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本發明公開了一種斜生纖孔菌鯊烯合酶基因及其編碼的蛋白質與用途，本發明所提供的鯊烯合酶基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者添加、取代、插入或缺失一個或多個核苷酸的同源序列或其等位基因及其衍生的核苷酸序列。所示基因編碼的蛋白質具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列或者添加、取代、插入或缺失一個或多個氨基酸的同源序列。本發明提供的鯊烯合酶基因可以通過基因工程技術提高斜生纖孔菌中樺褐孔菌醇的含量，可用于利用轉基因技術來提高斜生纖孔菌中樺褐孔菌醇含量的研究和產業化中。而這些次生代謝產物在臨床上具有抗腫瘤、防治艾滋病等潛在的應用價值，對保護人民的健康生長有所幫助。因而本發明具有很大的應用前景。

本發明公開了一種蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑Pp-PI多肽，其具有SEQ ID NO：2所示的氨基酸序列。本發明還同時公開了編碼上述蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑Pp-PI多肽的基因，其具有SEQ ID NO：1中第126-290位的核苷酸序列；或者與SEQ IDNO：1中從核苷酸第126-290位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者其核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO：1中從核苷酸第126-290位的核苷酸序列雜交。上述蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑Pp-PI多肽能用于制備蝶蛹金小蜂毒液絲氨酸蛋白酶抑制劑，用于轉基因作物或改造植物共生菌。

蛋白酶體是細胞用來調控特定蛋白質的濃度和清除錯誤折疊蛋白質的主要機制，是細胞中最普遍的不可或缺的大型 蛋白復合機器之一，也是迄今為止發現的最大的蛋白降解機器。 蛋白酶體全酶是由蓋子 (Lid)和基座(Base)亞復 合體組成的調控顆粒RP(Regulatory Particle)所激活。基座亞復合體在組裝過程中最重要的一個步驟是異質六 聚AAA-ATPase環的組裝。這個過程至少需要被PAAF1, p28/gankyrin, p27/PSMD9和S5b這四種調控顆粒(RP)組 裝伴侶蛋白分子所引導。天然的自由態19S調控復合體的構象存在大量的亞穩定態，并表現出大幅度的局部構象漲 落，使冷凍電子顯微鏡技術成為解析其結構的唯一手段。利用 冷凍電鏡解析人源蛋白酶體全酶的基礎上（見PNAS 2016, 113: 12991-12996），利用他們自主開發的基于統計 流行算法的高性能計算軟件ROME（見PLoS ONE 2017, 12:e0182130）與優化的冷凍電鏡處理方法對p28-RP復合 體細微動態構象進行深度分類，共解析出了1個4.5-? p28綁定的調控顆粒（RP）非AAA的亞復合體，3個近7-? p28 綁定的完整RP結構，1個亞納米精度下的非p28綁定的完整RP結構以及7個亞納米精度下的由Rpn1-p28-AAA組成的p28 綁定RP的亞復合體的動態構象。觀察到自由態RP調控顆粒中p28-綁定的AAA環并沒有組成的閉 環孔狀通道，而是自發地在Rpt2-Rpt6和Rpt3-Rpt4界面上形成多個由“開”到“關”的拓撲變構。

二級肥膘經采用本技術加工，可全部轉化為豬油和膠原蛋白，其中豬油的得 率可高達 60%，膠原蛋白的得率可高達 20%。投資 800 萬元建設一套年處理 3000 噸二級肥膘的裝置，可年產豬油 1800 噸，膠原蛋白 600 噸，按豬油 16 元/kg，膠原蛋白 60 元/kg 計，年產值可達 6000 萬元以上，利潤在 1500 萬元以上。 

本發明提供了一種蛋白質?殼聚糖復凝聚食品微膠囊體系及其制備方法，本發明將蛋白質和海藻酸鈉或果膠混合溶解于pH5.0以上的水溶液，然后再與殼聚糖溶液混合，調節pH值，低速攪拌使蛋白質?殼聚糖–海藻酸鈉或蛋白質?殼聚糖?果膠之間發生復雜的復凝聚反應，離心收集復凝聚相后，加入Ca2+，使復凝聚體系中的?COO?與Ca2+發生交聯反應，從而提高蛋白質?殼聚糖復凝聚體系的穩定性。本發明只需要通過控制海藻酸鈉或果膠及Ca2+的添加量及交聯時間即可達到交聯的目的，不涉及有毒有害試劑，生產工藝簡單易行、安全高效，易于規模化生產，對于包埋各種功能性成分具有廣闊的市場前景。

