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其他成果/n一種酶法制備有機(jī)菜籽多肽的方法，包括：菜籽蛋白的制備；將菜籽蛋白與蒸餾水按一定料液比混勻，并進(jìn)行超聲輔助濕熱處理，得到濕熱菜籽蛋白漿液；向濕熱菜籽蛋白漿液中加入三聚磷酸鈉進(jìn)行超聲輔助磷酸化處理，得到磷酸化菜籽蛋白漿液；調(diào)節(jié)磷酸化菜籽蛋白漿液的pH和溫度，并加入堿性蛋白酶進(jìn)行超聲輔助酶解，得到一次酶解液；調(diào)節(jié)一次酶解液的pH和溫度，并加入復(fù)合風(fēng)味蛋白酶進(jìn)行超聲輔助酶解，得到二次酶解液；對(duì)二次酶解液進(jìn)行微波滅酶處理，得到滅酶酶解液，將滅酶酶解液離心得到菜籽多肽清液，再進(jìn)行冷凍干燥處理，即得成品的有機(jī)菜籽多肽。該酶法制備有機(jī)菜籽多肽的方法，工藝安全、制備便捷。

該技術(shù)是利用鵝源草酸青霉果膠酶生產(chǎn)磁性固定化鵝源草酸青霉果膠酶， 技術(shù)適用于食品、醫(yī)藥、畜禽飼料生產(chǎn)企業(yè)。 技術(shù)利用混合共沉淀法制備果膠酶納米級(jí)磁性高分子微球載體，利用超聲 波技術(shù)彌補(bǔ)共沉淀法中粒徑不均勻的不足，有效控制粒徑的大小，提高了微粒青島農(nóng)業(yè)大學(xué)科技成果介紹 2017 －42－ 作為載體的靶向性；采用真空冷凍干燥技術(shù)處理固定化鵝源草酸青霉果膠酶， 減少了采用鼓風(fēng)加熱干燥常規(guī)法造成載體中羥基、羧基官能團(tuán)的活性損失，使 制備的載體中有效官能團(tuán)回收率更高。另外，以磁性 Fe3O4 為磁核，殼聚糖-阿 拉伯膠為磁殼制備磁性雙酶(果膠酶+纖維素酶)復(fù)合微球，使磁性雙載體雙酶固 定化產(chǎn)品的連續(xù)重復(fù)利用效果更好，具有良好的熱穩(wěn)定性。研發(fā)的磁性高分子 微球粒徑為 10～80.45nm，具有良好的磁響應(yīng)性，能夠?qū)崿F(xiàn)均勻酶解、重復(fù)利用。

