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研發(fā)階段/n該發(fā)明屬于動(dòng)物病毒學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。利用基因工程方法和DNA重組方法將PrV的主要毒力基因TK和糖蛋白基因gI、gE編碼區(qū)刪除，導(dǎo)致PrV毒力下降，公開了一種三基因缺失的重組偽狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PrV)毒株的構(gòu)建、用該毒株制備的疫苗、構(gòu)建該毒株的方法以及制備該疫苗方法說的重組偽狂犬病毒株缺失了TK、gE、gI基因，且不含外源基因。所說的疫苗屬于含有該發(fā)明的病毒液和明膠制成的凍干活疫苗。發(fā)明的重組-突變株遺傳穩(wěn)定，不會(huì)返強(qiáng)。該發(fā)明還包括將所說的活疫苗接種于仔豬、育肥豬

本工作成果構(gòu)建了新型可離子化脂質(zhì)分子庫，可通過排列組合形成數(shù)十個(gè)新型可離子化脂質(zhì)，已掌握脂質(zhì)納米顆粒構(gòu)建的核心技術(shù)。 一、項(xiàng)目分類 關(guān)鍵核心技術(shù)突破 二、技術(shù)分析 相對(duì)傳統(tǒng)疫苗（如滅活疫苗、重組蛋白疫苗等），mRNA 疫苗具有應(yīng)變能力快、制備簡(jiǎn)單、免疫效力強(qiáng)等特點(diǎn)，在控制病毒傳染性疾病中具有至關(guān)重要的作用。脂質(zhì)納米顆粒（LNP）是介導(dǎo)mRNA在人體內(nèi)發(fā)揮功能的最優(yōu)解。Pfizer和Moderna公司構(gòu)建的LNP依然被認(rèn)為是“best-in-class”的mRNA疫苗遞送技術(shù)。其中關(guān)鍵組分雙親性可離子化脂質(zhì)的合理設(shè)計(jì)可達(dá)到mRNA有效遞送和釋放。但脂質(zhì)納米顆粒核心技術(shù)專利集中于少數(shù)國(guó)外公司如Arbutus、Moderna、CureVac和BioNtech，專利壁壘高。目前，我國(guó)沒有自主研發(fā)的高效并安全的用于人體的mRNA遞送系統(tǒng)，致使歐美可隨時(shí)限制我國(guó)的mRNA疫苗生產(chǎn)。 本工作成果構(gòu)建了新型可離子化脂質(zhì)分子庫，可通過排列組合形成數(shù)十個(gè)新型可離子化脂質(zhì)，已掌握脂質(zhì)納米顆粒構(gòu)建的核心技術(shù)。目前已成功合成并進(jìn)行活性驗(yàn)證的新型可離子化脂質(zhì)4個(gè)。其中，脂質(zhì)A1-D1-5的活性最佳，基于其制備的LNP不但成功地載荷小干擾RNA在小鼠體內(nèi)有效地治療了代謝疾病，還實(shí)現(xiàn)了高效的mRNA負(fù)載和體內(nèi)遞送。代謝疾病的治療成果發(fā)表在國(guó)際學(xué)術(shù)期刊Science Advances上，mRNA負(fù)載系統(tǒng)已經(jīng)與多家公司開展合作進(jìn)行臨床前開發(fā)工作。

本發(fā)明的目的是提供一種鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗，即采用生物技術(shù)對(duì)鴨坦布蘇病毒E蛋白進(jìn)行抗原表位分析、拼接，獲得一種鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE，并以該融合蛋白作為抗原來制備鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗。本發(fā)明中鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE，其編碼蛋白的氨基酸序列為SEQ ID NO:1；其中一種核苷酸序列為SEQ ID NO:2。本發(fā)明利用pET28a（+）表達(dá)性載體構(gòu)建了能表達(dá)鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE的大腸桿菌BL21(DE3)宿主菌。將重組表達(dá)的蛋白純化后制備成基因工程亞單位疫苗，可使免疫后鴨群獲得免疫保護(hù)。

該研究鑒定到一個(gè)新的小麥條銹菌富含甘氨酸/絲氨酸效應(yīng)子PstGSRE4，揭示其通過靶向小麥抗病相關(guān)蛋白銅鋅超氧化物歧化酶TaCZSOD2抑制植物免疫的分子機(jī)理。

該藥物來源于病原生物資源的天然多肽（血吸 蟲蛋白），具有明顯抑制IL-12產(chǎn)生、上調(diào)IL-10表達(dá)和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的生物學(xué)功能，為研制新型免疫抑制 劑提供了一種新的先導(dǎo)分子，進(jìn)一步的發(fā)展研究將具有良好的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。

該項(xiàng)目采用稀土離子示蹤的時(shí)間分辨熒光免疫分析技術(shù)（TRFIA）進(jìn)行食品中痕量污染物的高靈敏免疫分析試劑的應(yīng)用研究。建立了黃曲霉毒素 B1（AFB1）、赭曲霉毒素 A（OTA）、藍(lán)藻毒素（MC）、瘦肉精（CBL）、氯霉素（CAP）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、河豚毒素（TTX）、伏馬毒素（FB1）、T-2 毒素、氯丙嗪(CPZ)、地西泮（DIA）等食品安全系列的高靈敏 TRFIA 檢測(cè)方法。組建檢測(cè)食品中獸藥、生 物毒素等痕量有害物的高靈敏系列 TRFIA 試劑盒，項(xiàng)目產(chǎn)品申請(qǐng)專利 14 項(xiàng)，該項(xiàng)目的研究相當(dāng)于國(guó)內(nèi)外同類研究工作的先進(jìn)水平，應(yīng)用成本可降低至進(jìn)口試劑的一半以下。 

