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【發(fā) 明 人】劉培；唐宗湘；段金廒；楊雁；劉睿；于金高 【摘要】 本發(fā)明公開了一種具有致癢作用的芋蛋白提取物，它的氨基酸序列為：Ser-Gln-Leu-Asn-Phe- Tyr-Gln-Gly-Lys-Gly-Gln-Gly-Asn-Phe-Leu-Val-Ala-Val-Asp。本發(fā)明通過采用超濾、離子交換層析、凝膠柱層析、超濾或透析除鹽等技術(shù)，制備得到純度高，具有很好致癢活性的芋蛋白提取物，該芋蛋白提取物可廣泛應(yīng)用于致癢模型工具藥研究、生物檢測、疾病診斷和治療等方面，為芋資源的綜合高效利用提供基礎(chǔ)，具有重要的意義。

常規(guī)治療腫瘤的方式有手術(shù)切除、化學(xué)治療、放射治療及生物治療等，然而這幾種療法并非對所有腫瘤都適宜。手術(shù)治療在這些腫瘤中明顯受到限制。對大多數(shù)中晚期惡性腫瘤患者急待尋求新的有效的非手術(shù)治療手段。常規(guī)放射性治療由于輻射面積較大、放射性射線劑量大和貫穿人體，對人體的正常組織結(jié)構(gòu)損傷很大。核素微球和核素粒子是代表腫瘤治療和介入放射治療領(lǐng)域的新一代的藥物。與常規(guī)外照射治療相比，目前核素微球和核素粒子治療惡性腫瘤是最先進也是最常用放射治療方法之一。 1)核素微球 近年來正在研究的核素微球包括釔-90玻璃(樹膠)微球、錸-188玻璃微球、磷-32玻璃微球和鈥-160玻璃微球。其中釔-90微球正被醫(yī)學(xué)界迅速接受并成為肝臟原發(fā)和繼發(fā)惡性腫瘤的重要治療手段。1999年該藥物已被美國和加拿大正式批準,成為該腫瘤的治療方式。碘-125粒子是一種核素粒子，它是在CT和超聲引導(dǎo)下植入，將發(fā)出低能量γ射線的碘125粒子直接植入腫瘤組織內(nèi)，對腫瘤組織進行持續(xù)性的、最大程度的毀滅性殺傷。 2)核素粒子 碘-125粒子優(yōu)勢明顯：內(nèi)照射射線劑量小，作用時間更長，治療定位更準確，對腫瘤局部作用均勻，輻射半徑小，對周圍正常組織損傷極小，是一種非常好的局部治療措施。和化療配合，治療腫瘤的效果更加明顯。 該技術(shù)對腫瘤的局部治療可以達到或接近手術(shù)和其他毀損病灶療法的效果。對于某些經(jīng)手術(shù)后，出現(xiàn)復(fù)發(fā)或者局部轉(zhuǎn)移的腫瘤，碘-125粒子植入具有明顯優(yōu)勢。此外，如作為常規(guī)放射治療的補充和協(xié)同治療的手段，會取得更好的治療效果。 碘-125粒子植入并非只是治療腫瘤的輔助方式，而是治療腫瘤的主要手段，而且對某些腫瘤可以作為優(yōu)先選擇的治療方法。 對于一些對常規(guī)放、化療不敏感的腫瘤，碘-125粒子植入是一項重要的治療措施。如前列腺癌，過去常用手術(shù)切除、放療和化療綜合治療，其效果并不理想。而直接植入碘125粒子抑制腫瘤生長，避免了手術(shù)，能達到與常規(guī)治療一樣或更好的效果，并且保留了它的生理功能。另外，對于不愿行根治性手術(shù)以及一些無法手術(shù)的子宮頸癌、鼻咽癌患者，碘-125粒子的效果也非常明顯。 此外，對于已發(fā)生轉(zhuǎn)移的腫瘤患者，選用碘-125粒子植入治療，可達到有效控制轉(zhuǎn)移灶生長、保持器官功能、減輕疼痛的目的；由于身體狀況、腫瘤位置等因素影響，無法用手術(shù)切除的腫瘤，也可選用植入碘-125粒子治療。 3）利卡汀 利卡汀為水針劑，主要成分是碘125標記的美昔單抗。依靠美昔單抗與肝癌細胞表面表達的CD147抗原結(jié)合，再由碘125發(fā)揮局部放療作用。該藥I、II、III期臨床試驗均在華西醫(yī)院完成。證實能夠延長肝癌患者生存率。 2、項目技術(shù)背景 由于多數(shù)用于治療的核素對人體的骨髓等多種組織具有嚴重的毒、副作用，目前世界上近距離放射治療均采用金屬或玻璃為載體以盡量減少釋放帶來的全身副作用。但金屬和玻璃等,具有體內(nèi)難以降解、技術(shù)操作復(fù)雜、分布性差、價格昂貴等缺點。本研究將采用可降解的蛋白質(zhì)明膠微球作為碘核素的載體。明膠是膠原蛋白部分水解的產(chǎn)物，具有生物相容性好、可以生物降解、可和多種核素和藥物穩(wěn)定結(jié)合等優(yōu)點。 碘131和碘-125是多年臨床治療惡性腫瘤的常用核素，其治療效果穩(wěn)定。碘核素的最大優(yōu)越性是毒副作用較輕，碘在體內(nèi)主要被甲狀腺組織吸收，其他組織絕少停留。不同粒徑的碘-125蛋白核素微球通過血管介入和局部植入可在腫瘤局部進行近距離放射治療。例如：直徑50-70μm的微球經(jīng)介入途徑給藥后主要停留在小動脈和腫瘤血管中。可用作放射栓塞劑和化療栓塞劑，治療血管豐富的實體腫瘤，如肝癌、腎癌、子宮腫瘤等；直徑10-20μm的微球可通過瘤體注射的方法較均勻地分布在腫瘤組織間。可以對各種實體瘤進行瘤體植入近距離放療和局部化療，可用于乳腺癌，甲狀腺癌,胰腺癌，胃腸實體瘤等。 項目組長曾于1990年作為副組長在國家自然科學(xué)基金的資助下完成結(jié)合碘131和化療藥物的明膠微球肝動脈注射治療晚期肝癌的基礎(chǔ)和臨床研究。此次研究將在以前的工作基礎(chǔ)上，結(jié)合國內(nèi)外的最新發(fā)展趨勢，改進并研制新的核素蛋白質(zhì)微球。該項目作為上述課題的延續(xù)，目的是繼續(xù)完善該藥品的臨床前研究，繼以實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。

