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本發明公開了一種蔗糖合成酶在調控植物果實發育中的應用。本發明提供了一種培育轉基因植物的方法，是將蔗糖合成酶的編碼基因導入目的植物中，得到轉基因植物；所述轉基因植物果實產量大于所述目的植物。所述蔗糖合成酶的編碼基因具體可為蔗糖合成酶基因CsSus4。本發明發現了蔗糖合成酶基因CsSus4在黃瓜果實發育過程中發揮著的關鍵性作用，可以調節庫強從而促進果實的

團隊發現了一種結瘤因子水解酶 （MtNFH1），它雖然缺乏幾丁質酶活性，但是能夠特異地水解來自苜蓿中華根瘤菌中的結瘤因子，表明了MtNFH1對于結瘤因子具有更高的偏好性。在這篇文章中，Staehelin教授團隊研究了結瘤因子水解酶（MtNFH1）在共生中的作用。研究發現，當接種苜蓿中華根瘤菌時，結瘤因子水解酶積聚在侵染腔中表達。截形苜蓿結瘤因子水解酶突變體研究發現，在突變體中根瘤菌入侵呈現延遲的現象，說明過量的結瘤因子會抑制侵染線的形成。結瘤實驗研究發現，突變體早期根瘤呈現根瘤肥大和分支狀（二分體或掌狀-珊瑚狀）。同時，根瘤的分支狀表型也分別出現在結瘤因子水解酶過表達植株和野生型植物接種結瘤因子過表達菌株中。因此，結瘤因子水解酶對于結瘤因子濃度的精準調控是根瘤菌入侵根毛以及成熟根瘤形態發生所必需的。

1.痛點問題 盡管目前已有一系列臨床治療手段，但癌癥仍然是人類健康與生命安全的最主要威脅之一，大多數癌癥仍然有巨大的未滿足醫療需求。抗腫瘤藥物的研發依賴于靶點分子的鑒定。因此，依托于新的抑癌靶點，開發全新的抗腫瘤靶向藥，是當前創新藥研發的前沿。現有藥物靶點主要是蛋白編碼基因，所開發藥物以靶向蛋白質的抗體藥、小分子化合物藥為主。 長非編碼RNA（lncRNA）是近年來發現的一類不編碼蛋白質的RNA分子，具有組織特異性強，功能復雜，種類數量大等特征。研究發現多個lncRNA與各種生物學過程相關，但是大多數lncRNA的生物學功能仍然未知。學術界已發現多個與腫瘤發生發展相關的lncRNA，但目前尚沒有靶向lncRNA的抗腫瘤藥物上市或在臨床試驗中。鑒于lncRNA復雜、多樣化、特異性的生物學功能特征，這一大類分子有望成為新的疾病治療靶點庫。與已知的蛋白靶點相比，lncRNA研究少，易于獲得原創、高價值的靶點專利。這要求基礎研發工作在特定生理或疾病狀態下，從成千上萬的lncRNA中準確鑒定具有核心、基礎生物學意義的lncRNA，并詳細解析其細胞功能與分子機制，確定其作為疾病治療靶點的可行性與科學基礎。 2.解決方案 在此前的研究中，本項目組以腫瘤體系為研究對象，開發了基于信息論的多組學數據挖掘與lncRNA功能預測方法流程。在多種癌癥中鑒定了具有核心生物學功能的lncRNA。例如，首次發現一個此前從未被研究過的lncRNA對于肝癌腫瘤細胞等高增殖率細胞的核仁結構及功能至關重要。研究證明該lncRNA在腫瘤中特異性地高表達，并且對于腫瘤細胞的快速增殖不可或缺，因此項目提出以該lncRNA作為腫瘤治療靶點，開發抗腫瘤小核酸藥或小分子化學藥，控制肝癌發展。 項目技術核心是在腫瘤體系中鑒定重要lncRNA的技術流程，預期產品是針對一系列lncRNA新靶點的靶向藥物。 3.合作需求 1)資金需求：針對新靶點lncRNA的小核酸藥臨床前研發需要的資金投入，在IND申報前需約2500-5000萬元人民幣； 2)孵化資源：公司研發所需辦公及研發場地、實驗室、計算服務器、分析與測試公共實驗室等； 3)團隊：生物醫藥科技公司管理團隊、核酸藥臨床前研發團隊、商務開發與合作團隊、財務、法務等支持團隊； 4)CRO公司合作：小核酸序列大規模合成、敲低效率驗證、動物模型、藥物毒理、藥代動力學、免疫原性等指標測試； 5)大型醫藥公司合作：商討未來技術轉讓方案，利用大型醫藥公司臨床開發資源，開展臨床研發合作； 6)藥物遞送平臺合作：針對小核酸藥靶向遞送需求，開展不同遞送工具的合作開發； 7)臨床醫院合作：針對臨床治療需求，開展小規模IIT臨床試驗，準備IND申報； 8)基礎研究合作：與lncRNA研究領域內國內外基礎研究團隊合作，開發新的lncRNA靶點。

