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本發(fā)明公開了一對特異識別綿羊KRT25基因的多肽及其編碼基因和應(yīng)用。該多肽由多肽甲和多肽乙組成；所述多肽甲由16個TAL核酸識別單元組成，每個TAL核酸識別單元中具有一個雙連氨基酸；所述多肽乙由15個TAL核酸識別單元組成，每個TAL核酸識別單元中具有一個雙連氨基酸。本發(fā)明可實(shí)現(xiàn)在細(xì)胞或個體水平上對綿羊KRT25基因進(jìn)行敲除或修飾，以解析綿羊KRT25基因的功能、構(gòu)建綿羊KRT25基因突變庫或獲得相關(guān)疾病模型,為綿羊育種及醫(yī)藥研發(fā)服務(wù)。

增強(qiáng)型地?zé)崮荛_發(fā)技術(shù)主要用于地?zé)崛∨瑢儆诃h(huán)境友好型的地?zé)崮荛_采技術(shù)。 壓裂輔助常規(guī)地?zé)崮荛_發(fā)系統(tǒng)，取熱由抽水井和回灌井組成，這種方式幾乎不消耗地?zé)崴５責(zé)崴ㄟ^換熱器換熱，向外輸出熱量，不進(jìn)入供暖或發(fā)電系統(tǒng)管道。在抽、灌熱水井之間進(jìn)行人工壓裂，形成裂縫，增強(qiáng)地?zé)崴幕毓啵瑥亩档偷責(zé)豳Y源的浪費(fèi)和對環(huán)境的破壞。選取合理的抽、灌井間距，并對回灌溫度進(jìn)行合理控制，不會出現(xiàn)地?zé)崴疁囟认陆档膯栴}。 基于水平分支井的封閉循環(huán)取熱技術(shù)，利用多分支水平井技術(shù)，在主井眼上鉆多個水平分支井眼，換熱流體從主井眼進(jìn)入，然后擴(kuò)展到各分支水平井眼，流體在水平分支井眼中流動時，吸收熱量，然后從絕熱內(nèi)管返回地面，隨后進(jìn)入換熱器，經(jīng)對流換熱加熱地面循環(huán)流體。最終，釋放出熱量的載熱流體在循環(huán)泵的作用下進(jìn)入主井眼，構(gòu)成封閉循環(huán)系統(tǒng)。

本發(fā)明提供一種水平二自由度隔振機(jī)構(gòu)，包括一連接板，連接板中心插有活塞桿，圓盤的沿周均勻安放有四個磁浮單元。利用磁鐵(包括電磁鐵和永磁體)的同極相斥產(chǎn)生的正剛度特性，以及磁鐵異極相吸產(chǎn)生的負(fù)剛度特性，將磁浮單元設(shè)計(jì)為正負(fù)剛度并聯(lián)的水平二自由度隔振系統(tǒng)。由于正負(fù)剛度并聯(lián)使剛度相互抵消，因此，該水平二自由度隔振機(jī)構(gòu)擁有接近零的固有剛度，從而實(shí)現(xiàn)超低頻水平隔振。

槳葉前緣帶旋轉(zhuǎn)圓柱的水平軸風(fēng)力機(jī)。裝置示意圖如下，包括塔架 5、 水平軸機(jī)箱 4、輪轂 3 及槳葉 1，每個槳葉 1，一根可控的繞自身軸線的旋轉(zhuǎn)圓 柱2。

槳葉前緣帶旋轉(zhuǎn)圓柱的水平軸風(fēng)力機(jī)的研發(fā)。裝置示意圖如下，包括塔 架 5、水平軸機(jī)箱 4、輪轂 3 及槳葉 1，每個槳葉 1，一根可控的繞自身軸線的旋 轉(zhuǎn)圓柱 2。

本實(shí)用新型公開了一種無需進(jìn)行水平校正的稱重裝置。稱重平臺上固定安裝有托盤，稱重平臺安裝有傾角傳感器，傾角傳感器測量稱重平臺的傾角，托盤底面經(jīng)稱重傳感器固定連接，稱重傳感器測量托盤上的重量。本實(shí)用新型無需進(jìn)行水平校準(zhǔn)，可用于高精度小誤差地檢測物體的真實(shí)重量。

哺乳動物的胸椎數(shù)決定肋骨數(shù)，肋骨數(shù)是養(yǎng)豬生產(chǎn)中的重要經(jīng)濟(jì)性狀。除豬和羊外，幾乎所有哺乳動物的脊椎數(shù)都是固定的，目前主流的杜洛克、長白、大白豬種的肋骨數(shù)變異明顯，通常是14-16根，每增加一根肋骨，100Kg商品豬體長增加200px，產(chǎn)肉量增加1%以上。因此，肋骨數(shù)的選育改良具有重大的經(jīng)濟(jì)價值。 項(xiàng)目組在豬7號染色體上鑒別到影響效應(yīng)大1根肋骨的基因關(guān)鍵變異位點(diǎn)，由此創(chuàng)建了新型的種豬肋骨數(shù)增加基因育種新技術(shù)，申請并獲得國家發(fā)明專利一項(xiàng)，代表性論文發(fā)表于國際知名在線學(xué)術(shù)期刊PLoS one(2013,8:e20534)。

