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對MxA蛋白進(jìn)行了多種修飾改造，經(jīng)過不斷探索嘗試后成功獲得了功能基本不受影響的MxA蛋白單體，并利用X射線晶體衍射技術(shù)解析了單體MxA晶體結(jié)構(gòu)。此后，高嵩課題組與中科院生物物理所趙永芳教授課題組合作，根據(jù)結(jié)構(gòu)巧妙設(shè)計(jì)了一系列單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)，最終通過這種技術(shù)含量極高的生物物理技術(shù)在單分子水平上揭示了MxA蛋白在GTP水解過程中實(shí)時的構(gòu)象變化情況。該研究闡明了MxA蛋白在抗病毒作用過程中結(jié)構(gòu)改變的動態(tài)過程，有助于全面了解MxA抗病毒的具體分子機(jī)制，并對人們了解其他dynamin家族成員的具體作用方式有重要的啟發(fā)意義。

產(chǎn)品詳細(xì)介紹蛋白質(zhì)細(xì)胞乳品離心機(jī)性能特點(diǎn)：1、微機(jī)控制，觸摸面板，LCD/LED雙顯示。2、采用交流變頻電機(jī)，全封閉風(fēng)冷谷輪壓縮機(jī)組，無氟制冷劑。3、可直接設(shè)定轉(zhuǎn)速，自動計(jì)算RCF值?？芍苯釉O(shè)定RCF值，自動轉(zhuǎn)換成轉(zhuǎn)速。4、具有10檔升降速。5、運(yùn)行中可修改參數(shù)，運(yùn)行參數(shù)自動記憶。6、具有40種自定義程序存儲功能。7、具有軟剎車功能。8、具有轉(zhuǎn)子號識別功能。9、具有超溫、超速、不平衡和門蓋安全保護(hù)功能，并在顯示窗口顯示故障信息和聲音報(bào)警。    蛋白質(zhì)細(xì)胞乳品離心機(jī)技術(shù)參數(shù)：型號名稱： Happy-TL21高速大容量冷凍離心機(jī)顯示方式： LCD/LED雙顯示最高轉(zhuǎn)速： 21000rpm轉(zhuǎn)速精度： ±30rpm最大相對離心力： 30700×g最大容量： 4×750mL控溫范圍： －20～40℃控溫精度： ±1℃定時范圍： 0～99h59min59s電機(jī)： 交流變頻制冷系統(tǒng)： 全封閉風(fēng)冷谷輪壓縮機(jī)組，無氟制冷劑門鎖： 電子門鎖噪音： ≤60dB電源： AC220V，50Hz，2.5kW，25A內(nèi)膽材質(zhì)： 不銹鋼箱體材質(zhì)： 優(yōu)質(zhì)鋼板外形尺寸： 800×700×400mm重量： 110kg    蛋白質(zhì)細(xì)胞乳品離心機(jī)轉(zhuǎn)子：NO.1角轉(zhuǎn)子： 21000rpm，30700×g，18×0.5mL，航空鋁材質(zhì)NO.2角轉(zhuǎn)子： 21000rpm，30700×g，12×2.2/1.5mL，航空鋁材質(zhì)NO.3角轉(zhuǎn)子： 16000rpm，23550×g，48×0.5mL，航空鋁材質(zhì)NO.4角轉(zhuǎn)子： 16000rpm，23550×g，24×2.2/1.5mL，航空鋁材質(zhì)NO.5角轉(zhuǎn)子： 16000rpm，17420×g，10×5mL，航空鋁材質(zhì)NO.6角轉(zhuǎn)子： 15000rpm，24300×g，32×2.2/1.5mL，航空鋁材質(zhì)NO.7角轉(zhuǎn)子： 15000rpm，23120×g，12×10mL，航空鋁材質(zhì)NO.8角轉(zhuǎn)子： 14000rpm，20150×g，6×50mL，航空鋁材質(zhì)NO.9角轉(zhuǎn)子： 14000rpm，21940×g，4×100mL，航空鋁材質(zhì)NO.10角轉(zhuǎn)子： 12000rpm，13200×g，12×15mL，航空鋁材質(zhì)NO.11角轉(zhuǎn)子： 9000rpm，10500×g，24×10mL，航空鋁材質(zhì)NO.12水平轉(zhuǎn)子： 5000rpm，4390×g，4×50mL，不銹鋼材質(zhì)NO.12.1管架： 5000rpm，4390×g，4×100mL，不銹鋼材質(zhì)NO.12.2管架： 4000rpm，3500×g，4×8×10mL，不銹鋼材質(zhì)NO.12.3管架： 4000rpm，3500×g，4×8×15mL，不銹鋼材質(zhì)NO.12.4管架： 4000rpm，3500×g，4×2×50mL，不銹鋼材質(zhì)NO.12.5管架： 4000rpm，3500×g，4×2×100mL，不銹鋼材質(zhì)NO.13水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，3500×g，4×250mL，鋼、航空鋁材質(zhì)NO.13.1適配器： 4000rpm，3500×g，4×8×10mL，尼龍材質(zhì)NO.13.2適配器： 4000rpm，3500×g，4×8×15mL，尼龍材質(zhì)NO.13.3適配器： 4000rpm，3500×g，4×2×50mL，尼龍材質(zhì)NO.13.4適配器： 4000rpm，3500×g，4×100mL，尼龍材質(zhì)NO.14水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，3580×g，4×500mL，鋼、航空鋁材質(zhì)NO.14.1適配器： 4000rpm，3580×g，4×12×10mL，尼龍材質(zhì)NO.14.2適配器： 4000rpm，3580×g，4×8×15mL，尼龍材質(zhì)NO.14.3適配器： 4000rpm，3580×g，4×4×50mL，尼龍材質(zhì)NO.14.4適配器： 4000rpm，3580×g，4×2×100mL，尼龍材質(zhì)NO.14.5適配器： 4000rpm，3580×g，4×250mL，尼龍材質(zhì)NO.15水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，3580×g，4×750mL，鋼、航空鋁材質(zhì)NO.16水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，2800×g，4×12×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.17水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，2800×g，4×18×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.18水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，2800×g，4×24×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.19水平轉(zhuǎn)子（自動脫帽）： 4000rpm，3500×g，4×12×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.20水平轉(zhuǎn)子（自動脫帽）： 4000rpm，3500×g，4×18×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.21水平轉(zhuǎn)子（自動脫帽）： 4000rpm，3580×g，4×24×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.22水平酶標(biāo)板轉(zhuǎn)子： 4000rpm，2300×g，2×2×48孔，鋼、不銹鋼材質(zhì)NO.23水平酶標(biāo)板轉(zhuǎn)子： 4000rpm，2300×g，2×2×96孔，鋼、不銹鋼材質(zhì)    想了解更多信息，請進(jìn)入http://www.fudizao.com    

