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從分子辨識分離的基本科學(xué)原理和分子間多重相互作用入手，首創(chuàng)了天然活性同系物分子辨識萃取分離新方法，發(fā)明了弱極性甾類同系物分子辨識萃取分離關(guān)鍵技術(shù)、表面活性同系物相間分配可控的低乳化分子辨識分離關(guān)鍵技術(shù) 一、項(xiàng)目分類 關(guān)鍵核心技術(shù)突破 二、技術(shù)分析 該成果從分子辨識分離的基本科學(xué)原理和分子間多重相互作用入手，首創(chuàng)了天然活性同系物分子辨識萃取分離新方法，發(fā)明了弱極性甾類同系物分子辨識萃取分離關(guān)鍵技術(shù)、表面活性同系物相間分配可控的低乳化分子辨識分離關(guān)鍵技術(shù)，在國際上率先實(shí)現(xiàn)24-去氫膽固醇的工業(yè)制備，形成了由分子辨識分離的理論基礎(chǔ)，到核心技術(shù)創(chuàng)建和工業(yè)應(yīng)用突破的完整體系。

近年來，原位環(huán)境透射電子顯微鏡（ETEM）成為了一種重要的表征手段，廣泛應(yīng)用于納米材料生長、催化反應(yīng)、電池反應(yīng)、納米力學(xué)、高溫相變等現(xiàn)代材料研究領(lǐng)域。不同于常規(guī)透射電鏡表征的靜態(tài)分析，環(huán)境透射電子顯微技術(shù)可以在真實(shí)的反應(yīng)環(huán)境中（熱/電/磁/氣氛）實(shí)時(shí)研究材料原子級別的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)演變及其對性能的影響，為催化反應(yīng)機(jī)理研究提供了更準(zhǔn)確的信息。這就像破案時(shí)直接調(diào)取“監(jiān)控”而非根據(jù)事后的“現(xiàn)場勘測”分析倒推“過程”。

1.長期從事表面活性劑的合成。 2.熟悉表面活性劑的復(fù)配。 3.三次采油驅(qū)油領(lǐng)域、聚合物合成技術(shù)領(lǐng)域相關(guān)技術(shù)專家。 4.油氣壓裂領(lǐng)域、聚合物合成技術(shù)領(lǐng)域相關(guān)專家。

植物病原線蟲作為一種常見的寄生線蟲，具有多寄主、防治難度大、抗藥性強(qiáng)等特點(diǎn)，對于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了嚴(yán)重的危害，其中植物根結(jié)線蟲和植物孢囊線蟲對農(nóng)作物莊稼危害最大，分布范圍也最廣。 該項(xiàng)目針對目前植物病原線蟲難以防治的問題，采用微生物產(chǎn)生的氣味物質(zhì)通過熏蒸作用抑制病原線蟲卵孵化的特點(diǎn)，通過綜合策略防治植物病原線蟲。該技術(shù)不同于目前常用的線蟲防治技術(shù)，將直接觸殺和熏蒸等技術(shù)結(jié)合起來，并可以控制卵的孵化和殺滅幼蟲。對多種蔬菜、作物的病原線蟲具有防治效果，配套條件主要采用符合該菌劑的防治方法和設(shè)備。 該成果旨在防治線蟲的同時(shí)減少對農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境的污染問題。相比市面上的化學(xué)藥劑，該成果研發(fā)的微生物制劑具有高效、高產(chǎn)、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，將在蔬菜，作為的病原線蟲防治方面具有廣闊市場前景。 轉(zhuǎn)化條件：需要中試實(shí)驗(yàn)的資金，中試實(shí)驗(yàn)場地和設(shè)備，大棚實(shí)驗(yàn)條件。 成果完成時(shí)間：2014年12月