化學(xué)學(xué)院歐陽(yáng)鋼鋒教授團(tuán)隊(duì)揭示封裝模式是如何影響酶@MOFs的生物功能，并提供一種新的策略可制備具有高生物活性的酶@MOFs材料。研究人員以6種工業(yè)用途廣泛的酶為模型（括葡萄糖氧化酶(GOx)、細(xì)胞色素C (Cyt C)、辣根過(guò)氧化物酶(HRP)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、尿酸氧化酶(UOx)和乙醇脫氫酶(ADH)），研究了它們?cè)环庋b于ZIF-8空腔后的活性轉(zhuǎn)化。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)部分酶可保持較高的生物活性，但另一部分酶活性則嚴(yán)重下降甚至完全失活。接著，研究人員通用過(guò)系統(tǒng)的表征手段發(fā)現(xiàn)酶的活性轉(zhuǎn)化與其封裝模式密切相關(guān)：1）在基于酶誘導(dǎo)ZIF-8成核驅(qū)動(dòng)的快速封裝模式中，得到的酶@ZIF-8保持較高的生物活性；2）在ZIF-8自然成核的共沉淀緩慢封裝模式中（此過(guò)程中酶不參與ZIF-8成核），由于過(guò)量配體（2-甲基咪唑）的去折疊效應(yīng)和競(jìng)爭(zhēng)配位，得到的酶@ZIF-8趨向于失活（圖1A）。有趣的是，這兩種封裝模式與酶的表面電荷性質(zhì)有關(guān)。研究人員通過(guò)酶表面氨基酸殘基的化學(xué)修飾調(diào)節(jié)酶的表面電荷，可實(shí)現(xiàn)酶@ZIF-8封裝方式的有效調(diào)控，進(jìn)而改善酶@MOFs的生物活性。接著，研究人員探討了改善后的酶@MOFs（Cyt C-A@ZIF-8和HRP-A@ZIF-8）在生物傳感領(lǐng)域的應(yīng)用。我們首先可以利用Cyt C-A@ZIF-8和HRP-A@ZIF-8對(duì)H2O2進(jìn)行可視化傳感。谷胱甘肽(GSH)是一種生物硫醇，與糖尿病、肝病、白內(nèi)障、阿爾茨海默病和帕金森病等多種病癥相關(guān)。H2O2可氧化GSH進(jìn)而影響酶@MOFs的H2O2傳感性能(圖1B)。鑒于這一原理，我們建立了一種GSH的可視化酶@MOFs傳感平臺(tái)，并具有較高的檢測(cè)靈敏度和較寬的線性范圍（圖1C）。與單酶催化相比，多酶催化級(jí)聯(lián)反應(yīng)是生物體內(nèi)一類重要的化學(xué)轉(zhuǎn)化過(guò)程，在生物信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和代謝途徑中起著關(guān)鍵作用。研究人員將多種酶（GOx和HRP）共封裝于MOFs（簡(jiǎn)稱ECMN，圖1D），模擬細(xì)胞內(nèi)級(jí)聯(lián)催化過(guò)程；同時(shí)，可以通過(guò)調(diào)控酶的封裝模式，提高ECMN的級(jí)聯(lián)催化性能（圖1E），并實(shí)現(xiàn)葡萄糖的高靈敏、可視化檢測(cè)? 此外，研究團(tuán)隊(duì)從封裝策略及應(yīng)用兩方面總結(jié)了酶@MOFs的最新研究進(jìn)展：重點(diǎn)介紹了MOFs孔徑結(jié)構(gòu)和酶生物界面與金屬離子的相互作用對(duì)酶封裝效率的影響及影響酶活性轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵因素；并展示了酶@MOFs在生物傳感、催化和納米催化治療等領(lǐng)域的前沿應(yīng)用。

(S)-丁呋洛爾化學(xué)名為(S)-1-(7-乙基苯并呋喃-2-基)-2-叔丁基氨基-1-乙醇，被廣泛用作研究細(xì)胞色素P450(CYP)酶的底物，對(duì)β-腎上腺素受體具有無(wú)選擇性阻滯作用，可用于治療輕、中度高血壓。以往制備光學(xué)純的(S)-丁呋洛爾的方法主要是酯化拆分和化學(xué)催化不對(duì)稱氫化還原，這兩種方法均存在原料利用率低或成本昂貴等問(wèn)題。本技術(shù)利用(R)-醇腈酶((R)-Oxynitrilase)作為一種生物催化劑具有的高效手性轉(zhuǎn)化能力，通過(guò)催化不對(duì)稱氰化反應(yīng)獲得制備(S)-丁呋洛爾的關(guān)鍵手性中間體，開(kāi)發(fā)出一條新的(S)-丁呋洛爾合成路線。

超氧化物歧化酶(SOD)是一種源于生命體的活性物質(zhì)，能消除生物體在新 陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的超氧陰離子自由基。慢性炎癥的主要產(chǎn)物之一是超氧陰離 子自由基，因此目前慢性咽炎還沒(méi)有有效的治療藥物或功能產(chǎn)品。本項(xiàng)目是基 于 SOD 的作用機(jī)制和慢性咽炎的發(fā)生機(jī)制，研制含 SOD 的含片，以達(dá)到清咽 和根治慢性咽炎的目的；咽炎的發(fā)病率高，藥物需求量大，經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效 益好。本項(xiàng)目已完成 SOD 的制備、抗炎活性與作用、配方篩選研究，初步的志 愿者試驗(yàn)含服試驗(yàn)可達(dá)到治愈慢性咽炎的效果。

研發(fā)階段/n本發(fā)明涉及一種制備甲殼素脫乙酰酶的方法，該方法用短柄梨孢帚霉（Scopulariopsisbrevicaulis）作甲殼素脫乙酰酶產(chǎn)生菌，經(jīng)活化后將其接入到含有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵容器中，使其在pH值為6.5-7.0之間，溫度在27-29oC、轉(zhuǎn)速200-240rpm的搖床上發(fā)酵90-100小時(shí)，發(fā)酵液經(jīng)分離、鹽析、純化得甲殼素脫乙酰酶產(chǎn)品。利用本發(fā)明的方法制備的甲殼素脫乙酰酶每ml發(fā)酵液的活力單位最高可達(dá)36U。

