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以經(jīng)典的LDE分子4-羥基壬烯醛（HNE）為模型，結(jié)合還原性二甲基化標(biāo)記技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)外源的羰基化修飾蛋白和位點(diǎn)進(jìn)行了直接的大規(guī)模捕獲和鑒定 (Redox Biol 2017,12, 712-718)。然而鑒定病理?xiàng)l件下內(nèi)源性羰基化的修飾蛋白及位點(diǎn)仍是該領(lǐng)域的重大挑戰(zhàn)。為了解決這一難題，王初課題組首次將廣泛應(yīng)用于oxime ligation中的催化劑苯胺結(jié)構(gòu)引入到活性分子探針中，首先以HNE為模型分子，建立和優(yōu)化了蛋白羰基化修飾的定量化學(xué)蛋白質(zhì)組方法，實(shí)現(xiàn)了對(duì)上千個(gè)羰基化修飾位點(diǎn)的修飾活性的定量分析。

已有樣品/n本發(fā)明涉及蛋白-蛋白及RNA-蛋白質(zhì)相互作用成像領(lǐng)域，基于激發(fā)波長(zhǎng)在600nm以上的紅色熒光蛋白mNeptune熒光片段互補(bǔ)技術(shù)，建立了位于活體成像“光學(xué)窗口”的雙分子和三分子熒光互補(bǔ)系統(tǒng)。其中雙分子熒光互補(bǔ)系統(tǒng)可以用于活細(xì)胞及活體內(nèi)蛋白-蛋白相互作用成像，三分子熒光互補(bǔ)系統(tǒng)可以用于活細(xì)胞及活體內(nèi)RNA-蛋白質(zhì)之間的相互作用成像。該成果為首次建立活體內(nèi)RNA-蛋白質(zhì)相互作用熒光成像技術(shù)，該技術(shù)也將有助于開發(fā)活細(xì)胞及活體內(nèi)藥物評(píng)價(jià)體系和藥物篩選平臺(tái)。

以主要的植物源性蛋白飼料原料為研究對(duì)象，針對(duì)原料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值特性，系統(tǒng)建立抗?fàn)I養(yǎng)因子高效降解菌株的篩選方法，借鑒現(xiàn)代發(fā)酵工程的優(yōu)化理論，建立有益代謝產(chǎn)物的檢測(cè)與控制和發(fā)酵參數(shù)相關(guān)的優(yōu)化研究方法，確立規(guī)模化生產(chǎn)工藝并進(jìn)行關(guān)鍵設(shè)備的選型，制造品質(zhì)穩(wěn)定可靠的發(fā)酵蛋白飼料，并建立相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)體系，為緩解我國(guó)蛋白飼料資源緊張?zhí)峁┈F(xiàn)實(shí)可行的方法，實(shí)現(xiàn)我國(guó)飼料及養(yǎng)殖工業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。 

其他成果/n一種復(fù)合物理場(chǎng)協(xié)同強(qiáng)化菜籽蛋白糖基化改性的方法，包括如下步驟：1)菜籽蛋白的制備；2)菜籽蛋白溶液的配制；3)蛋白質(zhì)?糖混合溶液的配制；4)微波?超聲波復(fù)合物理場(chǎng)協(xié)同處理；5)離心分離；6)透析與干燥。其中，步驟3)中，微波的功率為200～500W，超聲波的功率為100～300W，反應(yīng)體系的溫度為60～70℃，反應(yīng)時(shí)間為6～10min。本發(fā)明利用微波快速加熱效應(yīng)和超聲波的機(jī)械攪拌與加速擴(kuò)散作用，可避免反應(yīng)體系出現(xiàn)局部高溫現(xiàn)象，使糖基化反應(yīng)更為均勻；同時(shí)微波的電磁場(chǎng)與超聲波的空穴作用會(huì)在反應(yīng)體系中形成超臨界高溫與高壓的微環(huán)境及界面濃縮現(xiàn)象，從而避免傳統(tǒng)濕熱法下由于長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)高溫作用而產(chǎn)生褐變物質(zhì)，消除了色澤對(duì)產(chǎn)品的影響。

