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本發(fā)明涉及納米顆粒技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種蛋白?原花青素復合納米顆粒，以脯氨酸蛋白為載體，原花青素與脯氨酸蛋白通過自身的親和作用復合在一起，裝載率為33.5?62.3％，尺寸小于300nm，聚合物分散性指數(shù)小于0.3。制備方法在45?53℃條件下將脯氨酸蛋白溶液保溫攪拌，然后滴加相同體積的原花青素溶液，滴加完畢后在45?53℃條件下攪拌2?5h，冷卻至室溫，離心，洗滌、凍干。本發(fā)明的制備方法簡單可行，

本發(fā)明提供一種人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7突變蛋白，含有Arg198Ile/His200Phe的突變，具有SEQ ID NO.1的氨基酸序列。是從人結(jié)直腸癌細胞系SW480cDNA文庫中選出igfbp7基因編碼序列，然后構(gòu)建到原核表達載體pET28a質(zhì)粒中，使其能夠在大腸桿菌菌株BL21中表達IGFBP7蛋白。在該表達載體的基礎(chǔ)之上，構(gòu)建人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7突變蛋，轉(zhuǎn)化BL21后表達純化突變蛋白，指出IGFBP7與胰島素結(jié)合的關(guān)鍵位點。本發(fā)明提供的突變蛋白，制備方法步驟簡單可行且成功率較高，該蛋白與胰島素的結(jié)合能力有明顯降低，從而可以抑制胰島素抵抗，可在制備治療2型糖尿病藥物中應用。

本技術(shù)首先根據(jù)鴨胸軟骨的化學組成設(shè)計了一種用于提取鴨硫 酸軟骨素的新型復合蛋白酶的基礎(chǔ)配方，并利用復配酶制備鴨硫酸軟骨素，其 工藝包括鴨胸軟骨骨粉的制備、鴨胸軟骨骨粉的酶解提取、蛋白質(zhì)的沉降、硫 酸軟骨素粉末四個步驟。本發(fā)明采用了復配酶解法提取鴨胸軟骨的硫酸軟骨素， 采用新型復合蛋白酶和胰蛋白酶復配，去掉了堿提這一步，在復配酶使用上也 進行了優(yōu)化，其收率比其它方法提高了 20%左右，產(chǎn)品純度達到 90%~95%。用復 合酶代替稀堿或濃堿解離軟骨能夠大大降低對環(huán)境的污染，并且可以有效縮短 生產(chǎn)周期、降低生產(chǎn)成本、增加了產(chǎn)品收率、提高產(chǎn)品質(zhì)量，填補了該領(lǐng)域的 空白。 技術(shù)優(yōu)點或者效益預測:硫酸軟骨素(Chondroitinsulfate，CS)是 D-葡萄糖 醛酸和 N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷鍵連接而成的重復二糖單位組成的酸 性黏多糖。硫酸軟骨素具有抗凝血、抗炎癥、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、降血 脂、防止動脈粥樣硬化、調(diào)節(jié)體內(nèi)水分、清除自由基和延緩衰老等多種生理功 能，可應用于食品、藥品、各種保健品及高檔化妝品中。我國是全球硫酸軟骨 素產(chǎn)量最大的國家，占全球產(chǎn)量的 80%以上，年平均產(chǎn)量多于 4000 噸；我國硫 酸軟骨素主要出口到美國、歐洲、日本等地，其中美國作為我國硫酸軟骨素第 一大出口市場，出口份額約占 50%。所以，隨著硫酸軟骨素生物活性功能不斷研 究及其應用領(lǐng)域的不斷擴展，硫酸軟骨素用途越來越廣，具有廣闊市場應用前 景。

研究人員運用生物信息學分析疊加肝癌隊列標本驗證證實CACYBP在肝癌組織中高表達，且高表達CACYBP的肝癌病人總生存時間及無疾病進展時間更短，預后更差；而通過體外細胞實驗及小鼠模型發(fā)現(xiàn)缺失CACYBP的肝癌細胞株在體內(nèi)和體外的生長增殖能力顯著減弱。為了研究CACYBP調(diào)控肝癌生長的分子機制，研究人員利用串聯(lián)親和純化連用質(zhì)譜技術(shù)，首次鑒定出環(huán)指蛋白41（RNF41）與CACYBP相互作用，并通過泛素化實驗及放線菌酮追蹤檢測證實RNF41為CACYBP上游特異的E3泛素連接酶，在肝癌細胞中促進CACYBP的降解，且兩者在肝癌組織中的表達呈顯著負相關(guān)。進一步研究發(fā)現(xiàn)，CACYBP促進Ser10磷酸化使P27Kip1存留在胞漿中，從而加速細胞周期，促進肝癌細胞生長增殖，而RNF41對這一過程具有抑制作用。       該研究結(jié)合生物信息學分析、肝癌隊列標本、細胞功能及分子機制驗證，一方面揭示了CACYBP促進肝癌生長增殖的上下游分子機制，另一方面為開發(fā)新型肝癌診療靶點提供了理論依據(jù)。