可以量產(chǎn)/n針對(duì)當(dāng)前工業(yè)發(fā)展對(duì)脂肪酶的大量需求與脂肪酶實(shí)際表達(dá)水平較低 的技術(shù)瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達(dá)技術(shù)關(guān)鍵，建立了真菌脂肪酶高 效表達(dá)技術(shù)平臺(tái)，構(gòu)建的疏棉狀嗜熱絲孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)基因工程菌 10L 發(fā)酵，酶活力可達(dá) 64,000 U/ml 以上，達(dá)到世界報(bào)道的最高水平。產(chǎn)品可用于生物能源，制革，油脂水 解、轉(zhuǎn)酯、酯化，再生紙脫墨等廣泛用途。建設(shè)其發(fā)酵生產(chǎn)線預(yù)計(jì)需要 800-1000 萬(wàn)元，經(jīng)濟(jì)效益可觀。針對(duì)當(dāng)前工業(yè)發(fā)展對(duì)脂肪酶

本發(fā)明提供的一種使植鞣革柔軟的酶處理方法是在轉(zhuǎn)鼓中，先將植鞣革浸泡于自身重量100～300％的酸溶液中，于30～60℃下轉(zhuǎn)動(dòng)酸化處理至少10min，并使體系的pH穩(wěn)定在3～4.5內(nèi)，然后在植鞣革的酸化液中以植鞣革重量計(jì)加入10～200u/g的酶制劑軟化處理至少0.5h，并控制酶處理廢液中羥脯氨酸含量不高于20mg/L，軟化完畢進(jìn)行水洗，水洗后按輕革加工的常規(guī)工藝進(jìn)行后續(xù)處理。本發(fā)明由于在酶處理前對(duì)植鞣革進(jìn)行了酸化處理，因而使后續(xù)加入的酶制劑的活力得以保持，使處理后的植鞣革的柔軟性和粒面平細(xì)性得到明顯提高，同時(shí)避免了過(guò)度處理而可能發(fā)生破壞植鞣革的現(xiàn)象，達(dá)到了將其用作鞋面革、服裝革、沙發(fā)革等輕革材料的要求。該方法操作簡(jiǎn)便，易于推廣。

技術(shù)原理 ：顆粒高溫植酸酶制劑是一種新型的飼料添加劑 ,具有催化植酸 及植酸鹽水解成肌醇或磷酸鹽，提高飼料中有機(jī)磷的利用率，減少環(huán)境的磷 污染和解除植酸的抗?fàn)I養(yǎng)作用等功能，是一種高效環(huán)保型生物飼料添加劑。 技術(shù)原理主要通過(guò)強(qiáng)化酶和載體的多點(diǎn)結(jié)合， 使酶蛋白的構(gòu)象更加穩(wěn)定 .應(yīng)用 天然的多羥基化合物顆?；牧线€原末端含有許多的游離羥基， 結(jié)合酶蛋白 分子側(cè)鏈氨基酸殘基中的自由氨基提高酶結(jié)構(gòu)的剛性和熱穩(wěn)定性

篩 選 得 到 一 株 具 有 良 好 過(guò) 氧 化 氫 酶 生 產(chǎn) 性 能 的 菌 株 嗜 熱 子 囊 菌 Thermoascus aurantiacus WSH03-01,經(jīng)優(yōu)化搖瓶發(fā)酵產(chǎn)酶水平達(dá)到優(yōu)化前的 10 倍。確定了添加乙醇優(yōu)化過(guò)氧化氫酶的發(fā)酵工藝并放大。最終在 1500L 罐中發(fā)酵120 小時(shí)，產(chǎn)酶達(dá)到 3650U/mL。T. aurantiacus WSH03-01 所產(chǎn)過(guò)氧化氫酶的熱穩(wěn)定性較好。最適在工業(yè)化應(yīng)用試驗(yàn)中，利用過(guò)氧化氫酶處理漂白棉織物后的殘余過(guò)氧化氫，處理效果達(dá)到了傳統(tǒng)高溫大量漂洗的前處理水平，處理過(guò)程中節(jié)水近 1/2,節(jié)能 1/3，廢水排放量減少 50%左右，減輕了污水處理的負(fù)擔(dān)。在 1500L罐中發(fā)酵 120 小時(shí)，產(chǎn)酶達(dá)到 3650U/mL。