針對化妝品活性成分中一些易氧化、失活，或難以透皮吸收的原料（如輔酶、白藜蘆醇、維生素、茶多酚等），構(gòu)建脂質(zhì)體類脂質(zhì)體、固體納米脂質(zhì)粒、高分子納米顆粒等納米技術(shù)包覆，實(shí)現(xiàn)活性成分保護(hù)和經(jīng)皮輸送，更大限度的發(fā)揮活性成分的功效。針對具有刺激性強(qiáng)、易揮發(fā)、易失活等活性成分（如香原料、水楊酸、防曬劑等），構(gòu)建微膠囊、多孔顆粒、聚合物微球、無機(jī)空心微珠等包埋體系，實(shí)現(xiàn)活性成分的緩釋，達(dá)到溫和、安全、持久的功效。

目前國內(nèi)市場所使用的霍亂毒素及標(biāo)記物產(chǎn)品，基本來自進(jìn)口商業(yè)渠道，價(jià)格昂貴，純度有限。中科院武漢物數(shù)所通過有毒蛋白的高效表達(dá)技術(shù)及蛋白復(fù)性組裝機(jī)制，大批量生產(chǎn)具有生物活性的霍亂毒素，純度高，可改造成衍生物，滿足國內(nèi)生物醫(yī)藥研究需求。 產(chǎn)品優(yōu)勢如下： 1、操作簡單，普通生化實(shí)驗(yàn)室易執(zhí)行 2、產(chǎn)品純度高，產(chǎn)量大，相應(yīng)的成本低 3、可進(jìn)行神經(jīng)環(huán)路示蹤標(biāo)記用于神經(jīng)解剖學(xué)研究，也可以改造發(fā)展出多種衍生物，用于滿足國內(nèi)科研和市場需求。

項(xiàng)目成果/簡介:本發(fā)明提供茶樹咖啡堿合成酶基因啟動(dòng)子TCSP及其在制備轉(zhuǎn)基因植物中的應(yīng)用.本發(fā)明以茶樹DNA為模板,用GenomeWalking方法克隆得到茶樹TCS基因啟動(dòng)子序列,然后利用Gateway技術(shù)構(gòu)建重組植物表達(dá)載體pKGWFS7TCSP,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的煙草遺傳轉(zhuǎn)化,以表達(dá)GUS基因的方式進(jìn)行啟動(dòng)子活性功能驗(yàn)證.本發(fā)明首次從茶樹中克隆出特異性咖啡堿合成酶基因啟動(dòng)子TCSP,并驗(yàn)證了其活性,對于揭示茶樹咖啡堿合成的機(jī)理,生物調(diào)控茶樹咖啡堿的含量具有重要意義.

中國科大陳宇星教授、周叢照教授和孫林峰教授課題組合作闡明了金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）胞壁酸（WTA）翻轉(zhuǎn)酶TarGH轉(zhuǎn)運(yùn)WTA的機(jī)制和TarGH特異性抑制劑Targocil的抑制機(jī)制。該研究成果在線發(fā)表在微生物領(lǐng)域?qū)I(yè)雜志mBio上。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是主要的臨床致病菌之一，其引發(fā)的感染難以治愈甚至可能致死。由于近年來抗生素濫用，出現(xiàn)了對所有的β-內(nèi)酰胺類藥物都具有抗性的MRSA菌株。研究表明S. aureus細(xì)胞壁主要成分WTA是引起耐藥性的關(guān)鍵因素之一。在革蘭氏陽性菌中，WTA是一類共價(jià)連接在肽聚糖上的陰離子多聚物。WTA在細(xì)菌分裂、生物膜形成、宿主定殖以及細(xì)菌感染等過程中起著重要作用。因此，WTA合成路徑中的關(guān)鍵酶是新型抗菌藥物的重要靶點(diǎn)。在S. aureus中，WTA合成前體是N-乙酰葡糖胺修飾的多聚核糖醇長鏈，其通過共價(jià)鍵連接在錨定在細(xì)胞膜上的脂質(zhì)載體Und-PP上。該Und-PP連接的多聚核糖醇長鏈前體先在細(xì)胞內(nèi)完成合成，最后通過ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白TarGH翻轉(zhuǎn)出細(xì)胞膜。作為最具潛力的抗生素靶標(biāo)之一，TarGH及其抑制劑得到廣泛研究。先導(dǎo)化合物小分子Targocil是近期被鑒定出來特異性抑制TarGH效率較高的抑制劑，但是其抑制的分子機(jī)制并不清楚。為闡明TarGH轉(zhuǎn)運(yùn)WTA的機(jī)理以及Targocil的抑制機(jī)制，作者用冷凍電鏡方法，解析了金黃色葡萄球菌WTA翻轉(zhuǎn)酶TarGH的同源蛋白，來自Alicyclobacillus herbarius菌的TarGH結(jié)構(gòu)。其同源性為50%。TarGH結(jié)構(gòu)總體分辨率為3.9 ?，其核心結(jié)構(gòu)區(qū)域分辨率達(dá)到3.6?。由于未結(jié)合ATP，TarGH結(jié)構(gòu)處于開口朝向細(xì)胞內(nèi)的構(gòu)象狀態(tài)。基于結(jié)構(gòu)，作者計(jì)算出了底物轉(zhuǎn)運(yùn)通道，通過對組成通道的氨基酸殘基性質(zhì)分析并結(jié)合生理實(shí)驗(yàn)，闡明了底物特異性識別機(jī)制。通過結(jié)構(gòu)比對作者提出TarGH及其同源蛋白利用“曲柄連桿”原理來實(shí)現(xiàn)底物轉(zhuǎn)運(yùn)的分子機(jī)制。具有類似結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白都可以利用這一機(jī)制通過相對微小的總體構(gòu)象變化轉(zhuǎn)運(yùn)較大的底物。作者進(jìn)一步通過生化實(shí)驗(yàn)和計(jì)算機(jī)模擬確定了Targocil結(jié)合TarGH的精確位點(diǎn)，并闡明了其抑制TarGH轉(zhuǎn)運(yùn)胞壁酸的分子機(jī)制。