研發階段/n本發明提供一種蛋白質分子印跡膜，能夠選擇性識別結合模板蛋白質分子，是以魔芋葡甘聚糖為主要基質，其制備方法是將魔芋葡甘聚糖充分溶脹后，加交聯劑或與其它高分子共混，中和后加入模板蛋白質分子，充分混合后流涎成膜，干燥脫水形成模板蛋白質的分子印跡，加洗脫液充分洗脫模板蛋白質分子后制成魔芋葡甘聚糖蛋白質分子印跡膜。本發明所得蛋白質分子印跡膜，可作為生物分離模擬親和膜應用于蛋白質分離純化，尤其是基因工程蛋白質產品的分離純化，生物傳感檢測中的敏感膜部件以模擬抗體識別相應抗原等。

本發明公開了一種基于反蛋白石結構水凝膠的心肌細胞檢測方法及其應用，包括以下步驟：1)制備生物相容性的反蛋白石結構水凝膠；2)基于反蛋白石結構水凝膠心肌細胞的培養；3)心肌細胞的檢測；4)數據的分析。本發明中的反蛋白石結構色水凝膠具備良好的生物相容性，細胞在其表面生長保持高活性和表型，反蛋白石結構水凝膠不僅為心肌細胞的生長提供載體，更重要的是為心肌細胞收縮力和跳動頻率的檢測提供穩定的光學傳感信號，該檢測方法不需要復雜的檢測系統，具備直觀性、高靈敏行、高效、不受外界條件影響的優勢；該方法可應用于心臟藥物

本發明公開了一種過氧化物氧化還原酶Prx?I重組蛋白在制備抵抗急性細菌性敗血癥藥物中的應用，所述的重組蛋白是在過氧化物氧化還原酶Prx?I氨基酸序列的N端或C端連接回輸肽蛋白構建而成；所述回輸肽的氨基酸序列為5’-AAVLLPVLLAAP-3’；本發明首次提供了過氧化物氧化還原酶Prx?I重組蛋白除了具有分解H2O2的經典生化功能外，還具有新的抵抗急性細菌敗血癥的免疫學功能；通過對該蛋白分子進行重組改造，顯著增強活性蛋白進入細胞的效率，通過提高利用效率而賦予其具有更高的生物學活性，從而降低生產成本，具有良好的應用前景。

【發 明 人】劉培；唐宗湘；段金廒；楊雁；劉睿；于金高 【摘要】 本發明公開了一種具有致癢作用的芋蛋白提取物，它的氨基酸序列為：Ser-Gln-Leu-Asn-Phe- Tyr-Gln-Gly-Lys-Gly-Gln-Gly-Asn-Phe-Leu-Val-Ala-Val-Asp。本發明通過采用超濾、離子交換層析、凝膠柱層析、超濾或透析除鹽等技術，制備得到純度高，具有很好致癢活性的芋蛋白提取物，該芋蛋白提取物可廣泛應用于致癢模型工具藥研究、生物檢測、疾病診斷和治療等方面，為芋資源的綜合高效利用提供基礎，具有重要的意義。

