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（一）蠟樣芽孢桿菌蠟樣芽孢桿菌NJYH63305是團隊自行篩選的有益芽孢桿菌，廣泛應用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、食品保健、飼料等領域。在農(nóng)業(yè)領域，是一種集抑菌、殺蟲、促生于一體的環(huán)境友好型高效生防制劑，對茶輪斑病菌、黃瓜枯萎病菌、立枯絲核菌、煙草赤星病菌、茶云紋葉枯病菌、小麥全蝕病菌、小麥紋枯病、尖鐮孢菌、鐮刀菌、終極腐霉菌等植物病害及小菜蛾具有較強抑制作用。在醫(yī)藥領域，可調節(jié)人體腸道微生態(tài)平衡，適于治療急慢性痢疾、腸炎、腹瀉、嬰幼兒腹瀉引起的腸功能紊亂等；在食品保健領域，可作為食品添加劑，長期服用能促進營養(yǎng)物質的消化吸收，減少腸道疾病的發(fā)生，提高免疫能力、增強抗病能力。 1、蠟樣芽孢桿菌國內外研究進展目前，國內外蠟狀芽孢桿菌研究大多處于實驗室內研究階段，其商品化并應用于農(nóng)業(yè)防治的實例較少。國內市場上蠟樣芽孢桿菌農(nóng)用制劑大部分為復配試劑，同時其大規(guī)模培養(yǎng)過程中也存在不少問題，如發(fā)酵放大過程信息采集困難、制劑有效期不長、產(chǎn)品貨架期短等，這些問題的深入研究對解決蠟樣芽孢桿菌高密度培養(yǎng)瓶頸、降低蠟樣芽孢桿菌生產(chǎn)成本、促進細胞大規(guī)模培養(yǎng)領域重大突破具有重要意義。2、本課題組技術優(yōu)勢（1）團隊以項目為紐帶，建立了蠟樣芽孢桿菌在線監(jiān)控的高密度培養(yǎng)與多階段發(fā)酵集成技術，在1000L發(fā)酵罐上蠟樣芽孢桿菌活菌數(shù)高達800億個/g, 比初始培養(yǎng)提高了230%，達國際領先水平；（2）篩選的芽孢保護劑，可提高蠟樣芽孢桿菌活性，延長半衰期40％以上；（3）協(xié)同江蘇省農(nóng)科院及南京農(nóng)業(yè)技術推廣站進行綠色防控技術推廣，于江蘇浦口林大蔬菜基地、江寧區(qū)湖熟街道設施蔬菜基地、溧水傅家邊茶廠等地建立2800畝示范區(qū)，重點試驗核心區(qū)460畝。推廣示范區(qū)內，蠟樣芽孢桿菌對水稻紋枯病、灰霉病、晚疫病等真菌病害抑制率達51.8％～85.9％，與蘇云金芽孢桿菌（Bt）進行增效試驗，小菜蛾殺滅率提高29%，降低化學農(nóng)藥使用量50％以上，農(nóng)藥殘留量低于國家無公害農(nóng)產(chǎn)品標準；（4）目前已在國內外重要期刊發(fā)表學術論文10余篇，出版專著《高效有益微生態(tài)制劑開發(fā)與利用——蠟樣芽孢桿菌》，申請國家發(fā)明專利4項，授權3項，其中3項（ZL200910028025.1、ZL201010579133.0、ZL200910028320.7）在南京新百藥業(yè)有限公司成功實現(xiàn)轉化。（二）凝結芽孢桿菌團隊自行篩選獲得一株益生凝結芽胞桿菌NJYHHWG 877005，除具有和乳酸菌及雙歧桿菌同樣的保健功效外，還具有耐酸、耐熱、耐鹽、容易培養(yǎng)和保存的特點。凝結芽孢桿菌為兼性厭氧菌，進入腸道后會消耗游離氧，有利于厭氧微生物乳酸菌和雙歧桿菌的生長，多用于調節(jié)腸道內微生態(tài)菌群平衡，團隊自主知識產(chǎn)權的凝結芽胞桿菌NJYHHWG 877005對甜瓜枯萎病菌、番茄早疫病菌、西瓜炭疽病菌等有很強的防治效果，可進行新型高效生物農(nóng)藥的開發(fā)。

本發(fā)明涉及一株解淀粉芽孢桿菌Bacillus?amyloliquefaciensHMQAU140045，2015年12月1日保藏于中國科學院微生物所內中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏編號：CGMCC?No.11768。本發(fā)明為藍莓毛色二胞枝枯病提供了一個高效的微生物，開辟了一個新的途徑；本發(fā)明解淀粉芽孢桿菌菌株HMQAU140045對藍莓毛

