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01.成果簡(jiǎn)介 地中海貧血癥，又稱(chēng)珠蛋白生成障礙性貧血癥，是一組遺傳性溶血性貧血疾病，由血紅蛋白中一種或一種以上珠蛋白鏈的缺失或不足導(dǎo)致。珠蛋白鏈包括：γ、δ、ε和β珠蛋白基因組成“β基因族”，ζ和α珠蛋白組成“α基因族”，相應(yīng)的，地中海貧血癥分為α型、β型、δβ型和δ型4種，其中以β地中海貧血癥和α地中海貧血癥較為常見(jiàn)。 地中海貧血癥的常規(guī)治療方法包括：一般性治療、紅細(xì)胞輸注、鐵螯合劑去鐵治療、脾切除、造血干細(xì)胞移植、基因活化治療等，其中，輸血治療和去鐵治療是目前最重要的兩種治療方法。然而，供體缺乏、排異反應(yīng)、藥物副反應(yīng)等因素影響了上述方法的應(yīng)用。 本項(xiàng)成果利用歸巢內(nèi)切酶I-SceI的特異性低毒性以及TALE的特異性DNA識(shí)別域，依據(jù)β地中海貧血癥的β-珠蛋白基因序列，首先改造I-SceI和TALE，使其分別可以特異性識(shí)別14bp和18bp的β珠蛋白DNA序列，然后使二者融合，從而構(gòu)建出可以識(shí)別β珠蛋白32bp DNA序列的融合型內(nèi)切酶TALE-I SceI，并利用β-地中海貧血疾病患者造血干細(xì)胞為模型，對(duì)其突變基因進(jìn)行修復(fù)，驗(yàn)證了本項(xiàng)成果的安全性和實(shí)用性。 圖1 融合型內(nèi)切酶TALE-I SceI02.應(yīng)用前景 經(jīng)過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，本項(xiàng)目成果構(gòu)建的嵌合核酸酶可以在體外β-地中海貧血疾病患者造血干細(xì)胞中發(fā)揮作用，有望在臨床中得到應(yīng)用。03.知識(shí)產(chǎn)權(quán) 本項(xiàng)成果已申請(qǐng)1項(xiàng)發(fā)明專(zhuān)利，并已授權(quán)。04.團(tuán)隊(duì)介紹 本項(xiàng)目負(fù)責(zé)人為研究員、博士生導(dǎo)師，擔(dān)任中國(guó)自然科學(xué)基金委重大項(xiàng)目顧問(wèn)及基金評(píng)委、中國(guó)科技部973項(xiàng)目顧問(wèn)及基金評(píng)委，曾在多個(gè)國(guó)際權(quán)威期刊上發(fā)表SCI論文20余篇。05.合作方式 投融資。06.聯(lián)系方式 郵箱：zhangxinrui@tsinghua.edu.cn

本發(fā)明公開(kāi)了一種固定化的洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶及其制備方法。所述固定化的洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶，包括碳納米管基質(zhì)和洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶，所述洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶通過(guò)親和吸附和/或共價(jià)結(jié)合的方式結(jié)合在碳納米管基質(zhì)的開(kāi)放端口、表面和內(nèi)壁。所述制備方法包括以下步驟：(1)硫酸超聲處理碳納米管；(2)制備碳納米管與洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶混合液；(3)將碳納米管與洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶混合液在 4℃至 60℃下，振蕩反應(yīng)，獲得所述固定化的洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶。本發(fā)明提供的固定化的洋蔥伯克霍爾德菌脂肪酶增

近日，藥學(xué)院鄒懿教授和張霄教授課題組合作，在國(guó)際知名期刊JACS在線發(fā)表了題為“DiarylEtherFormationbyaVersatileThioesteraseDomain”（DOI：10.1021/jacs.2c02813）的研究論文，揭示了二芳基醚藥物骨架的全新酶學(xué)合成途徑。