真菌疏水蛋白具有自我裝配成膜的性質(zhì)，因此 （1）疏水蛋白可作為蛋白和細(xì)胞固定化的媒介，可用于生物傳 感器和生物芯片，作為引發(fā)層，交聯(lián)上配體或形成融合蛋白，能使特 定分子固定化到特定表面。 （2）它能改變表面的屬性，保護(hù)表面。可用于提高醫(yī)學(xué)器官移 植物生物相容性和防止微生物細(xì)胞粘附；可應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)中燒傷、 創(chuàng)傷的創(chuàng)面保護(hù)，為臨床病人創(chuàng)面保護(hù)和恢復(fù)提供一種安全無(wú)毒、操 作簡(jiǎn)便、高效低耗的新手段。 （3）作為一種生物表面活性劑，疏水蛋白還可以用于促進(jìn)土壤 中的污染物的降解和應(yīng)用在石油泄漏后回收石油的過(guò)程中。 （4）疏水蛋白具有表面活性，可用于食品對(duì)抗相變能力并形成 穩(wěn)定泡沫，使其在密封食品生產(chǎn)上發(fā)揮重要作用； （5）也可用于日用化妝品生產(chǎn)中，因疏水蛋白可以作為洗潔產(chǎn) 品的成分，根據(jù)其疏水、親水兩相間的轉(zhuǎn)變，可通過(guò)自我裝配而將面 部的油脂等疏水的成分包裹起來(lái)，再用水清洗將其除去，也可以作為 保護(hù)秀發(fā)的天然膜，使發(fā)部維持清潔并保持一定水分；將它運(yùn)用到面 部的美容護(hù)理，由于它的特性，能使皮膚表面形成一層天然生物活性 保護(hù)膜，起到皮膚保濕、免受外界空氣中污濁物的侵害，從而達(dá)到護(hù)膚美容之功效。 （6）疏水蛋白直接包裹藥物以改變藥物溶解性并實(shí)現(xiàn)控、緩釋。 通過(guò)真菌疏水蛋白與難溶于水的藥物混合，可以達(dá)到良好的分散效果， 并延長(zhǎng)了兩種藥物的藥效持續(xù)時(shí)間。 （7）真菌疏水蛋白與其他的功能性蛋白或小肽組成融合蛋白， 同時(shí)發(fā)揮疏水蛋白的穩(wěn)定吸附材料表面的特性和功能性蛋白或小肽 的特異性功能，如在組織工程、抗炎抗菌材料等。 項(xiàng)目特色： 純天然生物制品，無(wú)毒害，無(wú)污染。耐酸堿，抗相變能力強(qiáng)。自 我裝配形成有活性的蛋白膜。具有良好的熱穩(wěn)定性和透氣不透水性。 由于它的特性，使得它具有：（1）自動(dòng)成膜，無(wú)需貼敷，使用便利； （2）透氣性優(yōu)良；(3)純天然無(wú)化學(xué)添加成分，瑞氏木霉已被證明是 安全的菌種；（4）組織相容性好，避免了嚴(yán)重的排異反應(yīng)；（5）耐高 溫（100 攝氏度仍保持活性），易于消毒；（6）穩(wěn)定不降解，便于產(chǎn)品 的長(zhǎng)期保存；（7）用表面活性劑就可以很容易地清洗（8）延展性好， 1 毫克的疏水蛋白在液面就可以展開 1 平方米的薄膜（9）透明，可直 接透過(guò)成膜觀察（10）性價(jià)比高。 市場(chǎng)應(yīng)用前景： 目前國(guó)際上尚未實(shí)現(xiàn)疏水蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)，其相關(guān)應(yīng)用產(chǎn)品的 開發(fā)更為滯后。我們?cè)谝褜?shí)現(xiàn)疏水蛋白中試研發(fā)的基礎(chǔ)上，擴(kuò)大發(fā)酵 規(guī)模，進(jìn)行后續(xù)產(chǎn)品的開發(fā)，我們的技術(shù)和工藝現(xiàn)居國(guó)際領(lǐng)先地位， 無(wú)疑會(huì)占有寶貴的先機(jī)。 疏水蛋白產(chǎn)品將作為新一代膜生物活性材料進(jìn)入市場(chǎng)，它的出現(xiàn) 將會(huì)革命性地取代現(xiàn)有化學(xué)產(chǎn)品，這無(wú)疑給人類的健康帶來(lái)了很大的 益處，消除人類在預(yù)防和治療疾病、食品加工、以及醫(yī)學(xué)檢測(cè)、食物保鮮方面為健康做出努力的同時(shí)給自身帶來(lái)的潛在危害，而且價(jià)格更 為低廉。因此，本項(xiàng)目大規(guī)模生產(chǎn)疏水蛋白及其應(yīng)用開發(fā)是有非常廣 闊的市場(chǎng)前景的，并且我們的技術(shù)在國(guó)際和國(guó)內(nèi)市場(chǎng)處于領(lǐng)先地位。 這些產(chǎn)品都將在國(guó)際市場(chǎng)上處于最優(yōu)競(jìng)爭(zhēng)狀態(tài)。