本發(fā)明的目的在于提供一種以菊粉為主配方，配以能提高機(jī)體免疫力的刺梨根提取物，優(yōu)良的活性保護(hù)劑，能促進(jìn)消化吸收的玫瑰提取物，制備成家禽用飼料添加劑，以提高機(jī)體免疫力，增強(qiáng)消化吸收能力。飼料成本低廉，易獲得，具有很好的市場(chǎng)前景。

成果獲國(guó)家發(fā)明專利授權(quán)，具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)。該發(fā)明涉及一種具有抗衰老、免疫調(diào)節(jié)功能的保健食品的新用途及其制備方法。它是以雄蠶蛾、肉蓯蓉、枸杞為原料，經(jīng)回流、噴霧干燥等技術(shù)制得膠囊。具有配方獨(dú)特、有效組分提取率高、功能顯著、無明顯毒副作用、服用劑量小、吸收迅速等創(chuàng)新性和先進(jìn)性；是集抗衰老、免疫調(diào)節(jié)功能于一身的強(qiáng)身健體、可長(zhǎng)期食用的功能性保健食品。適宜制成膠囊和沖劑服用。

項(xiàng)目背景：T 調(diào)控細(xì)胞（Treg 細(xì)胞）可以提升人體免疫耐受 能力，臨床可用于治療自身免疫病以及免疫排斥，但是人體內(nèi) Treg 細(xì)胞比例低，很難達(dá)到治療免疫疾病的水平。干細(xì)胞可以 誘導(dǎo) CD4+T 細(xì)胞高效率地轉(zhuǎn)化成 Treg 細(xì)胞，企業(yè)目前掌握干細(xì) 胞制備到臨床應(yīng)用全部核心技術(shù)，但缺乏利用干細(xì)胞誘導(dǎo)制備 Treg 細(xì)胞完整的技術(shù)體系。企業(yè)目前雖擁有 B+A 級(jí)潔凈實(shí)驗(yàn)室， 不具備動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)環(huán)境，此外開展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需涉及實(shí)驗(yàn) 動(dòng)物的需要相應(yīng)的許可證；臨床試驗(yàn)需由研究者發(fā)起并經(jīng)研究單 位倫理審批。企業(yè)迫切需要與在細(xì)胞免疫領(lǐng)域里具有先進(jìn)技術(shù)和 較高學(xué)術(shù)聲譽(yù)的科研團(tuán)隊(duì)合作，建立和完善間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo) CD4+T 細(xì)胞高效率轉(zhuǎn)化成 Treg 細(xì)胞的技術(shù)和技術(shù)體系，并利用 動(dòng)物模型證明該體外誘導(dǎo)制備的 Treg 細(xì)胞同樣具有壓制免疫反 應(yīng)、恢復(fù)免疫平衡、維護(hù)免疫耐受的能力，從而具有明顯的治療 效果，最后在此基礎(chǔ)上開展臨床初實(shí)驗(yàn)。 所需技術(shù)需求簡(jiǎn)要描述：1.如何提取純化 Treg 細(xì)胞。2.如 何在體外進(jìn)行高效制備和擴(kuò)增 Treg 細(xì)胞。3.制備擴(kuò)增后 Treg 細(xì) 胞活性驗(yàn)證。4.Treg 細(xì)胞在臨床如何應(yīng)用。  對(duì)技術(shù)提供方的要求:具有長(zhǎng)期免疫、干細(xì)胞和自我免疫病的研究基礎(chǔ)，在國(guó)內(nèi)外具有良好的學(xué)術(shù)地位和學(xué)術(shù)聲譽(yù)，設(shè)備先 進(jìn)。尤其在 T 調(diào)控細(xì)胞的臨床應(yīng)用方面在國(guó)內(nèi)外具有先進(jìn)地位， 課題組應(yīng)具備開創(chuàng)精神和創(chuàng)新能力。 

本發(fā)明涉及一種利用噬菌體PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因轉(zhuǎn)化制備鴨疫里默氏菌前菌影疫苗的方法與應(yīng)用方法。該方案首先將噬菌體PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因通過柔性連接臂(Gly4Ser)3連接成串聯(lián)基因，并進(jìn)一步構(gòu)建溫控表達(dá)載體pBV-E-SN。將pBV-E-SN電擊轉(zhuǎn)化進(jìn)入鴨疫里默氏菌原生質(zhì)體，篩選陽性克隆28℃增菌培養(yǎng)。分離菌體加保護(hù)劑后分裝、冷凍干燥。本發(fā)明所制備的活菌疫苗經(jīng)飲水免疫，既可以刺激呼吸道和消化道黏膜的局部免疫，也可以激發(fā)體液免疫。