該成果涉及食品生物等高新技術(shù)領(lǐng)域，是一種具有抑制腐敗作用的低值魚(yú)蛋白深度酶解的方法。通過(guò)創(chuàng)造性地在低值魚(yú)酶解過(guò)程中不斷通入凈化空氣或氧氣，抑制和殺滅引致水解物腐敗變質(zhì)的厭氧菌；利用內(nèi)切蛋白酶與外切蛋白酶的協(xié)同作用，明顯提高了魚(yú)蛋白水解效率，可得水解度大于65%，氮回收率大于85%的低值魚(yú)蛋白深度酶解液，顯著降低了低值魚(yú)酶解成本。 該成果避免現(xiàn)有技術(shù)采用化學(xué)殺菌劑所導(dǎo)致的對(duì)蛋白酶活性的抑制、化學(xué)殺菌劑殘留的問(wèn)題，以及使用熱殺菌方法所導(dǎo)致的降低魚(yú)蛋白水解效率的問(wèn)題，解決了低值魚(yú)酶解過(guò)程易

目前臨床上抗哮喘用藥主要包括糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥物與β2受體激動(dòng)劑（例如鹽酸丙卡特羅（美普清）），但這兩類(lèi)藥物存在較大的副作用。糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥物可引起水、鹽、糖、蛋白質(zhì)及脂肪代謝紊亂；減弱機(jī)體抵抗力，阻礙組織修復(fù)，延緩組織愈合；抑制兒童生長(zhǎng)發(fā)育。β2受體激動(dòng)劑可引起心律失常、肌肉震顫、水鹽代謝紊亂。臨床急需療效確切、副作用小的新藥。 氣道高反應(yīng)性是指氣管、支氣管本身對(duì)各種刺激，包括特異性抗原刺激和非特異性刺激，如物理、化學(xué)刺激，呈現(xiàn)過(guò)度反應(yīng)，是支氣管哮喘病人區(qū)別于正常人的重要特征。CD38分子表達(dá)與分布在氣道平滑肌等。通過(guò)CD38分子的酶催化作用生成的環(huán)腺苷二磷酸核糖(cyclic adenosine diphosphate ribose, cADPR)來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+的釋放而調(diào)節(jié)細(xì)胞收縮。氣道平滑肌的收縮能力主要依靠于平滑肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度，CD38分子可以調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度進(jìn)而影響氣道平滑肌的收縮，在哮喘的發(fā)病機(jī)制中起到非常重要的作用。 本項(xiàng)目重點(diǎn)研究了兩種小分子CD38抑制劑，其中一種化合物即5-(3-苯基丙酰氨基)-N-(4-乙氧羰基苯基)-1H-3-吲哚甲酰胺治療能夠減輕臭氧攻擊所造成氣道與肺泡病理改變，炎癥反應(yīng)、氧化損傷及氣道高反應(yīng)，且無(wú)明顯血液毒性與全身性毒副作用。該化合物作為CD38酶抑制劑，可通過(guò)抑制Ca2+釋放舒張氣管平滑肌，對(duì)癥治療氣道高反應(yīng)性疾病；我們利用臭氧制作小鼠氣道高反應(yīng)模型，同時(shí)給予該化合物的乳化劑灌胃治療，發(fā)現(xiàn)經(jīng)該化合物治療的小鼠氣道阻力明顯降低、動(dòng)態(tài)肺順應(yīng)性明顯增加、肺病變程度減輕。

本發(fā)明涉及生物處理技術(shù)領(lǐng)域，具體公開(kāi)了一種細(xì)菌來(lái)源的漆酶及其在降解聚氨酯塑料中的應(yīng)用。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)來(lái)源于枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis 168)細(xì)菌漆酶，在大腸桿菌中表達(dá)后，通過(guò)水解PU中的酯鍵和氨基甲酸酯鍵，對(duì)兩種聚酯型聚氨酯底物均具有一定的降解能力。本發(fā)明為不僅豐富了PU塑料酶降解資源庫(kù)，并為塑料酶法回收技術(shù)奠定了研究基礎(chǔ)。