RNA病毒一直給人類健康帶來巨大威脅。分節(jié)段負(fù)鏈RNA病毒（sNSV）通過自身攜帶的RNA聚合酶搶奪宿主細(xì)胞mRNA的5’端帽子結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄為病毒mRNA，合成的病毒mRNA是由宿主基因和病毒基因組成的嵌合mRNA。此過程被稱為“Cap-snatching”，是sNSV復(fù)制周期中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。 一直以來，人們認(rèn)為：病毒mRNA翻譯的蛋白只包含病毒基因的開放閱讀框（ORF），宿主來源的mRNA序列的作用是其5’端帽子結(jié)構(gòu)可供宿主細(xì)胞翻譯體系識別，其他宿主源遺傳信息沒有合成病毒蛋白的功能。 該研究揭示了病毒編碼蛋白的新機(jī)制。 研究發(fā)現(xiàn)，病毒搶奪過來的宿主源mRNA片段，不僅起到5’端帽子結(jié)構(gòu)的作用，而且這些宿主源mRNA片段包括起始密碼子（AUG），宿主細(xì)胞可以從宿主的AUG開始翻譯，編碼兩類宿主與病毒的嵌合蛋白。若宿主源AUG與原有病毒蛋白ORF在同一讀碼框中（in-frame），產(chǎn)生的蛋白為 N 端延長的宿主與病毒嵌合蛋白； 若宿主源AUG與原有病毒蛋白ORF不在同一讀碼框中（off-frame），產(chǎn)生的蛋白為新型的嵌合蛋白（Novel host-virus encoded proteins）。 進(jìn)一步研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：流感病毒感染細(xì)胞后可以產(chǎn)生上述兩類嵌合蛋白，這些嵌合蛋白可以誘導(dǎo)T細(xì)胞反應(yīng)，并且與病毒的毒力相關(guān)。該研究提示，這種新的病毒蛋白編碼機(jī)制可能不僅僅局限于流感病毒，在其他人類病毒、動物病毒和植物病毒中也廣泛存在這種宿主與病毒嵌合蛋白的編碼機(jī)制。 本研究是由美國紐約西奈山伊坎醫(yī)學(xué)院（Icahn School of Medicine at Mount Sinai）牽頭，多國科研工作者共同合作完成。