本發(fā)明涉及分子微生物學領(lǐng)域，具體的說是一種C型凝集素(C-type?lectin)及其制備和應用。C型凝集素為序列表SEQ?ID?No.1中的氨基酸序列所示。制備方法：以許氏平鮋cDNA為模板PCR擴增C型凝集素基因，構(gòu)建質(zhì)粒pLecC；將pLecC轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21Transetta(DE3)，對轉(zhuǎn)化子進行誘導表達后，收集上清，濃縮后即得重組C型凝集素。所述C型凝集素對多種弧菌具高效凝集作用，經(jīng)C型凝集素處理后的細菌對許氏平鮋的侵染能力顯著降低。因此，該C型凝集素有望應用于魚類細菌性病害的防治。

骨素是從鯊魚魚翅骨中提取的。

海藻素是以泡葉藻、馬尾藻為原料，采用先進的提取工藝精制而成，提取海藻中豐富的礦物質(zhì)及微量元素等成分，同時還含有一定數(shù)量的多酚化合物、海藻多糖和大量的生長調(diào)節(jié)因子，如細胞分裂素、生長素、赤霉素、甜菜堿、多胺等，極大的保留了純天然活性成分。這些純天然的活性成分，可刺激植物內(nèi)非特異性活性因子的產(chǎn)生和調(diào)節(jié)內(nèi)源激素的平衡，促進植物的光合作用協(xié)調(diào)生長發(fā)育，提高其生命活力和對病、蟲、旱、澇、低溫等逆境的抗性。 海藻素屬于天然萃取物，無毒無害，無副作用的最佳植物營養(yǎng)食物，促進種子萌芽和幼苗生長、提高作物產(chǎn)量、改善作物品質(zhì)、提高作物抗旱性、增效氮素等功效。可與其他肥料復配成新型的固體或液體肥，也可以通過海藻素中的多糖與農(nóng)藥（強堿性農(nóng)藥除外）形成復合體，是一種很好的農(nóng)藥稀釋增效劑，也顯著提高藥效并延長藥效期。 海藻素的五大特點  海藻素比傳統(tǒng)肥料營養(yǎng)全面，作物施用后生長均衡，增產(chǎn)效果顯著，且極少出現(xiàn)缺素癥。 海藻素以天然海藻為主要原料，含有大量從海藻中提取的有利于植物生長發(fā)育的天然生物活性物質(zhì)和海藻從海洋中吸收并富集在體內(nèi)的礦物質(zhì)營養(yǎng)元素，包括海藻多糖、酚類多聚化合物、甘露醇、甜菜堿、植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)（細胞分裂素、赤霉素、生長素和脫落酸等）和氮、磷、鉀及鐵、硼、鉬、碘等微量元素。此外，為增加肥效和肥料的螯合作用，部分產(chǎn)品還溶入了適量的腐殖酸和適量微量元素，可滿足作物生長各階段對營養(yǎng)的需求。 海藻素中含有大量抗病因子及特殊成分，肥藥雙效。作物施用后抗逆抗病性顯著增強，葉面噴施可提高農(nóng)藥效果。  海藻素中含有的海藻多糖及低聚糖、甘露醇、酚類多聚化合物、甜菜堿、海藻酸及天然抗生素等物質(zhì)，具有顯著的抑菌抗病毒、驅(qū)蟲效果，真正起到肥藥作用，大幅增強作物的抗寒、抗旱、抗病、抗倒伏、抗鹽堿能力，對疫病、病毒病、炭疽、霜霉、灰霉、白粉病、枯萎病等產(chǎn)生較強的抗性。此外，海藻素中的海藻酸可以降低水的表面張力，在植物表面形成一層薄膜，增大接觸面積，使水溶性物質(zhì)比較容易透過莖葉表面細胞膜進入植物細胞，使植物最有效地吸收海藻提取液中的營養(yǎng)成分。如果把海藻素和殺蟲劑、殺菌劑混合使用，具有增效作用，可降低噴灑費用。  海藻素中含有大量的高活性成分，植物易吸收。作物施用后長勢旺盛，可明顯提高產(chǎn)量及作物的品質(zhì)。  海藻中所特有的海藻多糖、海藻酸、高度不飽和脂肪酸等物質(zhì)，具有很高的生物活性，可刺激植物體內(nèi)非特異性活性因子的產(chǎn)生。同時，海藻素中還含有天然植物生長調(diào)節(jié)劑，如：生長素、細胞分裂素類物質(zhì)和赤霉素等，其比例與陸生植物中各激素比例相近，具有很好調(diào)節(jié)內(nèi)源激素平衡的作用。作物施用后，產(chǎn)量及品質(zhì)明顯提高，葉菜類增產(chǎn)20%以上，糧食作物增產(chǎn)15%以上，果樹增產(chǎn)10%～30%，同時使一級果的數(shù)量增加到80%以上，能明顯提高煙草、棉花、花卉等經(jīng)濟作物品質(zhì)，尤其是對大棚蔬菜作物，增產(chǎn)增值效果十分顯著。  海藻素含有豐富的有機質(zhì)及緩釋因子，肥效長，可改善土壤微生態(tài)、活土促根及抗重茬。  海藻素可直接使土壤或通過植物使土壤增加有機質(zhì)，激活土壤中的各種有益微生物。這些微生物可在植物、微生物代謝循環(huán)中起著催化劑的作用，使土壤的生物效力增加。植物和土壤微生物的代謝物可為植物提供更多的養(yǎng)分。同時，海藻多糖形成的螯合系統(tǒng)可以使營養(yǎng)緩慢釋放，延長肥效。另外，它含有的天然化合物如海藻酸鈉是天然土壤調(diào)理劑，能促進土壤團粒結(jié)構(gòu)的形成，改善土壤內(nèi)部孔隙空間，協(xié)調(diào)土壤中固、液、氣三者比例，恢復由于土壤負擔過重和化學污染而失去的天然膠質(zhì)平衡，增加土壤生物活力，促進速效養(yǎng)分的釋放，有利于根系生長，提高作物的抗逆性及抗重茬能力。 海藻素天然安全無公害。  傳統(tǒng)的化學肥料肥效單一、污染嚴重，長期使用會導致土壤結(jié)構(gòu)被破壞。海藻素屬天然海藻提取物，與陸生植物有良好的親和性，對人、畜無毒無害，對環(huán)境無污染，具有其他任何化學肥料都無法比擬的優(yōu)點，在國外被列入有機食品專用肥料。海藻素聚合了海洋中多種活性物質(zhì)，具備營養(yǎng)全面、抗病增產(chǎn)、活土、無公害等許多優(yōu)點，是真正符合現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展方向的好肥料。