本項(xiàng)目從中國(guó)傳統(tǒng)白酒大曲中篩選獲得了適用于面包烘焙的華根霉（Rhizopus chinensisCCTCC M201021）脂肪酶，在此基礎(chǔ)上利用基因工程、蛋白質(zhì)工程等現(xiàn)代生物技術(shù)，改造得到具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的面包烘焙用脂肪酶催化劑，通過(guò)發(fā)酵調(diào)控技術(shù)，開(kāi)發(fā)生產(chǎn)廉價(jià)的新型脂肪酶制劑，緊跟市場(chǎng)需求，利用高效定向進(jìn)化技術(shù)進(jìn)一步提升改造酶的催化性能，并在技術(shù)上建立與之相應(yīng)的應(yīng)用技術(shù)路線，從而綜合提高我國(guó)食品領(lǐng)域的科技水平，對(duì)于我國(guó)經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展具有重大意義。 創(chuàng)新要點(diǎn) 獲得具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的面包烘焙用脂肪酶催化劑，建立了定向進(jìn)化文庫(kù)構(gòu)建新方法，顯著提高了酶的活性和熱穩(wěn)定性，開(kāi)發(fā)獲得的產(chǎn)品性能優(yōu)，成本低。

本土管理學(xué)的發(fā)展不僅需要理論創(chuàng)新,也需要研究方法的創(chuàng)新."鏡像組織研究法",擁有當(dāng)前管理學(xué)主流實(shí)證方法中所不具備的刻畫(huà)心理活動(dòng)等特點(diǎn),運(yùn)用這一研究方法存在著科學(xué)合理性和可行性.

本發(fā)明公開(kāi)了一種一步法完成梨微嫁接并生根的方法，其包括以下步驟：于增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)高度、粗度、生長(zhǎng)勢(shì)達(dá)到嫁接要求的梨組培苗，選擇高2厘米至3厘米、生長(zhǎng)健壯一致的組培苗，在無(wú)菌條件下，于頂部斜切去頭作為砧木；選擇與砧木生長(zhǎng)勢(shì)相近的組培苗作為接穗，于基部斜切留梢；將砧木頂部斜切面和接穗基部斜切面緊密靠在一起，用塑料套管固定嫁接部位形成嫁接苗，再將嫁接苗接種于培養(yǎng)基中，在25℃±2℃，每天光照十二小時(shí)，

DHA（Docosahexaenoic Acid，二十二碳六烯酸）是一種重要的長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸，屬ω-3系列，具有增強(qiáng)記憶，提高智力，降低血脂，調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)等功效。AA（Arachidonic acid，二十碳四烯酸/花生四烯酸）屬于ω-6系列長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸，在降血脂、抑制血小板聚集、抗炎癥、抗癌、抗脂質(zhì)氧化、促進(jìn)腦組織發(fā)育等方面具有獨(dú)特的生物活性。 全球范圍內(nèi)，微生物油脂的應(yīng)用已勢(shì)不可擋，聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織早在1995年推薦的膳食指南中明確規(guī)定，嬰兒配方奶粉中必須含有DHA，富含DHA和AA的微生物油脂已在美國(guó)、日本、英國(guó)、法國(guó)、新西蘭、澳大利亞、瑞士、荷蘭等國(guó)上市。我國(guó)衛(wèi)生部在2003年食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)增補(bǔ)品種中首次將二十二碳六烯酸單細(xì)胞油（DHASCO）作為營(yíng)養(yǎng)素強(qiáng)化劑添加到嬰幼兒食品中。國(guó)內(nèi)每年DHA/AA嬰幼兒奶粉消耗量約為73萬(wàn)噸,其中每100 g奶粉中約含有50 mg DHA和80 mg AA，因此，國(guó)內(nèi)每年需求DHA約為912.5噸，AA約為1460噸。可見(jiàn)DHA/AA在國(guó)內(nèi)具有巨大的市場(chǎng)潛力。