本發(fā)明提供了谷子SiASR4基因及其應(yīng)用，屬于植物基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明首次克隆得到與植物逆境脅迫相關(guān)的SiASR4基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，將所述基因轉(zhuǎn)化到植物中可提高植物抗逆性。本發(fā)明還提供了用于PCR擴(kuò)增及檢測SiASR4基因的特異引物對，其核苷酸序列如SEQ ID No.2?3所示；用于實(shí)時熒光定量PCR檢測SiASR4基因的特異性引物對，其核苷酸序列如SEQ ID No.4?5所示。本發(fā)明的SiASR4基因可用于植物抗逆新品種的培育，具有廣闊的應(yīng)用前景。

項(xiàng)目簡介 基因治療可用于包括癌癥、艾滋病、心血管病、傳染性疾病等在內(nèi)的各種獲得性和遺傳性疾病。近幾年來核酸及基因藥物得到快速發(fā)展，已有多個核酸藥物經(jīng)FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床治療。基因治療相對其它治療方法有著若干優(yōu)勢，但在實(shí)際應(yīng)用過程中也面臨著一些挑戰(zhàn)。其中，基因輸送載體對于基因治療來說是十分關(guān)鍵。目前開發(fā)基因輸送載體的策略主要分為病毒和非病毒介導(dǎo)的輸送系統(tǒng)。病毒載體具有非常高的輸送效率并且可以保證基因的長期表達(dá)，因此是目前臨床上應(yīng)用最多的載體。但病毒載體在臨床使用過程中也暴露出了許多缺陷，這些缺陷大大限制了病毒載體的應(yīng)用。為了克服病毒載體的諸多不足，近些年來非病毒載體得到了迅速發(fā)展。這其中就包括研究最廣泛的非病毒載體聚乙烯亞胺。PEI是最好的體外轉(zhuǎn)染試劑之一并且已經(jīng)被一些研究工作者當(dāng)成聚合物類基因轉(zhuǎn)染試劑的“金標(biāo)準(zhǔn)”。 PEI的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞毒性主要受其分子量、支化程度、表面電勢和粒徑的影響。隨著分子量的升高，支鏈PEI轉(zhuǎn)染效率升高；然而，細(xì)胞毒性也同時升高。為了消除或降低與PEI有關(guān)的細(xì)胞毒性，目前已經(jīng)發(fā)展出了多種不同的策略。這些策略主要包括使用直鏈高分子量PEI，用多糖、親水性聚合物（如PEG）、二硫鍵連接臂、脂質(zhì)基團(tuán)等取代或連接高分子量和低分子量的支鏈PEI市場上銷售的PEI分子量范圍非常廣泛，從1000 Da以下到1.6 × 103 kDa都有。 維生素E是一種脂溶性化合物，它包括生育酚和生育三烯酚，其中α-生育酚是自然界中分布最廣泛、含量最豐富并且活性最高的維生素E形式。維生素E的生物功能除了最熟知的抗氧化功能之外，還涉及酶活性的調(diào)節(jié)、基因表達(dá)調(diào)控以及神經(jīng)生物學(xué)功能等。通過消化道吸收進(jìn)入血漿的維生素E經(jīng)受體介導(dǎo)進(jìn)入肝細(xì)胞，進(jìn)入肝細(xì)胞的維生素E又在維生素E結(jié)合蛋白的運(yùn)輸下進(jìn)入肝外組織。維生素E本身的疏水性質(zhì)、豐富的生物調(diào)節(jié)功能以及其受體介導(dǎo)的肝細(xì)胞攝取方式都預(yù)示著用它來修飾PEI有助于實(shí)現(xiàn)基因的器官靶向的遞送。 因此，我們開發(fā)了維生素E修飾的聚乙烯亞胺衍生物及其合成方法和應(yīng)用。維生素E的修飾有利于基因質(zhì)粒的包載、遞送和釋放，其毒性隨著PEI上的維生素E飾數(shù)目的增加而降低，維生素E的修飾能夠大大增加pDNA質(zhì)粒的細(xì)胞攝取后基因編碼蛋白的表達(dá)。動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明PEI衍生物可成功將pDNA質(zhì)粒輸送到小鼠的肝臟和肺臟中，該復(fù)合物（PEI/pDNA）能進(jìn)入肝臟和肺臟細(xì)胞并進(jìn)一步釋放質(zhì)粒DNA和基因表達(dá)。本成果具有聚乙烯亞胺衍生物作為基因輸送載體具有毒性低、轉(zhuǎn)染效率高和基因藥物已釋放等優(yōu)點(diǎn)。項(xiàng)目團(tuán)隊(duì) 項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)包括北京大學(xué)藥學(xué)院湯新景教授，以及課題博士后和研究生組成。湯新景教授為天然藥物及仿生藥物國家實(shí)驗(yàn)室PI，國家自然科學(xué)基金委優(yōu)青、教育部青年長江學(xué)者和新世紀(jì)人才。應(yīng)用范圍 該項(xiàng)目可用于核酸基因藥物的包載和遞送材料，實(shí)驗(yàn)研究中的基因遞送試劑盒等。項(xiàng)目階段 目前該項(xiàng)目處于臨床前研究（動物研究階段）。知識產(chǎn)權(quán) 已申請專利（201610802130.6），北京大學(xué)為唯一專利權(quán)人。合作方式 技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)許可、技術(shù)入股、共同開發(fā)等。

