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已成功構(gòu)建Ad-GDF-5和Ad-GFP；已成功構(gòu)建小腸粘膜下層和殼聚糖－聚己酸內(nèi)酯支架；目前已完成動(dòng)物椎間盤退變模型的制作，間充質(zhì)干細(xì)胞的提取，分離，培養(yǎng)和鑒定；已制備轉(zhuǎn)基因MSCs，完成轉(zhuǎn)基因MSCs的細(xì)胞特性，其和支架之間的相互影響。

一、成果簡(jiǎn)介 擁有雞基因組細(xì)菌人工染色體(BAC)文庫(kù)，基因組覆蓋率10倍以上，100~300kb基因組插入率達(dá)到90%以上，文庫(kù)的嵌合體率為5%~6%，為功能基因的研究提供了重要的資源和平臺(tái)。對(duì)雞重要經(jīng)濟(jì)性狀QTL座位的大尺度定位，在10條染色體發(fā)現(xiàn)19個(gè)QTL座位影響體重性狀；在18條染色體上發(fā)現(xiàn)52個(gè)QTL座位影響不同的屠宰性狀和屠體測(cè)量性狀；在12條染色體發(fā)現(xiàn)21個(gè)QTL座位影響脛長(zhǎng)性狀。開(kāi)展了包括茶花雞在內(nèi)的雞蛋白質(zhì)組功能基因表達(dá)研究，通過(guò)

利用模式植物擬南芥為研究對(duì)象，通過(guò)對(duì)染色質(zhì)結(jié)合的RNA的純化及測(cè)序分析（CB-RNA-seq），研究團(tuán)隊(duì)的工作顯示共轉(zhuǎn)錄剪接在目前已檢測(cè)的物種中是普遍模式。同時(shí)，植物的共轉(zhuǎn)錄剪接存在幾個(gè)重要的特征：首先, 共轉(zhuǎn)錄剪接的效率與特定內(nèi)含子到基因3’端的距離正相關(guān)，與一些激活型的組蛋白修飾（H3K4me3/H3K9ac）負(fù)相關(guān)，暗示快速的轉(zhuǎn)錄起始及延伸不

項(xiàng)目成果/簡(jiǎn)介:本發(fā)明公開(kāi)了一種苜蓿木葡聚糖轉(zhuǎn)葡糖苷酶(xyloglucanendotransglycosylase，xet)及其編碼基因與應(yīng)用，所述苜蓿木葡聚糖轉(zhuǎn)葡糖苷酶(mtxet)及其編碼基因可以用于調(diào)節(jié)植物的根系發(fā)生發(fā)展，由此調(diào)節(jié)提高植物的抗旱和抗寒能力。本發(fā)明的苜蓿木葡聚糖轉(zhuǎn)葡糖苷酶在培育根系更加發(fā)達(dá)的植物品種中具有重要意義。

中試階段/n成果簡(jiǎn)介：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)作物遺傳改良國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室水稻研究團(tuán)隊(duì)多年來(lái)逐漸形成了水稻功能基因組研究和綠色超級(jí)稻新品種培育兩大特色領(lǐng)域。（1）水稻功能基因組研究的目標(biāo)是破譯基因組“天書”，大規(guī)模發(fā)掘重要的功能基因及調(diào)控元件，弄清控制重要農(nóng)藝性狀的分子網(wǎng)絡(luò)，實(shí)現(xiàn)利用現(xiàn)代生物技術(shù)提升我國(guó)傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)。構(gòu)建了水稻功能基因組研究的技術(shù)和平臺(tái)，包括大量作圖群體和創(chuàng)新種質(zhì)、T-DNA插入突變體庫(kù)，全基因組表達(dá)譜，秈稻全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)、本地化生物學(xué)信息平臺(tái)。以水稻高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗病、抗逆和營(yíng)養(yǎng)高效利用等重要農(nóng)藝性