本發明公開了一種可以同時檢測奶牛是否具有脊椎畸形綜合癥(CVM)、白細胞粘附缺陷癥(BLAD)、尿苷酸合酶缺乏癥(DUMPS)、瓜氨酸血癥(CN)四種遺傳病的引物系統。基于該引物系統所制備的產品，能實現同時對奶牛CVM、BLAD、DUMPS、CN四種遺傳病基因相關的4處多態性位點進行檢測。此外，本發明還公開了能夠同時聯合檢測以上遺傳病和奶牛A2基因型的檢測方法及其檢測產品，該聯合檢測的結果可用于指導健康奶牛的篩選、育種等。

項目成果/簡介:本發明提供茶樹咖啡堿合成酶基因啟動子TCSP及其在制備轉基因植物中的應用.本發明以茶樹DNA為模板,用GenomeWalking方法克隆得到茶樹TCS基因啟動子序列,然后利用Gateway技術構建重組植物表達載體pKGWFS7TCSP,采用農桿菌介導的煙草遺傳轉化,以表達GUS基因的方式進行啟動子活性功能驗證.本發明首次從茶樹中克隆出特異性咖啡堿合成酶基因啟動子TCSP,并驗證了其活性,對于揭示茶樹咖啡堿合成的機理,生物調控茶樹咖啡堿的含量具有重要意義.

中國科大陳宇星教授、周叢照教授和孫林峰教授課題組合作闡明了金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）胞壁酸（WTA）翻轉酶TarGH轉運WTA的機制和TarGH特異性抑制劑Targocil的抑制機制。該研究成果在線發表在微生物領域專業雜志mBio上。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是主要的臨床致病菌之一，其引發的感染難以治愈甚至可能致死。由于近年來抗生素濫用，出現了對所有的β-內酰胺類藥物都具有抗性的MRSA菌株。研究表明S. aureus細胞壁主要成分WTA是引起耐藥性的關鍵因素之一。在革蘭氏陽性菌中，WTA是一類共價連接在肽聚糖上的陰離子多聚物。WTA在細菌分裂、生物膜形成、宿主定殖以及細菌感染等過程中起著重要作用。因此，WTA合成路徑中的關鍵酶是新型抗菌藥物的重要靶點。在S. aureus中，WTA合成前體是N-乙酰葡糖胺修飾的多聚核糖醇長鏈，其通過共價鍵連接在錨定在細胞膜上的脂質載體Und-PP上。該Und-PP連接的多聚核糖醇長鏈前體先在細胞內完成合成，最后通過ABC轉運蛋白TarGH翻轉出細胞膜。作為最具潛力的抗生素靶標之一，TarGH及其抑制劑得到廣泛研究。先導化合物小分子Targocil是近期被鑒定出來特異性抑制TarGH效率較高的抑制劑，但是其抑制的分子機制并不清楚。為闡明TarGH轉運WTA的機理以及Targocil的抑制機制，作者用冷凍電鏡方法，解析了金黃色葡萄球菌WTA翻轉酶TarGH的同源蛋白，來自Alicyclobacillus herbarius菌的TarGH結構。其同源性為50%。TarGH結構總體分辨率為3.9 ?，其核心結構區域分辨率達到3.6?。由于未結合ATP，TarGH結構處于開口朝向細胞內的構象狀態。基于結構，作者計算出了底物轉運通道，通過對組成通道的氨基酸殘基性質分析并結合生理實驗，闡明了底物特異性識別機制。通過結構比對作者提出TarGH及其同源蛋白利用“曲柄連桿”原理來實現底物轉運的分子機制。具有類似結構特點的ABC轉運蛋白都可以利用這一機制通過相對微小的總體構象變化轉運較大的底物。作者進一步通過生化實驗和計算機模擬確定了Targocil結合TarGH的精確位點，并闡明了其抑制TarGH轉運胞壁酸的分子機制。