常規治療腫瘤的方式有手術切除、化學治療、放射治療及生物治療等，然而這幾種療法并非對所有腫瘤都適宜。手術治療在這些腫瘤中明顯受到限制。對大多數中晚期惡性腫瘤患者急待尋求新的有效的非手術治療手段。常規放射性治療由于輻射面積較大、放射性射線劑量大和貫穿人體，對人體的正常組織結構損傷很大。核素微球和核素粒子是代表腫瘤治療和介入放射治療領域的新一代的藥物。與常規外照射治療相比，目前核素微球和核素粒子治療惡性腫瘤是最先進也是最常用放射治療方法之一。 1)核素微球 近年來正在研究的核素微球包括釔-90玻璃(樹膠)微球、錸-188玻璃微球、磷-32玻璃微球和鈥-160玻璃微球。其中釔-90微球正被醫學界迅速接受并成為肝臟原發和繼發惡性腫瘤的重要治療手段。1999年該藥物已被美國和加拿大正式批準,成為該腫瘤的治療方式。碘-125粒子是一種核素粒子，它是在CT和超聲引導下植入，將發出低能量γ射線的碘125粒子直接植入腫瘤組織內，對腫瘤組織進行持續性的、最大程度的毀滅性殺傷。 2)核素粒子 碘-125粒子優勢明顯：內照射射線劑量小，作用時間更長，治療定位更準確，對腫瘤局部作用均勻，輻射半徑小，對周圍正常組織損傷極小，是一種非常好的局部治療措施。和化療配合，治療腫瘤的效果更加明顯。 該技術對腫瘤的局部治療可以達到或接近手術和其他毀損病灶療法的效果。對于某些經手術后，出現復發或者局部轉移的腫瘤，碘-125粒子植入具有明顯優勢。此外，如作為常規放射治療的補充和協同治療的手段，會取得更好的治療效果。 碘-125粒子植入并非只是治療腫瘤的輔助方式，而是治療腫瘤的主要手段，而且對某些腫瘤可以作為優先選擇的治療方法。 對于一些對常規放、化療不敏感的腫瘤，碘-125粒子植入是一項重要的治療措施。如前列腺癌，過去常用手術切除、放療和化療綜合治療，其效果并不理想。而直接植入碘125粒子抑制腫瘤生長，避免了手術，能達到與常規治療一樣或更好的效果，并且保留了它的生理功能。另外，對于不愿行根治性手術以及一些無法手術的子宮頸癌、鼻咽癌患者，碘-125粒子的效果也非常明顯。 此外，對于已發生轉移的腫瘤患者，選用碘-125粒子植入治療，可達到有效控制轉移灶生長、保持器官功能、減輕疼痛的目的；由于身體狀況、腫瘤位置等因素影響，無法用手術切除的腫瘤，也可選用植入碘-125粒子治療。 3）利卡汀 利卡汀為水針劑，主要成分是碘125標記的美昔單抗。依靠美昔單抗與肝癌細胞表面表達的CD147抗原結合，再由碘125發揮局部放療作用。該藥I、II、III期臨床試驗均在華西醫院完成。證實能夠延長肝癌患者生存率。 2、項目技術背景 由于多數用于治療的核素對人體的骨髓等多種組織具有嚴重的毒、副作用，目前世界上近距離放射治療均采用金屬或玻璃為載體以盡量減少釋放帶來的全身副作用。但金屬和玻璃等,具有體內難以降解、技術操作復雜、分布性差、價格昂貴等缺點。本研究將采用可降解的蛋白質明膠微球作為碘核素的載體。明膠是膠原蛋白部分水解的產物，具有生物相容性好、可以生物降解、可和多種核素和藥物穩定結合等優點。 碘131和碘-125是多年臨床治療惡性腫瘤的常用核素，其治療效果穩定。碘核素的最大優越性是毒副作用較輕，碘在體內主要被甲狀腺組織吸收，其他組織絕少停留。不同粒徑的碘-125蛋白核素微球通過血管介入和局部植入可在腫瘤局部進行近距離放射治療。例如：直徑50-70μm的微球經介入途徑給藥后主要停留在小動脈和腫瘤血管中。可用作放射栓塞劑和化療栓塞劑，治療血管豐富的實體腫瘤，如肝癌、腎癌、子宮腫瘤等；直徑10-20μm的微球可通過瘤體注射的方法較均勻地分布在腫瘤組織間。可以對各種實體瘤進行瘤體植入近距離放療和局部化療，可用于乳腺癌，甲狀腺癌,胰腺癌，胃腸實體瘤等。 項目組長曾于1990年作為副組長在國家自然科學基金的資助下完成結合碘131和化療藥物的明膠微球肝動脈注射治療晚期肝癌的基礎和臨床研究。此次研究將在以前的工作基礎上，結合國內外的最新發展趨勢，改進并研制新的核素蛋白質微球。該項目作為上述課題的延續，目的是繼續完善該藥品的臨床前研究，繼以實現產業化。