本發(fā)明的目的是提供一種鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗，即采用生物技術(shù)對(duì)鴨坦布蘇病毒E蛋白進(jìn)行抗原表位分析、拼接，獲得一種鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE，并以該融合蛋白作為抗原來(lái)制備鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗。本發(fā)明中鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE，其編碼蛋白的氨基酸序列為SEQ ID NO:1；其中一種核苷酸序列為SEQ ID NO:2。本發(fā)明利用pET28a（+）表達(dá)性載體構(gòu)建了能表達(dá)鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE的大腸桿菌BL21(DE3)宿主菌。將重組表達(dá)的蛋白純化后制備成基因工程亞單位疫苗，可使免疫后鴨群獲得免疫保護(hù)。

該發(fā)明屬于豬的分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種作為豬標(biāo)記輔助選擇的與初生重性狀相關(guān)的分子標(biāo)記GLI2的克隆及應(yīng)用。該分子標(biāo)記為豬GLI2基因第8外顯子區(qū)的一個(gè)G-A多態(tài)位點(diǎn)（導(dǎo)致NcoI-RFLP多態(tài)性），該多態(tài)性位點(diǎn)各基因型與大白豬初生重、白細(xì)胞數(shù)目、淋巴細(xì)胞比率和嗜堿性粒細(xì)胞比率呈顯著關(guān)聯(lián)(P<0.05)，且AG基因型個(gè)體的初生重顯著高于GG型個(gè)體（P=0.005）。 主要技術(shù)指標(biāo)：DNA的提取，PCR-RFLP 應(yīng)用范圍：大白豬 該分子標(biāo)記可用于大白豬初生重性狀的改良，直接提取血液DNA，實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行PCR-RFLP檢測(cè)公母豬基因型，通過(guò)選配，有望提高仔豬初生重。 轉(zhuǎn)化條件：豬場(chǎng)，PCR儀，電泳儀 成果完成時(shí)間：2017年6月

基因治療通過(guò)糾正患病細(xì)胞基因缺陷或者調(diào)控細(xì)胞內(nèi)特定蛋白因子的表達(dá)，在攻克威脅人類健康的重大疾病（如癌癥，帕金森等）方面展現(xiàn)出廣闊的應(yīng)用前景。但核酸分子在遞送過(guò)程中非常容易被酶降解，因此缺乏高效的基因載體材料已成為基因治療的最大障礙。本工作通過(guò)將廉價(jià)低分子量陽(yáng)離子聚合物（如，聚乙烯亞胺和聚賴氨酸等）修飾上一種生物體內(nèi)可還原的金屬配位單元，得到一種高效安全的鋅配體修飾陽(yáng)離子聚合物基核酸載體材料。 項(xiàng)目特色: 本項(xiàng)目具有制備簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，基于該材料的基因載體復(fù)合物對(duì)多種細(xì)胞系具有極高的轉(zhuǎn)染效率，且細(xì)胞毒性小，具有很強(qiáng)的抗血清能力。該產(chǎn)品對(duì)多種細(xì)胞系在轉(zhuǎn)染性能上顯著優(yōu)于目前市場(chǎng)上商品化主流轉(zhuǎn)染試劑。該項(xiàng)目技術(shù)已申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專利。

本發(fā)明公開(kāi)了一種弓形蟲基因敲除蟲株，該蟲株缺失核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的弓形蟲微線體蛋白MIC19（TGME49_294790基因），本發(fā)明還公開(kāi)了該蟲株的構(gòu)建方法及其應(yīng)用，屬于生物領(lǐng)域。本發(fā)明構(gòu)建的基因敲除蟲株ME49Δmic19具有毒力致弱的優(yōu)點(diǎn)，能誘導(dǎo)動(dòng)物的免疫保護(hù)反應(yīng)，可用于制備弓形蟲弱毒活疫苗。 成果發(fā)布時(shí)間：2025 年

