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本成果總體達到同類研究的國際先進水平，在獸醫微生物菌毒種資源規范性描述方 面處于國際領先水平，在獸醫微生物菌毒種資源的篩選和創新性應用等方面處于國際先 進水平。本成果于2009年獲得成果鑒定證書，獲得2010年度山東省科技進步獎二等獎。 本成果分離鑒定了具有平臺資源號的280株細菌。其中，大腸桿菌80株，金黃色葡 萄球菌30株，豬鏈球菌50株，雞傷寒沙門氏菌103株，特殊菌株17株。分離鑒定了186株 病毒，其中NDV 60株，豬繁殖與呼吸綜合征病毒50株，犬瘟熱病毒3株，豬傳染性胃腸 炎病毒10株，豬流感病毒3株，禽流感病毒20株，雞傳染性支氣管炎病毒20株，雞傳染 性法氏囊病毒20株。對分離、收集和整理以前所保藏的菌毒種等方式獲得的33種3444株 菌毒種進行標準化整理整合，完成了相應菌毒種種資源數據信息（包括個性信息和共性 信息）的采集、錄入、上報，完成280幅圖像信息采集、整理、上報，完成101株菌（毒） 種資源16SrRNA或病毒資源部分核酸序列的測定、上報。并向國家獸醫微生物菌種保藏 管理中心國家獸醫微生物標準菌種保藏庫上交了1621株菌（毒）種，實現了獸醫微生物 菌毒種資源的信息及實物共享。起草了“布魯氏桿菌菌種資源描述規范”和“牛結核桿 菌資源檢測技術規程”，驗證完善了“結核桿菌菌種資源檢測技術規程及試點應用”等 9個獸醫微生物資源檢測技術規程。制定了“犬瘟熱診斷技術”的國家標準。對分離的 部分菌毒株進行生物學特性研究，為相關單位的科學研究提供了優良菌毒種。

威蘭膠是一種性能優良的微生物多糖，性質與黃原膠相似，同時存在同類多糖不可比擬的優勢：1、在更大的范圍內具有熱穩定性，可以耐受150℃的高溫；2、pH耐受范圍廣，在pH2.0-13.0的范圍內性質穩定；3、耐鹽性好。威蘭膠的耐溫特性在深層采油中十分重要，目前油井深度已達3000米以上，對采油驅動劑耐溫要求大于140℃，因此威蘭膠的耐溫優勢以及它的一些獨特性能，使它有望成為一種性能更為優良的驅油制劑。威蘭膠是一種不可多得的混凝土外加劑，可以增加水泥的可塑性，懸浮量，空氣含量，抗下陷能力以及抗失水性。威蘭膠是制備自密實混凝土和自流平混凝土不可缺少的添加劑。按每噸混凝土中添加0.01%的威蘭膠，則成本僅增加10塊錢左右。我國在這一領域的應用全部依賴進口。本課題組擁有一株自主知識產權的生產菌株，并率先在國內開展了發酵法生產威蘭膠的研究。本項目的成功開發將具有我國自主知識產權，對石油、混凝土等相關行業的發展具有積極的意義。威蘭膠的生產基本可以利用黃原膠的生產資源，因此實驗室中試成熟后，廠家無需太多的前期投入就可以實現工業化。