西湖大學(xué)李子青團隊與廈門大學(xué)、德睿智藥合作，首創(chuàng)研發(fā)了能夠刻畫蛋白質(zhì)構(gòu)象變化與親和力預(yù)測的AI模型ProtMD。這是第一個嘗試解析蛋白質(zhì)動態(tài)構(gòu)象的AI方法，可輔助藥物化學(xué)專家更加精準的篩選出高活性小分子，從而加速臨床前藥物研發(fā)。

發(fā)明公開了一種基于關(guān)聯(lián)分析與關(guān)聯(lián)分類的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)預(yù)測技術(shù)，以雙庫協(xié)同機制為基礎(chǔ)，將KDD*過程模型引入蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)預(yù)測問題中，KAAPRO方法以數(shù)據(jù)挖掘(知識發(fā)現(xiàn))為主體，采用基于KDD*過程模型Maradbcm算法以及關(guān)聯(lián)規(guī)則分類D-CBA方法。KAAPRO方法所取得關(guān)聯(lián)規(guī)則在一定程度上揭示了氨基酸物化屬性對蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的影響關(guān)系，從而提高了預(yù)測的精度。其中Maradbcm算法挖掘意外規(guī)則的特性對純度較高的α蛋白質(zhì)庫與β蛋白質(zhì)庫進行關(guān)聯(lián)規(guī)則的挖掘，由此獲得的挖掘結(jié)果是精化的規(guī)則。D-CBA關(guān)聯(lián)分類方法使用可信度與支持度的測度作為一個復(fù)合型度量來進行蛋白質(zhì)關(guān)聯(lián)分類。在保證預(yù)測精度的同時，為生物學(xué)家對二級結(jié)構(gòu)進一步分析提供了依據(jù)。

項目簡介 腦卒中為腦血管破裂或血栓阻塞血管導(dǎo)致大腦缺血損傷，其治療的藥物非常缺乏，阿替普酶是迄今為止唯一獲得FDA批準用于缺血性腦卒中的溶栓藥物,易引起再灌注損傷,可延長其給藥時間窗和減輕再灌注損傷。但臨床上神經(jīng)保護劑十分缺乏。本項目為腦中風(fēng)治療的小分子蛋白藥物研究，包括兩個小分子量蛋白。其一是犬鉤蟲抗凝多肽5（AcAP5），是一種具有強效抗血栓形成（抑制FXa）和溶血栓（抑制TAFIa）兩種功能的蛋白，其中溶栓作用為本團隊發(fā)現(xiàn)（已申請專利并獲得授權(quán)）。其二是在AcAP5基礎(chǔ)上改造的蛋白TBN（已申請專利），具有溶栓和神經(jīng)保護作用功能。體內(nèi)外實驗表明AcAP5和TBN均具有較好的溶栓（溶解動脈血栓）、抗栓（預(yù)防腦中風(fēng)血栓溶解過程中血栓再形成）和神經(jīng)保護作用（減小梗死體積），“三位一體”的功能使其具有更好的治療腦卒中效果。項目團隊 王銀葉，教授，在心血管領(lǐng)域特別是腦卒中新藥研究方面有20多年的經(jīng)驗，發(fā)表了數(shù)十篇相關(guān)文章，主持過多項國家自然基金和科技部項目。項目骨干：朱元軍，博士，講師。擅長蛋白質(zhì)/多肽的設(shè)計、表達和純化工藝研究。項目骨干：劉曉巖，博士，講師。擅長腦卒中的疾病模型構(gòu)建，以及藥物的藥理活性評價及機制研究。以及碩士研究生4名。整個團隊具有蛋白設(shè)計、表達、純化、分子機制和藥效學(xué)評價等技術(shù)能力和條件。 應(yīng)用范圍 AcAP5和TBN可用于急性缺血性腦卒中患者的治療。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，我國每年腦卒中新發(fā)病例高達200余萬，假設(shè)僅僅5%的病人（10萬）接受10000元的AcAP5或TBN等蛋白治療，則年銷售額可望達到10億元。項目階段 本項目處于臨床前研究階段。體內(nèi)外實驗表明AcAP5和TBN均具有較好的抗栓、溶栓和腦保護作用，150 nmol/kg給藥劑量下AcAP5和TBN均可顯著減少小鼠腦梗死的體積。