本發(fā)明提供了一種單鏈片段抗體-多肽融合蛋白及其應(yīng)用,該蛋白是一種具有結(jié)合 Her2受體和攜帶抗癌siRNA藥物雙向功能的融合蛋白,可以作為抗癌siRNA的藥物 載體。其中,單鏈片段抗體為Her2-ScFv,多肽為魚精蛋白片段多肽。該單鏈片段抗 體-多肽融合蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示的序列。本發(fā)明構(gòu)建的Her2單鏈片段抗 體與魚精多肽的融合蛋白具有結(jié)合Her2受體和攜帶抗癌siRNA藥物的雙向功能。本 發(fā)明的融合蛋白能把抗癌siRNA藥物定向?qū)肽繕?biāo)癌細(xì)胞中,開發(fā)了非病毒載體工 具,加速RNAi技術(shù)應(yīng)用于臨床。

項(xiàng)目成果/簡介:本發(fā)明提供了一種單鏈片段抗體-多肽融合蛋白及其應(yīng)用,該蛋白是一種具有結(jié)合 Her2受體和攜帶抗癌siRNA藥物雙向功能的融合蛋白,可以作為抗癌siRNA的藥物 載體。其中,單鏈片段抗體為Her2-ScFv,多肽為魚精蛋白片段多肽。該單鏈片段抗 體-多肽融合蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示的序列。本發(fā)明構(gòu)建的Her2單鏈片段抗 體與魚精多肽的融合蛋白具有結(jié)合Her2受體和攜帶抗癌siRNA藥物的雙向功能。本 發(fā)明的融合蛋白能把抗癌siRNA藥物定向?qū)肽繕?biāo)癌細(xì)胞中,開發(fā)了非病毒載體工 具,加速RNAi技術(shù)應(yīng)用于臨床。項(xiàng)目階段:成果已轉(zhuǎn)化

本發(fā)明涉及一種TNFSF15可溶性蛋白的純化方法，包括如下步驟：(1).IPTG誘導(dǎo)、(2).菌體裂解、(3).上柱洗脫、(4).除鹽分裝。本發(fā)明純化方案通過低溫誘導(dǎo)的方式，并且以很低的IPTG誘導(dǎo)濃度，降低蛋白在包涵體中的表達(dá)，提升可溶性蛋白的含量，并用較為溫和的裂解純化方式，提高蛋白的穩(wěn)定性和活性。并且操作簡便，制作周期短，消耗資源少，方便放大生產(chǎn)。