γ-聚谷氨酸（Poly-γ-glutamic acid）是一種重要的天然聚合物，由 于其具有良好的性質已被廣泛應用于食品，化妝品，醫藥，材料等領 域。解淀粉芽孢桿菌（Bacillus amyloliquefaciens）LL3 是一株谷氨酸 非依賴型 γ-PGA 合成菌。為了提高其 γ-PGA 產量，項目組采用無痕 基因編輯技術對菌株進行了代謝工程改造。包括三部分：模塊化代謝 通路改造；蔗糖代謝途徑改造；谷氨酸合成途徑改造。 B. amyloliquefaciens LL3 是項目組從發酵食品中分離得到，它能 夠從蔗糖出發合成 γ-PGA。利用模塊化通路改造策略對 γ-PGA 合成 相關的八個代謝通路進行改造包括：γ-PGA 降解相關途徑；細胞呼吸 鏈；胞外蛋白及胞外蛋白酶合成途徑；細菌多糖合成途徑；次級小分 子代謝產物合成途徑；細胞自誘導因子合成途徑；谷氨酸合成途徑以 及 γ-PGA 合成途徑。最終整合獲得的最優基因工程菌株 NK-anti-rocG （敲除了 epsA-O 操縱子（負責胞外多糖合成），sac 操縱子（負責果 聚糖合成），lps（脂多糖合成相關），pta（乙酸合成相關），pgdS（γ-PGA 降解酶），cwlO（細胞壁水解酶），luxS（AI-2 合成）以及表達 anti-rocG sRNA（抑制谷氨酸脫氫酶表達））γ-PGA 搖瓶發酵產量從 3.8 g/L 提高到 11.04 g/L，較對照菌株提高了 2.91 倍。γ-PGA 產物純度也 從 78.6%提高到 95.2%。5-L 罐補料分批發酵實驗得到 NK-anti-rocG 菌株產量可達 20.3 g/L。分子量 450,000 Dal，純度 95%以上。 項目特色： 1. 菌種（Bacillus amyloliquefaciens）LL3 是谷氨酸非依賴型 γ-聚谷 氨酸合成菌株；發酵生產主要原料為蔗糖； 2. 補料分批發酵產量為：20.3 g/L。 3. 授權專利號為：ZL200810053900.7 市場應用前景： γ-聚谷氨酸（Poly-γ-glutamic acid）是一種重要的天然聚合物，由 于其具有良好的性質已被廣泛應用于食品，化妝品，醫藥，材料等領 域。本項目采用谷氨酸非依賴型 γ-聚谷氨酸合成菌做為發酵菌種，以 蔗糖為原料發酵法生產 γ-聚谷氨酸，可產生巨大的經濟效益和社會效 益。

已有樣品/n微生物法生產天然香料α-松油醇技術?！　〕晒喗椋害?松油醇(FEMA 3045)有穩定的丁香花、鈴蘭花等花香香氣，是我國重要的出口香料品種，可用于調配檸檬、甜橙、桃子、柑橘等食用香精。α-松油醇天然存在于柑橘精油、松節油、桉葉油、迷迭香油等多種植物精油中，但在精油中的天然含量一般較低，因而實際使用的α-松油醇主要來源于化學合成。本成果突破現有技術以化學合成法生產α-松油醇的技術瓶頸，提供一種微生物法生產香料α-松油醇的方法，通過該法生產的香料屬于天然香料，克服了化學合成法存在的安全性問

(1) 針對有機化工廢水毒性強、難生物降解的特征，通過非均相 Fenton 氧化，將難降解的污染物轉化為易生物處理的物質之后與固定化微生物聯用，提高有機化工廢水效率和降低成本，探討化工廢水中典型有機污染物的催化氧化降解和生物降解的相互影響機制，對于控制化工廢水對環境的污染具有重大的理論意義和實用價值；(2)設計制備磁性微納米非均相 Fenton 催化材料，具有比表面積大、擴散阻力小、表面活性高等特性，能高效誘導產生羥基自由基，將難降解有機污染物降解為 CO2、H2O 和其他礦物鹽，整個過程綠色、無二

一、成果簡介 食源性病原微生物目前是威脅我國食品安全的首要風險。通過分子生物學手段可快速、準確、廉價的檢測病原微生物，但傳統分子生物學技術在食品微生物檢測中只能做到靶向檢測和事后檢 測，即在例行檢查中只檢測種類有限的常規病原微生物，而不在常規檢測范圍內的病原微生物在爆發食品安全事件后才進行檢測，這種靶向性和后驗性導致食源性病原微生物檢測的遺漏和滯后。另 外，傳統的分子生物學技術一次實

微生物菌制劑處理禽畜糞便，使禽畜糞便無臭味，進一步把大分子有機物發酵降解為小分子有機物，使植物更容易吸收利用。在高溫發酵階段溫度可達60～70℃，經過發酵處理的雞糞變為無病毒、無蟲卵、無害蟲的衛生肥料。變臭糞為綠色食品生產的上等肥料，既改善環境又增加了有機肥資源。特別適合養雞戶多的縣，或者大的養雞廠，具有很高的經濟效益、環境效益。微生物菌制劑凈化養殖水，也可以凈化景觀用水，比如旅游地的湖泊、水庫、河流受到污染，或者城市公園的水富營養化等都可以用本菌制劑治理，達到污水變清、保護水資源的