針對(duì)我國(guó)蛋白飼料和多糖產(chǎn)品的巨大市場(chǎng)空間，團(tuán)隊(duì)借助專有的合成生物學(xué)技術(shù)平臺(tái)自主研發(fā)了甲烷氣體高值化生物轉(zhuǎn)化技術(shù)，擁有我國(guó)行業(yè)內(nèi)首個(gè)專利授權(quán)。利用該技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)將頁(yè)巖氣、沼氣等甲烷氣體通過(guò)微生物高效轉(zhuǎn)化為細(xì)胞蛋白和多糖。 所產(chǎn)甲烷基細(xì)胞蛋白富含包括全部必需氨基酸的 18 種氨基酸，菌體粗蛋白含量大于 60%，其中 9 種必需氨基酸在總氨基酸中占比達(dá) 30%，其在總氨基酸含量、限制性氨基酸含量等參數(shù)水平上明顯優(yōu)于豆粕蛋白，并與魚粉蛋白相似。 所產(chǎn)多糖經(jīng)權(quán)威機(jī)構(gòu)鑒定，其結(jié)構(gòu)與保濕霜類護(hù)膚品添加劑海藻多糖結(jié)構(gòu)相似度達(dá)97%，具有保濕、修復(fù)等功能，目前主要應(yīng)用于醫(yī)美產(chǎn)品添加劑與化妝品添加劑。 本項(xiàng)目具有生產(chǎn)成本低、制備工藝簡(jiǎn)潔高效和制備過(guò)程環(huán)保無(wú)污染的優(yōu)勢(shì)。通過(guò)前期建立甲烷生物制造的全鏈條研發(fā)平臺(tái)，該技術(shù)已完成從實(shí)驗(yàn)室向產(chǎn)業(yè)化的推進(jìn)。

本發(fā)明涉及一種系統(tǒng)糾正熱電偶熱慣性漂移的動(dòng)態(tài)測(cè)溫方法。 本發(fā)明采用數(shù)值計(jì)算的方式模擬和分析不同偶絲/結(jié)點(diǎn)直徑的熱電偶， 在火焰中的溫度響應(yīng)過(guò)程，篩選出熱慣性穩(wěn)定性最優(yōu)的偶絲-結(jié)點(diǎn)匹 配，按照這種匹配的要求定制熱電偶，從而達(dá)到糾正熱慣性漂移的目 的。在測(cè)量時(shí)，將熱電偶結(jié)點(diǎn)快速移入火焰內(nèi)指定的測(cè)點(diǎn)，利用數(shù)據(jù) 采集模塊和計(jì)算機(jī)記錄和分析熱電偶的溫度-時(shí)間數(shù)據(jù)，通過(guò)熱電偶溫 度-時(shí)間序列的二階差商特性，篩選出熱慣性穩(wěn)定的時(shí)間區(qū)間，然后在 該區(qū)間內(nèi)進(jìn)行一階系統(tǒng)響應(yīng)方程的數(shù)據(jù)處理，獲得熱慣性系數(shù)和火焰 溫度。該發(fā)明與傳統(tǒng)的熱電偶測(cè)溫相比具有更廣泛的適用性和更高的 準(zhǔn)確度。

圍繞蠶繭絲廢棄物的循環(huán)利用、蠶絲蛋白增值關(guān)鍵技術(shù)、蠶絲蛋白醫(yī)用功能化等重要科學(xué)問(wèn)題開展研究并取得了重要突破：1）闡明了蠶絲蛋白結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及其分子質(zhì)量調(diào)控關(guān)鍵要素，實(shí)現(xiàn)了不同分子質(zhì)量絲素蛋白和絲膠蛋白的規(guī)模化生產(chǎn)；2）解決了絲素蛋白生物材料表面活化與醫(yī)用功能化關(guān)鍵技術(shù)，研發(fā)了蠶絲11蛋白人工皮膚、多孔支架、骨組織修復(fù)材料；3）實(shí)現(xiàn)了蠶絲蛋白多元化利用，研發(fā)了蠶絲蛋白吸水保水材料、涂覆化纖新功能材料、護(hù)膚產(chǎn)品等。

本發(fā)明涉及一類新型重組融合蛋白，其基本結(jié)構(gòu)為{GLK}p-R-{GLK}q，其中R是有生物學(xué)功能的蛋白或多肽，GLK為重組明膠樣蛋白(gelatin-like protein，GLK)，具有(Gly-X-Y)n明膠結(jié)構(gòu)特征的蛋白序列。與未融合有GLK片段的原始蛋白/多肽相比較，這類重組明膠樣融合蛋白具有更高的親水性，在體內(nèi)具有更長(zhǎng)的半衰期。本發(fā)明也包括編碼該融合蛋白的核苷酸序列，含核苷酸序列的表達(dá)載體，轉(zhuǎn)化有該類載體的宿主細(xì)胞以及制備本發(fā)明所涉及的融合蛋白的方法。此外，還包含含有該類融合蛋白的藥用組合物以及用于治療、預(yù)防或緩解疾病的方法。