"磷脂酶 D （PLD）是一類具有水解作用和磷酰基轉移作用的酶, 在磷脂改性方面發揮著重要作用。它可以將大量磷脂酰膽堿(PC) 催化合成為自然界稀有的磷脂質，如磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰絲氨酸(PS)和磷脂酰甘油(PG)等，合成的磷脂質在醫藥和食品工業具有很大的應用前景。但由于來源不足和價格高，PLD的工業應用一直受到限制。本項目通過基因工程和微生物發酵技術，解決了PLD工業化應用中難表達和表達量不足的難題，利用重組大腸桿菌發酵實現了PLD的高水平表達，其酶活為106 U?L-1，產量為748 mg?L-1，分別比目前報道的最高水平提高了100倍和20倍；同時，本項目還建立了一種簡單有效提取重組PLD的方法，可望大大降低PLD的生產成本。本技術先進，應用前景看好，如按106 U?L-1的發酵水平生產，成本約100元人民幣/1000 U，目前市場售價在3000-6000元/1000 U，利潤空間很大。 "

其他成果/n本發明屬于飼料添加劑技術領域，具體涉及一種α-半乳糖苷酶軟膠囊飼料添加劑及其制備方法。該方法包括以下步驟：1)向磷酸鹽緩沖溶液中加入α-Gal，然后加入β-CD，再經過均質后靜置反應，至反應終點，得到α-Gal—β-CD添加液；2)將B型明膠加入水中，充分溶脹后加入甘油、防腐劑和二氧化鈦，混合均勻進行膠化，得到膠料；3)灌裝。通過本發明得到的軟膠囊添加劑利用環糊精抑制劑對α-Gal的抑制作用，使動物飼料中的α-Gal酶活，經歷一個先低后高的過程，從而使飼料中的α-Gal在更合適的消化時期發揮催化作用。

本技術采用花生殼、小麥麩皮、大豆皮等農副產物為原料制備 納米纖維素。首次采用生物酶結合超聲波技術以農副產品為原材料制備納米級 膳食纖維，克服了目前酸法制備納米級膳食纖維污染重、周期長等缺點，建立 了一種高效、綠色、環保制備納米級膳食纖維的新方法；首次開發出納米級膳 食纖維及高纖維食品：包括面制品、淀粉制品、肉制品及功能性飲料制品等， 拓展了納米級膳食纖維的應用范圍。本項目所開發的納米級膳食纖維功能性食 品，兼具優良口感與保健功效，具有良好的市場前景，對建設資源節約型和環 境友好型社會具有重要的促進作用。 生產條件及經濟效益預測：納米膳食纖維素的初步市場估價為 15 萬元/噸。 項目投產后，年加工量 2000 噸的農副產物生產線，估算投資額為 8000 萬，可 產生經濟效益 2.55 億元，實現利稅 1.2 萬元。年加工量 1000 噸的農副產物生 產線，估算投資額為 4000 萬，可產生經濟效益 1.275 億元，實現利稅 8400 萬 元；年加工量 500 噸的農副產物生產線，估算投資額為 2000 萬，可產生經濟效 益 6375 萬元，實現利稅 3200 萬元。

我國是世界上第一造紙大國，紙和紙板產量已超過全球總產量的25%。但我國木材資源匱乏，充分利用速生闊葉材資源、采用高效清潔制漿造紙技術是從根本上解決我國造紙工業面臨的資源與環境問題的有效途徑。陳嘉川教授領銜的科研團隊在973計劃和國家科技支撐計劃等資助下，歷經10余年，自主研究開發了酶促磨漿技術、酶促消潛技術、酶助漂白技術、酶精制紙漿技術等一系列制漿造紙酶催化綠色新技術，在降低磨漿能耗、消除有毒物污染、提升紙漿品質、改善抄造性能和研發高檔紙基新材料等方面取得了突破，實現了國產木材資源的高效高值化利用。 先后在世界造紙十強企業山東晨鳴紙業集團和國內龍頭企業山東太陽紙業股份有限公司等20余家骨干企業推廣應用，用生物酶催化技術生產出了優質木漿，并用于高級紙基材料的生產，實現了速生闊葉材的高效高值化利用，并產生了重大的經濟效益和社會效益。過2012-2014三年時間累計實現新增銷售額130.1億元，利潤25.6億元。