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通過檢測少量血液中ctDNA特定位點甲基化水平，對肝癌進行早期診斷及療效和預后預測的新方法。ctDNA相當于腫瘤細胞釋放到血液中的身份指紋，由于其攜帶有與原發腫瘤相一致的甲基化改變，理論上可以利用ctDNA的甲基化譜對腫瘤進行診斷，這一被稱為“液體活檢”（Liquid Biopsy）的新技術已經成為當前腫瘤研究領域的熱點之一。但是，ctDNA在血液中的含量極微，每毫升血中僅有約20ng，相當于一滴水的一億分之一，并且混雜在更大量的正常游離DNA背景中，在這么微量的ctDNA中檢測單個堿基的甲基化水平，好比在機場和火車站的數百萬人流中找到個別犯罪分子，其難度可想而知。?先后攻克了穩定提取微量ctDNA、提高重亞硫酸鹽轉化效率、靶向甲基化PCR擴增及測序、海量數據的統計學分析處理等一個個技術壁壘，終于從40多萬個候選位點中分別尋找到10個早期診斷和療效相關以及8個預后相關的位點，就像是破獲了肝癌的“身份指紋”，讓早期的肝癌病灶也無所遁形，實現肝癌早診早治技術的關鍵突破。

本項目擬研發腫瘤特異熒光增強核酸遞送體系，該體系的制備及產業化將有助于開發原發性肝癌早期診斷的新材料和新方法，提供腫瘤的熒光成像及術中導航的新產品和新思路。

本項目提供了一種靶向肝癌細胞的納米藥物（LTAG-NPs）。該藥 物以天然多糖搭載臨床廣泛使用的鉑類抗癌藥物，具有合成簡便，成 分友好的特點，通過與肝（癌）細胞發生特異性結合，實現肝癌靶向 效果。藥物在肝部高效富集并在腫瘤細胞中釋藥。因此，LTAG-NPs 在有效抑制腫瘤生長的同時，明顯降低傳統化療藥物強烈的毒副作用， 提高患者順從度和安全性。具有較高臨床應用價值和轉化前景。 體外釋藥實驗表明，在腫瘤細胞環境下，LTAG-NPs 4 小時釋放 藥物超過 20%，6 天藥物全部釋放，既在 6 天內緩慢持續釋藥；藥物 代謝實驗證明，LTAG-NPs 在注射小鼠體內 24 h 后仍保持較高藥物 濃度，具有血液長循環效果；生物分布實驗證明，納米藥物在肝部的 富集是傳統化療藥物的 5-6 倍，明顯降低了在腎臟的積累；對于同時 種有肝異位瘤和肺異位瘤的小鼠，LTAG-NPs 在肝異位瘤的富集量為 肺異位瘤的 2.5 倍，說明具有優異的肝腫瘤靶向能力。體內抑瘤實驗 證明，納米藥物具有與傳統化療藥物相當的抑瘤效果但毒副作用明顯 降低，尤其是明顯降低了腎毒性。大劑量注射傳統化療藥物的小鼠在 5 天內全部死亡，而納米藥物組則保持存活率 100%，且小鼠體重穩 步上升，體征良好。 以上動物實驗全部由醫院完成并進行相關評價

 高志良教授團隊與雙聘教授鄺棟明教授團隊合作，在“十三五”國家科技重大專項和國家自然科學基金重點項目等基金的支持下，發現了PD-L1+肝癌免疫微環境存在高度的異質性。研究證實巨噬細胞和T細胞釋放的炎性介質均參與了PD-L1+肝癌形成，但巨噬細胞同時賦予了PD-L1+肝癌可抵抗傳統化療、T細胞殺傷和免疫檢查點治療的特征。聯合免疫檢查點治療和巨噬細胞功能調控有望成為新型的肝癌治療策略。同時，上述主體研究結論同時在多種人類腫瘤中得到驗證。

本研究將構建重組溶瘤腺病毒，以期達到治療實體腫瘤（肝癌）的目的。在腫瘤局部，利用溶瘤腺病毒誘導的炎癥引起免疫細胞浸潤。同時病毒可以感染并裂解腫瘤細胞，導致腫瘤相關抗原釋放。而重組溶瘤腺病毒可以同時使被感染的細胞表達免調控融合蛋白PD1CD137L，在活化T 細胞的同時封閉腫瘤表面PD-L1 傳遞的負向信號。最終使得機體的免疫細胞能夠識別腫瘤抗原，并產生特異性抗腫瘤免疫應答，最終達到清除腫瘤的目的。