一種樂昌含笑Mc-Hmgr蛋白編碼序列，屬于基因工程領(lǐng)域。所分離出的DNA分子包括：編碼具有樂昌含笑Mc-Hmgr蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.3中從核苷酸第56-1726位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO.3中從核苷酸第56-1726 位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明是一種3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A的還原酶，有助于提高樂昌含笑中次生代謝產(chǎn)物或其前體的含量，次生代謝產(chǎn)物具有雙向調(diào)節(jié)人體血壓的作用，并可降低人體膽固醇含量，預(yù)防心腦血管硬化等功能。對于保護人民的健康生長有所幫助。

一種南京椴tm-Hmgr蛋白編碼序列，屬于基因工程領(lǐng)域。所分離出的DNA 分子包括：編碼具有南京椴tm-Hmgr蛋白活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列與SEQ ID NO.3中從核苷酸第131-1888位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ ID NO.3中從核苷酸第131-1888位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明是一種3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A的還原酶，有助于提高南京椴中萜類化合物次生代謝產(chǎn)物或其前體的含量，且可以開拓新蛋白資源，對于保護人民的健康生長將有所幫助，同時對我國的農(nóng)業(yè)和醫(yī)藥的研究和發(fā)展具有重要的意義。

乳清蛋白來源于干酪生產(chǎn)過程中的副產(chǎn)品乳清，以其為原料，經(jīng)水化、熱改性等工藝制備聚合乳清蛋白，應(yīng)用主要為脂肪替代物、酸奶增稠劑以及微膠囊壁材。 自主研發(fā)規(guī)模聚合反應(yīng)器，設(shè)備操作簡單、自動循環(huán)、省時省力。 聚合乳清蛋白作為乳源性增稠劑制備中國式希臘酸奶，提高酸奶質(zhì)地、黏度，使結(jié)構(gòu)更加致密。生產(chǎn)工藝操作簡單，提高產(chǎn)率，增加蛋白質(zhì)的含量，降低其他生產(chǎn)用增稠劑的用量，降低成本，減少傳統(tǒng)工藝中酸性乳清排放造成的環(huán)境污染。 1500L聚合乳清蛋白反應(yīng)裝置 高凝膠聚合乳清蛋白清潔標簽發(fā)酵乳生產(chǎn) 高凝膠穩(wěn)定型聚合乳清蛋白清潔標簽酸乳

腦卒中為腦血管破裂或血栓阻塞血管導(dǎo)致大腦缺血損傷，其治療的藥物非常缺乏，阿替普酶是迄今為止唯一獲得FDA批準用于缺血性腦卒中的溶栓藥物,易引起再灌注損傷,可延長其給藥時間窗和減輕再灌注損傷。但臨床上神經(jīng)保護劑十分缺乏。本項目為腦中風(fēng)治療的小分子蛋白藥物研究，包括兩個小分子量蛋白。其一是犬鉤蟲抗凝多肽5（AcAP5），是一種具有強效抗血栓形成（抑制FXa）和溶血栓（抑制TAFIa）兩種功能的蛋白，其中溶栓作用為本團隊發(fā)現(xiàn)（已申請專利并獲得授權(quán)）。 其二是在AcAP5基礎(chǔ)上改造的蛋白TBN（已申請專利），具有溶栓和神經(jīng)保護作用功能。體內(nèi)外實驗表明AcAP5和TBN均具有較好的溶栓（溶解動脈血栓）、抗栓（預(yù)防腦中風(fēng)血栓溶解過程中血栓再形成）和神經(jīng)保護作用（減小梗死體積），“三位一體”的功能使其具有更好的治療腦卒中效果。