蛋白

組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶（EZH2）因其功能異常導致腫瘤的發(fā)生發(fā)展而成為極具潛力的腫瘤治療靶點。目前EZH2抑制劑僅抑制自身甲基轉(zhuǎn)移酶活性，無力應對其非催化功能驅(qū)動的致癌活性。研發(fā)靶向EZH2的蛋白質(zhì)水解靶向嵌合體(PROTAC)分子以及分子膠，以實現(xiàn)EZH2的致癌活性的完全阻斷并克服當前雙功能嵌合型蛋白降解藥物成藥性不佳的問題。 基于前期發(fā)現(xiàn)的EZH2降解劑的基礎(chǔ)，通過進一步結(jié)構(gòu)優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)具有良好EZH2 降解活性的PROTAC分子E7、E13和分子膠水ED6Y。其中E13是當前分子量最小的EZH2靶向的PROTAC降解分子，并展現(xiàn)了良好的成藥性；ED6Y是機制新穎的EZH2單價降解劑。在神經(jīng)母細胞瘤、前列腺癌以及急性髓系白血病等惡性腫瘤中，EZH2可通過非甲基轉(zhuǎn)移酶活性，持續(xù)激活癌基因活性。E7、E13和ED6Y通過誘導EZH2蛋白降解實現(xiàn)完全抑制EZH2致癌活性，在臨床前藥效學研究中展現(xiàn)了優(yōu)越的抗腫瘤效果，并可誘導腫瘤免疫原性。EZH2蛋白降解藥物為EZH2依賴性腫瘤治療方法提供了新的策略。 EZH2降解藥物的市場前景廣闊，以神經(jīng)母細胞瘤為例，惡性程度高、疾病進展迅猛且治療難度大，在兒童惡性腫瘤中約占8%至10%，死亡率15%。GD2單抗作為過去數(shù)十年唯一被批準上市的用于神經(jīng)母細胞瘤的新藥，共有三款產(chǎn)品獲批上市，目前并沒有小分子化學藥物獲批上市。本項成果的成功將為以神經(jīng)母細胞瘤為代表的EZH2活化的腫瘤提供新穎的治療策略，將帶來良好的經(jīng)濟社會效益。

? 大蒜素軟膠囊和大蒜素片的藥理作用很廣：1）抗菌作用：大蒜素對葡萄球菌、腦膜炎雙球菌、肺炎雙球菌、鏈球菌、白喉桿菌、痢疾桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、副傷寒桿菌、結(jié)核桿菌、霍亂弧菌等均有明顯的抑致或殺滅作用。2）對心血管的作用：大蒜素對飼膽固醇引起家兔高膽固醇血癥，高血液凝固性和主動脈脂質(zhì)沉積具有保護作用。并有降低血膽固醇、三酸甘油酯和脂蛋白的作用。3）抗癌和提高免疫力作用：對肺部和消化道的霉菌感染有抑制作用，大蒜與腫瘤抽出物相混時，瘤組織發(fā)育受阻。大蒜中還含有激發(fā)人體巨噬細胞吞噬力的有效成