項目成果/簡介: 抗菌肽( Antibacterial peptides) 是由動植物細胞內特定基因編碼，經外界條件誘導產生的一類對細菌、真菌及病毒等微生物具有殺傷作用的多肽?？咕牟煌诳股氐淖饔脵C制。抗菌肽對細菌、真菌、病毒和腫瘤等均有作用，尤其對耐藥性細菌有殺滅作用，具有廣譜性。 本項目主要涉及4種不同來源抗菌肽工程菌株以及生產工藝。具體為：美洲擬鰈抗菌肽Pleurocidin、果蠅抗菌肽Metchnikowin、假黑盤菌抗菌肽-菌絲霉素Plectasin以及梭魚娃2-RPLX等4種抗菌肽發酵生產工程菌株及菌株高效發酵生產工藝。 技術指標（創新要點等）： 1. 抗菌肽工程菌株的構建 2. 抗菌肽的分離純化以及活性鑒定； 3. 抗菌肽發酵生產工藝參數及流程。 抗菌肽的生物活性主要有抑制或殺滅細菌作用、抗真菌作用、抗病毒活性、抗寄生蟲作用、免疫調節作用以及抑制或殺傷腫瘤細胞作用。目前主要應用領域包括但不限于作為抗生物替代品用于醫藥產業、飼料工業、食品工業。知識產權類型:生物醫藥新品種技術先進程度:達到國內先進水平成果獲得方式:獨立研究獲得政府支持情況:無

氮、磷過度排放導致的水體富營養化成為全球水環境面臨的挑戰之一，特別是由此引發的藍藻爆發、水體生態功能喪失及飲用水資源危機成為各國政府亟待解決的關鍵問題。如何實現氮磷營養鹽的合理分配和調控，成為防止水體富營養化和構建完善的水體生態系統的核心和關鍵。微生物活化設備照片 同濟大學環境科學與工程學院柴曉利教授團隊研發的水體微生物活化技術，突破了傳統旁通水處理工藝、水生動植物修復技術的不足，通過激活土著優勢菌種，使之快速增殖，打破原有水體微生態平衡，用水體本身容積代替傳統的有限生物反應器，大大增加微生物的增殖空間，充分發揮微生物對污染物的削減能力，改善生態系統賴以生存的透明度、營養鹽等不利條件，重組、完善水體微生態系統，恢復水體自凈能力，最終脫離人工干預回歸自然，具有重要的實際應用意義。 基于微生物調控的水體原位修復技術解決了地表水環境輕度污染水體（富營養化）治理的技術瓶頸，引領了低污染負荷飲用水水源地氮素污染控制技術的發展方向，具有重要的社會環境效益。目前該技術已經獲得相關授權專利11項，在全國十幾個省市30多個水生態修復工程項目中得到了推廣應用，累積項目合同額超過3億元。

抗菌肽( Antibacterial peptides) 是由動植物細胞內特定基因編碼，經外界條件誘導產生的一類對細菌、真菌及病毒等微生物具有殺傷作用的多肽?？咕牟煌诳股氐淖饔脵C制?？咕膶毦?、真菌、病毒和腫瘤等均有作用，尤其對耐藥性細菌有殺滅作用，具有廣譜性。 本項目主要涉及4種不同來源抗菌肽工程菌株以及生產工藝。具體為：美洲擬鰈抗菌肽Pleurocidin、果蠅抗菌肽Metchnikowin、假黑盤菌抗菌肽-菌絲霉素Plectasin以及梭魚娃2-RPLX等4種抗菌肽發酵生產工程菌株及菌株高效發酵生產工藝。 技術指標（創新要點等）： 1. 抗菌肽工程菌株的構建 2. 抗菌肽的分離純化以及活性鑒定； 3. 抗菌肽發酵生產工藝參數及流程。 抗菌肽的生物活性主要有抑制或殺滅細菌作用、抗真菌作用、抗病毒活性、抗寄生蟲作用、免疫調節作用以及抑制或殺傷腫瘤細胞作用。目前主要應用領域包括但不限于作為抗生物替代品用于醫藥產業、飼料工業、食品工業。