凝結芽孢桿菌是一種可以產(chǎn)乳酸的芽孢桿菌，具備乳酸菌的腸道調理功能，又具有芽孢桿菌的抗逆性。用于畜禽養(yǎng)殖，能達到保健康、促增重、降糧耗的作用。凝結芽孢桿菌已列入農(nóng)業(yè)微生物飼料添加劑目錄。 項目自主篩選得到一株性能優(yōu)良的凝結芽孢桿菌；采用液體發(fā)酵工程，200產(chǎn)品性能穩(wěn)定，不含雜菌；通過工藝優(yōu)化，實現(xiàn)了高效制備。已完成了 30 噸發(fā)酵罐級別的試制，發(fā)酵液菌體濃度最高為 200cfu/mL，通過精制形成 100--10000 億 cfu/g 規(guī)格的菌粉產(chǎn)品。

本發(fā)明公開了一種殺鞘翅目害蟲的蘇云金芽孢桿菌工程菌及制備方法和應用，CCTCC M2013259。其步驟:A、從殺鞘翅目害蟲的Bt菌株YC-03中克隆殺蟲晶體蛋白基因cry3Aa8，將該基因插入解離載體pHT304/res中，獲得重組質粒pHT3Aa8/res，將pHT3Aa8/res的DNA電轉Bt無晶體突變株BMB171，篩選獲得轉化子，將輔助質粒pBMB1200轉入轉化子中，挑取在Amp/Erm平板上不生長在LB平板上生長的陽性轉化子，在LB液體培養(yǎng)基中傳代，挑取在LB平板上生長在四環(huán)素平板上不生長的單菌落；B、以柳藍葉甲和猿葉蟲幼蟲為試蟲，進行毒力生測，比較毒力致死中量LC50，篩選到高毒力工程菌菌株Ace-38。方法易行，操作簡便，對鞘翅目的柳蘭葉甲、馬鈴薯甲蟲、蔬菜猿葉蟲、黃守瓜等多種害蟲具有高效毒殺作用，該菌發(fā)酵性能優(yōu)良，具有開發(fā)、應用前景。

該成果是從土壤中分離出的一株對消除人、畜禽排泄物產(chǎn)生的惡臭氣體具有獨特作用的菌株。該菌種添加劑加于飼料中不僅具有其他飼用芽孢桿菌的功用和安全性好、穩(wěn)定性好的特性，而且對減少動物排泄物惡臭作用顯著。 適量添加巨大芽孢桿菌添加劑有效降低了蛋雞排泄物中的脲酶、尿酸酶活性，減少了氨氮、尿酸、總氮及總硫的濃度，進而減少了氨氣和硫化氫氣體的釋放量，改善畜舍環(huán)境，促進蛋雞對營養(yǎng)物質的利用率；可以減少生長肥育豬糞氨氣的釋放量。

產(chǎn)品詳細介紹

胞內寄生性單增李斯特菌和綿羊李斯特菌能在吞噬細胞等抗原遞呈細胞內繁殖，引發(fā)高水平的抗原遞呈作用，分別通過MHCⅠ和Ⅱ類途徑引起宿主抗原特異性的CD8+和CD4+ T細胞免疫反應，建立長期有效的免疫保護記憶，因此可作為一種通用的疫苗載體。本項目以上述兩種李斯特菌為活菌載體搭建新型疫苗構建通用平臺，該平臺具有以下優(yōu)勢：生物安全——敲除了菌株致病基因，降低了毒性；外源蛋白表達穩(wěn)定——外源抗原基因整合至細菌基因組，永遠不會丟失；外源抗原具有分泌性——抗原基因融合有分泌信號肽，使蛋白能分泌到胞外，更有利于免疫刺激；對環(huán)境、公共健康安全——重組疫苗菌株不攜帶耐藥基因，不會給環(huán)境和公共健康帶來危害。本平臺技術目前已獲得授權專利，成果屬于國際先進水平，已在結核疫苗及豬繁殖與呼吸綜合癥病毒疫苗的研制上應用。該平臺還可應用于腫瘤治療性疫苗及其他預防病毒和慢性細菌感染的疫苗的研發(fā)，是一種通用的疫苗構建平臺。

本發(fā)明公開了一種蠟樣芽孢桿菌、其篩選方法、制劑及應用。所述蠟樣芽孢桿菌，具有高效土霉素降解能力，按照如下方法篩選：(1)取受土霉素污染的豬糞菌懸液，在含有 400μg/ml 至 500μg/ml 的放線菌酮的培養(yǎng)基中培養(yǎng)出細菌單菌落；(2)不斷提高培養(yǎng)基中土霉素的濃度，保留能適應的細菌單菌落；(3)將上述細菌單菌落，加入無機鹽培養(yǎng)基培養(yǎng)，不斷提高土霉素濃度，保藏土霉素降解率不低于 50％且 OD600 不低于 0.2 的細菌。所述制劑包括質量比例為 1：4 至 1：5的所述芽孢桿菌干粉和有機基質。所