基因治療可用于包括癌癥、艾滋病、心血管病、傳染性疾病等在內(nèi)的各種獲得性和遺傳性疾病。近幾年來核酸及基因藥物得到快速發(fā)展，已有多個核酸藥物經(jīng)FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床治療。基因治療相對其它治療方法有著若干優(yōu)勢，但在實(shí)際應(yīng)用過程中也面臨著一些挑戰(zhàn)。其中，基因輸送載體對于基因治療來說是十分關(guān)鍵。目前開發(fā)基因輸送載體的策略主要分為病毒和非病毒介導(dǎo)的輸送系統(tǒng)。病毒載體具有非常高的輸送效率并且可以保證基因的長期表達(dá)，因此是目前臨床上應(yīng)用最多的載體。但病毒載體在臨床使用過程中也暴露出了許多缺陷，這些缺陷大大限制了病毒載體的應(yīng)用。為了克服病毒載體的諸多不足，近些年來非病毒載體得到了迅速發(fā)展。這其中就包括研究最廣泛的非病毒載體聚乙烯亞胺。PEI是最好的體外轉(zhuǎn)染試劑之一并且已經(jīng)被一些研究工作者當(dāng)成聚合物類基因轉(zhuǎn)染試劑的“金標(biāo)準(zhǔn)”。 PEI的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞毒性主要受其分子量、支化程度、表面電勢和粒徑的影響。隨著分子量的升高，支鏈PEI轉(zhuǎn)染效率升高；然而，細(xì)胞毒性也同時升高。為了消除或降低與PEI有關(guān)的細(xì)胞毒性，目前已經(jīng)發(fā)展出了多種不同的策略。這些策略主要包括使用直鏈高分子量PEI，用多糖、親水性聚合物（如PEG）、二硫鍵連接臂、脂質(zhì)基團(tuán)等取代或連接高分子量和低分子量的支鏈PEI市場上銷售的PEI分子量范圍非常廣泛，從1000 Da以下到1.6 × 103 kDa都有。 維生素E是一種脂溶性化合物，它包括生育酚和生育三烯酚，其中α-生育酚是自然界中分布最廣泛、含量最豐富并且活性最高的維生素E形式。維生素E的生物功能除了最熟知的抗氧化功能之外，還涉及酶活性的調(diào)節(jié)、基因表達(dá)調(diào)控以及神經(jīng)生物學(xué)功能等。通過消化道吸收進(jìn)入血漿的維生素E經(jīng)受體介導(dǎo)進(jìn)入肝細(xì)胞，進(jìn)入肝細(xì)胞的維生素E又在維生素E結(jié)合蛋白的運(yùn)輸下進(jìn)入肝外組織。維生素E本身的疏水性質(zhì)、豐富的生物調(diào)節(jié)功能以及其受體介導(dǎo)的肝細(xì)胞攝取方式都預(yù)示著用它來修飾PEI有助于實(shí)現(xiàn)基因的器官靶向的遞送。 因此，我們開發(fā)了維生素E修飾的聚乙烯亞胺衍生物及其合成方法和應(yīng)用。維生素E的修飾有利于基因質(zhì)粒的包載、遞送和釋放，其毒性隨著PEI上的維生素E飾數(shù)目的增加而降低，維生素E的修飾能夠大大增加pDNA質(zhì)粒的細(xì)胞攝取后基因編碼蛋白的表達(dá)。動物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明PEI衍生物可成功將pDNA質(zhì)粒輸送到小鼠的肝臟和肺臟中，該復(fù)合物（PEI/pDNA）能進(jìn)入肝臟和肺臟細(xì)胞并進(jìn)一步釋放質(zhì)粒DNA和基因表達(dá)。本成果具有聚乙烯亞胺衍生物作為基因輸送載體具有毒性低、轉(zhuǎn)染效率高和基因藥物已釋放等優(yōu)點(diǎn)。