南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院吳益東教授團(tuán)隊(duì)在Bt殺蟲機(jī)制研究方面取得重要進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)了Bt殺蟲蛋白對棉鈴蟲的一種新型“雙通道”殺蟲機(jī)制。 吳益東教授團(tuán)隊(duì)的最新研究發(fā)現(xiàn)，棉鈴蟲ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ABCC2和ABCC3均為Bt受體，用CRISPR基因編輯技術(shù)分別敲除這兩個基因，不能獲得Bt抗性；而同時敲除這兩個基因后獲得了超過1.5萬倍的極高水平抗性。這意味著，同時敲除這兩個基因會使Bt毒素對棉鈴蟲的進(jìn)攻完全失效。 吳益東解釋，ABCC2和ABCC3是一對結(jié)構(gòu)高度相似、功能相互重疊的Bt受體，Bt毒素在尋找受體發(fā)起攻勢時，相當(dāng)于獲取了深入敵營的“雙重通道”。因此，棉鈴蟲缺失ABCC2和ABCC3中的任何一個受體均不影響B(tài)t的殺蟲效果，從而限制了棉鈴蟲在ABCC2和ABCC3通路上的抗性進(jìn)化能力。 棉鈴蟲和Bt毒素的攻防之間，存在著相互適應(yīng)、協(xié)同進(jìn)化的復(fù)雜關(guān)系。在Bt毒素對棉鈴蟲“雙通道”殺蟲機(jī)制的壓制下，棉鈴蟲可以避其鋒芒，在Bt毒素進(jìn)攻薄弱環(huán)節(jié)進(jìn)化出新的抗性機(jī)制。在吳益東教授團(tuán)隊(duì)的前期研究中，發(fā)現(xiàn)了棉鈴蟲為削弱Bt殺蟲能力進(jìn)化出的2種抗性機(jī)制：一種是棉鈴蟲Bt受體HaCad（一種鈣粘蛋白）通過基因缺失突變，另一種是四跨膜蛋白TSPAN1通過L31S點(diǎn)突變，在這兩種情況下，棉鈴蟲通過喪失HaCad的受體功能或增強(qiáng)腸道修復(fù)能力，使Bt抗性顯著增強(qiáng)。 團(tuán)隊(duì)的研究還發(fā)現(xiàn)，我國棉鈴蟲田間抗性個體攜帶的抗性基因在2010年前以HaCad突變?yōu)橹鳎?013年后以TSPAN1點(diǎn)突變?yōu)橹?，尚未在田間檢測到ABCC2和ABCC3突變，其中原因，可能正是這次的研究所揭示的，是ABCC2和ABCC3這一對功能冗余的受體為Bt毒素的進(jìn)攻提供了相互并聯(lián)的“雙通道”，因此捆住了棉鈴蟲利用這一對受體發(fā)生變異而逃逸攻擊的“手腳”。

我校萬建民院士團(tuán)隊(duì)在植物學(xué)權(quán)威刊物《The Plant Cell》在線出版了題為“GPA5encodes a Rab5a effector required for post-Golgi trafficking of rice storageproteins”的研究成果。 萬建民院士團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)了一個新的谷蛋白后高爾基體分選缺陷突變體gpa5，通過圖位克隆的方法證實(shí)GPA5編碼一個具有磷脂結(jié)合能力的植物特有調(diào)控因子。在胚乳細(xì)胞中，GPA5特異分布在致密囊泡外圍。亞細(xì)胞定位分析證實(shí)GPA5的膜定位依賴于前期鑒定的GPA1/Rab5a和GPA2/VPS9a。生化分析進(jìn)一步證實(shí)GPA5可特異與GPA1/Rab5a的激活態(tài)形式互作，表明GPA5可能是GPA1/Rab5a的效應(yīng)子（effector）。后續(xù)的功能研究發(fā)現(xiàn)，GPA5可與栓系復(fù)合體CORVET和含有VAMP727的膜融合復(fù)合體SNARE互作，介導(dǎo)致密囊泡與蛋白貯藏液泡的膜融合，以完成谷蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)。 萬建民院士團(tuán)隊(duì)以解析水稻谷蛋白合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和沉積的分子網(wǎng)絡(luò)途徑為目標(biāo)，長期致力于稻米蛋白品質(zhì)改良的分子遺傳基礎(chǔ)研究。本研究是該團(tuán)隊(duì)在《植物細(xì)胞（The Plant Cell）》和《分子植物（Molecular Plant）》等雜志相繼報(bào)道GPA1/Rab5a, GPA2/VPS9a,GPA3和GPA4/Got1B調(diào)控谷蛋白分選后，在稻米蛋白品質(zhì)形成的分子機(jī)理研究中取得的又一重要進(jìn)展，進(jìn)一步豐富了人們對谷蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)分子網(wǎng)絡(luò)途徑的認(rèn)識，為稻米蛋白品質(zhì)的改良奠定了理論基礎(chǔ)。

