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【發(fā) 明 人】李念光；唐于平；段金廒【摘要】本發(fā)明涉及藥物化學(xué)研究領(lǐng)域，具體涉及一類新型的基于體內(nèi)代謝機(jī)制的燈盞乙素苷元甲基化產(chǎn)物以及它的制備方法和在防治血栓藥物中的應(yīng)用。藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的燈盞乙素苷元甲基化產(chǎn)物具有較好的溶解性以及抗氧化、抑制細(xì)胞損傷等藥理作用，可開發(fā)成新的防治血栓性疾病的藥物。

項(xiàng)目成果/簡介:本成果課題來源于廣東省科技計劃項(xiàng)目農(nóng)村科技領(lǐng)域。 番石榴葉是一種民間用于降血糖輔助作用的果樹葉，含有豐富的多酚、黃酮和萜類以及多糖等活性成分。目前番石榴葉只有茶葉粗制產(chǎn)品，存在降糖效果不穩(wěn)定、口感差，推廣難等問題，嚴(yán)重阻礙了該天然資源的應(yīng)用發(fā)展。研究證明，通過微生物固態(tài)發(fā)酵，可以促進(jìn)番石榴葉中天然多酚和黃酮類物質(zhì)的轉(zhuǎn)化和釋放,將一些低活性、不易被人體吸收的黃酮糖苷類物質(zhì)（如蘆丁、槲皮素-3-o-β-D-葡萄糖苷等）轉(zhuǎn)化為易于吸收的苷元物質(zhì)（如：槲皮素和山萘酚等），從而提高其生物活性,包括抗氧化活性和降血糖活性；同時真菌代謝的多糖類物質(zhì)具有輔助降血糖功能，可增強(qiáng)發(fā)酵產(chǎn)品的功效。應(yīng)用范圍:制造業(yè)效益分析:成果采用篩選的益生菌和番石榴葉為主要原料發(fā)酵生產(chǎn)，開發(fā)出功能、口感適宜的降血糖食品（番石榴葉發(fā)酵茶制品，番石榴葉降糖餐條），健康成分清晰，安全測試合格，形成了規(guī)范生產(chǎn)工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、安全性評價、降糖功能性評價等系列文件。本成果技術(shù)穩(wěn)定，已通過中試驗(yàn)證，適用于進(jìn)入產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，產(chǎn)品可作為輔助降血糖食品，適用于高血糖人群，同時產(chǎn)品的市場化生產(chǎn)推廣，可促進(jìn)番石榴種植產(chǎn)業(yè)發(fā)展，帶領(lǐng)當(dāng)?shù)剞r(nóng)民發(fā)家致富。

本成果課題來源于廣東省科技計劃項(xiàng)目農(nóng)村科技領(lǐng)域。 番石榴葉是一種民間用于降血糖輔助作用的果樹葉，含有豐富的多酚、黃酮和萜類以及多糖等活性成分。目前番石榴葉只有茶葉粗制產(chǎn)品，存在降糖效果不穩(wěn)定、口感差，推廣難等問題，嚴(yán)重阻礙了該天然資源的應(yīng)用發(fā)展。研究證明，通過微生物固態(tài)發(fā)酵，可以促進(jìn)番石榴葉中天然多酚和黃酮類物質(zhì)的轉(zhuǎn)化和釋放,將一些低活性、不易被人體吸收的黃酮糖苷類物質(zhì)（如蘆丁、槲皮素-3-o-β-D-葡萄糖苷等）轉(zhuǎn)化為易于吸收的苷元物質(zhì)（如：槲皮素和山萘酚等），從而提高其生物活性,包括抗氧化活性和降血糖活性；同時真菌代謝的多糖類物質(zhì)具有輔助降血糖功能，可增強(qiáng)發(fā)酵產(chǎn)品的功效。

動脈粥樣硬化性心血管疾病的發(fā)病率和病死率逐年上升，已經(jīng)成為威脅我國人民健康的主要問題。

本發(fā)明涉及一種檢測紅肉蘋果花青苷降低豬卵巢顆粒細(xì)胞內(nèi)活性氧的方法。按如下步驟操作：用丙酮浸提出紅肉蘋果中的花青苷，抽濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至丙酮除盡，剩余液體用濾膜過濾后，4℃保存?zhèn)溆茫惑w外培養(yǎng)豬卵巢顆粒細(xì)胞；用不同體積分?jǐn)?shù)的紅肉蘋果花青苷和活性氧陽性對照試劑Rosup刺激豬卵巢顆粒細(xì)胞F1代6小時；給細(xì)胞裝載熒光探針DCFH?DA，收集細(xì)胞后用流式細(xì)胞儀檢測。本發(fā)明方法原理可靠，操作簡單，結(jié)果顯示，紅肉蘋果花青苷能降低細(xì)胞內(nèi)的活性氧水平，且隨著濃度的增加效果越明顯。

本發(fā)明公開了一種從野棉花葉中提取的三萜皂苷類化合物及其制備方法和用途，其特點(diǎn)將干燥野棉花葉粉碎，平均粒度為300～500μm，按料液比1g∶15～25mL加入正己烷，室溫下震蕩18～30h，過濾、分離正己烷萃取液；回收脫脂野棉花葉，按料液比1g∶20～30mL加入甲醇提取劑，室溫震蕩24～48h，分離上清液，并將上清液濃縮干燥后得甲醇浸膏；得率10～14％；再將上述甲醇浸膏懸浮于甲醇50～100mL，上大孔吸附樹脂DiaionHP-20層析柱，用甲醇-水梯度洗脫，濃度為0wt％、20wt％、40wt％、60wt％、80wt％、100wt％，洗脫流速為2～4mL/min；收集上述100wt％甲醇洗脫液，濃縮干燥后得到樣品，用半制備高效液相色譜分離純化得到該三萜皂苷類化合物。

本發(fā)明提供了一株樺褐孔菌QD04及其轉(zhuǎn)化虎杖生成白藜蘆醇、三萜皂苷和多糖的方法，所述樺褐孔菌QD04保存于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，編號為CCTCC?M?2015036，本發(fā)明利用藥用真菌QD04將植物中的白藜蘆醇苷轉(zhuǎn)化為白藜蘆醇，大大提高了其白藜蘆醇的收率，工藝簡單，重復(fù)性好；菌體能夠利用虎杖合成自身活性物質(zhì)三萜皂苷和多糖；發(fā)酵產(chǎn)物樺褐孔菌菌絲體含有豐富的人體必需氨基酸，具有較高的營養(yǎng)價值；一次發(fā)酵過程同時獲得白藜蘆醇、三萜皂苷、多糖和樺褐孔菌菌絲體4種產(chǎn)品，生產(chǎn)過程附加值高；所述樺褐孔菌能夠更加徹底地水解虎杖纖維素，使虎杖生物質(zhì)資源得到充分利用，減少了資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。