癌癥從發(fā)生到臨床發(fā)現(xiàn)往往需要10年的時(shí)間，癌癥治療的根本途徑是早期發(fā)現(xiàn)或者對(duì)已轉(zhuǎn)移瘤能有效治療。循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulatingtumor cells, CTC）是指從原位瘤脫落下來(lái)進(jìn)入到循環(huán)系統(tǒng)尤其是血液中的腫瘤細(xì)胞。作為液態(tài)活檢核心靶標(biāo)的CTC，不僅可用于癌癥轉(zhuǎn)移前的早期篩查，而且在臨床腫瘤的分期、預(yù)后、特異性藥物篩選、療效檢測(cè)、治療和復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)等方面都具有極其重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。然而由于CTC在血液中數(shù)量極其稀少（約1-100個(gè)/mL），其高效高準(zhǔn)確捕獲一直是科學(xué)前沿難題和臨床應(yīng)用的關(guān)鍵障礙。 現(xiàn)有的CTC檢測(cè)方法仍存在較大的局限，包括檢測(cè)準(zhǔn)確度不足、成本高、效率低、時(shí)間長(zhǎng)以及檢測(cè)條件苛刻等。本項(xiàng)目提出的新型微流控芯片設(shè)計(jì)，將基于流線的降速結(jié)構(gòu)和基于過(guò)濾的捕獲結(jié)構(gòu)有機(jī)整合，實(shí)現(xiàn)了CTC特異性的匯聚和保留，同時(shí)將部分白細(xì)胞和紅細(xì)胞分流到出口。每經(jīng)過(guò)一個(gè)這樣的降速結(jié)構(gòu)，CTC就被濃縮一次，白細(xì)胞和紅細(xì)胞被分走一部分。更重要的是，每一個(gè)單元液流速度均得到了顯著下降（變?yōu)樵瓉?lái)的1/2）。經(jīng)過(guò)多組這樣的降速結(jié)構(gòu)，液流流入捕獲結(jié)構(gòu)，此時(shí)流速已經(jīng)非常緩慢，利用CTC和其他血細(xì)胞的尺寸和形變差異，通過(guò)三棱柱陣列能實(shí)現(xiàn)CTC的高效捕獲。總體來(lái)說(shuō)，本項(xiàng)目所提出的微流控芯片能在很大流速范圍內(nèi)（5-40 mL/h）都實(shí)現(xiàn)高捕獲效率（高達(dá)94.8%）。此外，芯片上捕獲到的CTC的純度也較高（高達(dá)4log白細(xì)胞去除率）。臨床癌癥患者患者雙盲測(cè)試結(jié)果詳實(shí)準(zhǔn)確率達(dá)到100%。運(yùn)用本項(xiàng)目中的微流控芯片，將實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的宮頸癌HeLa細(xì)胞摻雜到健康血液中，以模擬癌癥患者血液，在很大流速范圍內(nèi)（5-40 mL/h）都能實(shí)現(xiàn)高捕獲效率（高達(dá)94.8%）。同時(shí)，為了證明此微流控芯片的普適性，測(cè)試了四種實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞系，包括乳腺癌細(xì)胞系MCF-7和MDA-MB-231，宮頸癌細(xì)胞系HeLa和肺癌細(xì)胞系NCl-H226，捕獲效率均穩(wěn)定在91.3%以上。此外，也設(shè)置了不同的癌細(xì)胞密度以模擬實(shí)際的癌癥患者血液，捕獲效率近似為96.2%。隨后，將本項(xiàng)目應(yīng)用于臨床，對(duì)11例癌癥患者血液中的CTC進(jìn)行檢測(cè)，檢出率高達(dá)100%，CTC個(gè)數(shù)從6-117個(gè)/mL不等，平均值31個(gè)/mL，中位數(shù)25個(gè)/mL。這些研究表明本項(xiàng)目中的微流控芯片能實(shí)現(xiàn)癌癥患者的早期檢測(cè)。?本項(xiàng)目實(shí)現(xiàn)對(duì)癌癥患者血液中的循環(huán)腫瘤細(xì)胞的單細(xì)胞靈敏度和高特異性的的捕獲，由于其成本低，方便快速，效率高，對(duì)操作條件不敏感等，因而非常適合大規(guī)模應(yīng)用于臨床，實(shí)現(xiàn)癌癥的早期診斷、實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和阻斷轉(zhuǎn)移等效果。