西湖大學(xué)周強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室利用冷凍電鏡技術(shù)成功解析此次新冠病毒的受體——ACE2的全長結(jié)構(gòu)。這是世界上首次解析出ACE2的全長結(jié)構(gòu)。相關(guān)研究內(nèi)容于北京時間2月19日凌晨3點(diǎn)左右在預(yù)印版平臺bioRxiv上線。這也是西湖大學(xué)承擔(dān)的浙江省新型冠狀病毒肺炎防治應(yīng)急科研攻關(guān)任務(wù)的重要成果。 新型冠狀病毒感染引發(fā)的肺炎疫情爆發(fā)后，武漢病毒研究所的科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，新型冠狀病毒和2003年的SARS病毒一樣，也是通過識別ACE2蛋白進(jìn)入人體細(xì)胞的，ACE2是“新冠病毒”侵入人體的關(guān)鍵。研究發(fā)現(xiàn)，在SARS病毒和“新冠病毒”侵入人體的過程中，ACE2就像是“門把手”，病毒抓住它，從而打開了進(jìn)入細(xì)胞的大門。 周強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室針對這個問題進(jìn)行了攻堅(jiān)。第一步，他們要獲取ACE2蛋白全長蛋白，但作為膜蛋白的ACE2本身很難在體外穩(wěn)定獲得。周強(qiáng)及博士后鄢仁鴻在文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)ACE2與腸道內(nèi)的一個氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白B0AT1能夠形成復(fù)合物。根據(jù)他們過去的研究經(jīng)驗(yàn)，這個復(fù)合物極有可能穩(wěn)定住ACE2。果然，他們通過共表達(dá)的方法獲得了ACE2與B0AT1優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的復(fù)合物，并利用西湖大學(xué)的冷凍電鏡平臺成功解析了其三維結(jié)構(gòu)，分辨率達(dá)到2.9埃，對于病毒識別至關(guān)重要的胞外結(jié)構(gòu)域分辨率為2.7埃。通過分析ACE2的全長蛋白結(jié)構(gòu)，周強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)ACE2以二聚體形式存在，同時具有開放和關(guān)閉兩種構(gòu)象變化，但兩種構(gòu)象均含有與冠狀病毒的相互識別界面。一研究發(fā)現(xiàn)為進(jìn)一步解析全長ACE2和新冠病毒的S蛋白復(fù)合物的三維結(jié)構(gòu)奠定了基礎(chǔ)。

本發(fā)明公開了一種蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP3編碼的核酸序列，所分離出的DNA分子包括：編碼具有蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP3活性的多肽核苷酸序列，該核苷酸序列與SEQ？ID？NO：1中從核苷酸第767-871位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者該核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ？ID？NO：1中從核苷酸第767-871位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明還同時公開了一種蝶蛹金小蜂抗菌蛋白多肽Pp-AP3，其具有SEQ？ID？NO：2所示的氨基酸序列。本發(fā)明的蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP3具有抗菌性能。