課題組對六例多灶肝癌患者共34個病灶進行了高深度全外顯子測序，發現多灶肝癌大部分來源于肝內轉移，共享部分突變；進一步的進化樹分析顯示每個病灶又呈現出相對獨立的克隆進化模式，且僅有20%靶向藥物的作用靶點位于進化樹的樹干，即為所有病灶所共有，其中，僅有一位患者的索拉非尼敏感靶點位于進化樹的樹干，提示該患者所有病灶理論上可對索拉非尼治療產生應答，從而揭示了多灶肝癌因克隆進化引起的藥物靶點分布不均的特點，為預防多灶肝癌患者術后復發的精準靶向治療提供了理論依據。       同時，該研究通過轉錄組測序數據首次分析了多灶肝癌免疫微環境的差異，發現即使是同一患者，不同病灶浸潤的免疫細胞成分及數量均存在明顯差異?；谔卣餍悦庖呦嚓P基因的表達水平進行無監督聚類分析，可將病灶分為高免疫和低免疫兩種亞型，并觀察到高免疫性腫瘤同時伴有PD1等抑制性免疫分子的高表達，提示此類患者更可能從PD1單抗治療中獲益，為肝癌免疫治療獲益人群的篩選提供了依據。

l 一種高效的痕量臨床病人樣本的高通量全蛋白組學定量分析方法。中國發明專利申請號：CN201710155263.3.基于二代測序和蛋白質組學的高效價特異性抗體基因工程生產和制備。

發現了一系列p53 在維持干細胞基因組穩定性及干性的重要功能及機制 （Lin et al., 2005, Nat. Cell Biol. 7, 165-171; Song et al., 2007, Nat. Cell. Biol. 9:573-80; Liu et al., 2010, Nat. Cell Biol. 12:993-8; Song et al., 2010, Cell Stem Cell 6, 180-89; Xiong et al., 2015, J Cell Biol. 208:513-20）。本研究成果解釋了p53在某些腫瘤里突變率很高，但在肝癌里突變率很低的原因，為臨床上治療肝癌提供了新思路；同時對當前腫瘤藥物的研發起到了警示作用，比如通過增強癌癥患者p53功能的藥物可能會在無意中導致腫瘤的生長。

在唾液中敏感地檢測到肝細胞癌變過程中釋放出來的標志物。通過不斷技術創新，患者僅需通過唾液就能檢測早期肝癌，無需采取血液樣本，無創高效，敏感性超過80%、特異性接近98%，遠遠高于血液AFP檢測，適合于原發性肝癌早期預警、早期診斷、術后療效評估與復發監測，更適合于大規模社區人群普查。

本團隊首創了超穩定均相碘化油配方技術，依托該技術成功開發全球首臺SHIFT超穩定均相藥物混合儀，并根據臨床實際需求進行三次產品迭代，將臨床介入治療肝癌所使用的碘化油和各類藥物結合，成功解決了臨床中藥物分子與碘化油混合易分層、穩定性較差的問題。 一、負責人及成員 姓名 學院/所學專業 入學/畢業時間 鄭雅婷 公共衛生學院 2021-09/2024-06 程紅偉 公共衛生學院 2019-09/2023-06 何  攀 公共衛生學院 2020-09/2024-06 高  興 公共衛生學院 2019-06/2022-06 陳喻倫 公共衛生學院 2020-09/2023-06 黃玉蘭 公共衛生學院 2021-09/2024-06 孫鑫飛 公共衛生學院 2021-09/2024-06 屈峰灝 公共衛生學院 2020-09/2024-06 敖靜宜 公共衛生學院 2020-09/2024-06 胡安琪 公共衛生學院 2020-09/2024-06 潘金韜 公共衛生學院 2015-09/2019-06 二、指導教師 姓名 學院/所學專業 職務/職稱 研究方向 劉  剛 公共衛生學院 教授 納米藥物 楚成超 公共衛生學院 副教授 眼部血管新生診療一體化 張  陽 公共衛生學院 副教授 納米藥物 三、項目簡介 肝癌是我國以及亞非地區常發的癌癥，具有較高的死亡率。全球每年新發肝癌患者約85.4萬，中國為46.6萬，肝癌防治形勢極其嚴峻。肝動脈化療栓塞術（TACE）是公認的肝癌重要的治療方法。臨床最常用的栓塞劑為碘油，大量臨床研究表明碘油栓塞和化療或者放療結合能夠提高肝癌介入栓塞治療效果，但藥物和碘油很難穩定相溶，目前主要通過機械混合或者溶劑輔助來制備，臨床效果不佳。經數年的努力，本團隊首創了超穩定均相碘化油配方技術，依托該技術成功開發全球首臺SHIFT超穩定均相藥物混合儀，并根據臨床實際需求進行三次產品迭代，將臨床介入治療肝癌所使用的碘化油和各類藥物結合，成功解決了臨床中藥物分子與碘化油混合易分層、穩定性較差的問題。團隊后續將聚焦于全球首臺SHIFT超穩定均相藥物混合儀的產業化，并開發人工智能學習系統，深入探究SHIFT機制，進一步研發智能化設備，提升SHIFT技術壁壘；在肝癌介入栓塞領域，于實踐中構建廣譜載藥平臺，致力于克服臨床上親水性藥物分子與碘油難溶的實際問題，讓更多化療藥物、放療藥物、光學造影劑能夠在肝癌介入栓塞治療中發揮更大的作用。并力爭將該技術拓寬、拓大至其他腫瘤、心血管疾病、腦部疾病、眼科疾病等領域。