、冪回歸、四參數(shù)回歸、酶抑制率等計算方法；  4、在同一板上可進(jìn)行多至12個不同項目的測試，并可同一板檢測定性和定量項目。 5、*全面完善的質(zhì)控功能，包含westguard多規(guī)則質(zhì)控，即刻法質(zhì)控等多種質(zhì)控圖及質(zhì)控參數(shù)計算，具有質(zhì)控報警功能。   技術(shù)參數(shù)： 1、*波長范圍： 400-800nm 2、*濾光片配置：10個濾光片位置，標(biāo)配405nm、450nm、492nm、630nm,選配6定制波長 3、吸光度范圍：0.000―4.000A 4、*光通道數(shù)：8通道光路檢測，另設(shè)一個獨立參比通道（選配） 5、示值穩(wěn)定性：≤±0.002A或≤0.5%T/10min。 6、示值誤差（準(zhǔn)確性）：≤±0.005A或±0.2%T。 7、重復(fù)性：≤0.2%或≤0.2%T。 8、靈敏度：≥0.01（L/mg）。 9、通道差異：≤0.01A。 10、波長示值誤差：±1nm 11、半寬度：≤8nm 12、分辨率：0.001A（顯示），0.0001A（內(nèi)部計算） 13、*讀板速度：單波長≤3秒/96孔，雙波長≤6秒/96孔 14、振板功能：速度和時間可調(diào) 15、光源類型：進(jìn)口鹵鎢燈 16、板條類型：標(biāo)準(zhǔn)96孔或其他型酶標(biāo)板、條 17、適用孔型：平底、U型和V型 18、顯示方式：7寸彩色液晶顯示屏顯示 19、輸入方式：觸摸屏輸入，可選配鼠標(biāo)和鍵盤 20、打印：內(nèi)置熱敏打印機(jī)，可外接打印機(jī) 21、數(shù)據(jù)儲存：200,000個測試數(shù)據(jù)，500個以上測試項目（可擴(kuò)展） 22、接    口： USB(A)口、USB(B)口、串口、并口 23、使用環(huán)境：溫度5-40℃；濕度15%-80% 24、電源電壓：220V±10%，50/60Hz 25、體積：475mm×350mm×210mm（長×寬×高） 27、重量：11.5Kg

本項目針對上述問題，從分子、細(xì)胞和個體水平三個層面上研究人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)生物學(xué)行為及相關(guān)技術(shù)的臨床應(yīng)用，旨在提高兒童腫瘤療效。 1、主要科技內(nèi)容和技術(shù)特點： 1） 率先在國內(nèi)外建立RT-PCR和實時定量RT-PCR檢測hTERT法，該法簡便、快速、經(jīng)濟(jì)、安全，適用于臨床推廣應(yīng)用。該項技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于兒童惡性腫瘤診斷、監(jiān)測和指導(dǎo)個體化治療，提高了兒童腫瘤的診療水平。 2）首次在國內(nèi)外研究體內(nèi)造血干細(xì)胞hTERT的生物學(xué)行為，證明了hTERT與促紅細(xì)胞生成素的關(guān)系，并系統(tǒng)研究了惡性腫瘤細(xì)胞hTERT的生物學(xué)行為， 探討腫瘤細(xì)胞中Aurora A與hTERT及端粒酶表達(dá)的相關(guān)性，提出hTERT與細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)紊亂相互作用促進(jìn)腫瘤發(fā)生和發(fā)展的新觀點，為惡性腫瘤在分子水平上的監(jiān)測和以hTERT為靶點的生物工程治療提供了依據(jù)。 3） 在國內(nèi)外首次闡明端粒酶重建對成纖維細(xì)胞遷移能力和生物節(jié)律的調(diào)控，把端粒酶、hTERT生物學(xué)行為和生物節(jié)律與腫瘤擇時治療有機(jī)結(jié)合，為腫瘤治療提供了一條新路徑。實踐證明，在該理論指導(dǎo)下進(jìn)行化療，可明顯提高腫瘤化療效果，且毒副作用明顯減少。