"磷脂酶 D （PLD）是一類具有水解作用和磷酰基轉(zhuǎn)移作用的酶, 在磷脂改性方面發(fā)揮著重要作用。它可以將大量磷脂酰膽堿(PC) 催化合成為自然界稀有的磷脂質(zhì)，如磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰絲氨酸(PS)和磷脂酰甘油(PG)等，合成的磷脂質(zhì)在醫(yī)藥和食品工業(yè)具有很大的應(yīng)用前景。但由于來源不足和價(jià)格高，PLD的工業(yè)應(yīng)用一直受到限制。本項(xiàng)目通過基因工程和微生物發(fā)酵技術(shù)，解決了PLD工業(yè)化應(yīng)用中難表達(dá)和表達(dá)量不足的難題，利用重組大腸桿菌發(fā)酵實(shí)現(xiàn)了PLD的高水平表達(dá)，其酶活為106 U?L-1，產(chǎn)量為748 mg?L-1，分別比目前報(bào)道的最高水平提高了100倍和20倍；同時(shí)，本項(xiàng)目還建立了一種簡單有效提取重組PLD的方法，可望大大降低PLD的生產(chǎn)成本。本技術(shù)先進(jìn)，應(yīng)用前景看好，如按106 U?L-1的發(fā)酵水平生產(chǎn)，成本約100元人民幣/1000 U，目前市場售價(jià)在3000-6000元/1000 U，利潤空間很大。 "

其他成果/n本發(fā)明屬于飼料添加劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種α-半乳糖苷酶軟膠囊飼料添加劑及其制備方法。該方法包括以下步驟：1)向磷酸鹽緩沖溶液中加入α-Gal，然后加入β-CD，再經(jīng)過均質(zhì)后靜置反應(yīng)，至反應(yīng)終點(diǎn)，得到α-Gal—β-CD添加液；2)將B型明膠加入水中，充分溶脹后加入甘油、防腐劑和二氧化鈦，混合均勻進(jìn)行膠化，得到膠料；3)灌裝。通過本發(fā)明得到的軟膠囊添加劑利用環(huán)糊精抑制劑對α-Gal的抑制作用，使動(dòng)物飼料中的α-Gal酶活，經(jīng)歷一個(gè)先低后高的過程，從而使飼料中的α-Gal在更合適的消化時(shí)期發(fā)揮催化作用。