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近日，上海大學(xué)的趙春華教授團(tuán)隊在中國科學(xué)院科技論文預(yù)發(fā)布平臺ChinaXiv發(fā)表重要工作，在7名新冠肺炎患者中進(jìn)行臨床實驗，發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞移植療法能迅速、顯著改善重癥及危重癥患者的預(yù)后，有效規(guī)避細(xì)胞因子風(fēng)暴，且無明顯副作用，為新冠肺炎患者的臨床治療提出新思路。目前認(rèn)為，由于ACE2受體在肺泡2型細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等高度、廣泛表達(dá)，因此新冠病毒一旦入侵人體即迅速擴散，并容易過度刺激免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生IL-2、IL-6、GSCF、IP10、MCP1等分子，進(jìn)而觸發(fā)細(xì)胞因子風(fēng)暴甚至導(dǎo)致死亡。最近發(fā)表在柳葉刀上的研究也顯示，重癥監(jiān)護(hù)室中的新冠肺炎重癥患者血漿細(xì)胞因子水平顯著升高，提示細(xì)胞因子風(fēng)暴在新冠病毒致死過程中扮演的重要角色。針對這種情況，臨床采用激素治療抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生；采用非載體抗炎藥和大劑量維生素C降低炎癥反應(yīng)的程度；或直接采用IL-6等細(xì)胞因子的單克隆抗體，減弱免疫系統(tǒng)的攻擊性。但是這些手段主要針對免疫反應(yīng)的下游，作用較為片面，免疫調(diào)節(jié)作用不強。因此，研究者將目光轉(zhuǎn)向間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）移植：這是一項成熟可靠的技術(shù)，已在移植排異和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等免疫介導(dǎo)的炎癥疾病治療中得到廣泛應(yīng)用。間充質(zhì)干細(xì)胞存在于骨髓、器官間質(zhì)等結(jié)締組織中，具有極強的分化能力；可通過干擾抗原提呈細(xì)胞的激活和成熟、抑制 T 淋巴細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)活化T細(xì)胞凋亡和影響樹突狀細(xì)胞的風(fēng)化，進(jìn)而起到免疫調(diào)節(jié)和免疫抑制作用。在2020年1月23日至2月16日期間，研究者共征集了首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安佑醫(yī)院的7名COVID-19患者，其中包括1名危重癥患者、4名重癥患者和2名輕癥患者，探究間充質(zhì)干細(xì)胞移植后14天內(nèi)，患者的免疫系統(tǒng)和炎癥系統(tǒng)功能變化，以及副作用的發(fā)生情況。新冠肺炎患者移植時間軸1. 無顯著不良反應(yīng)間充質(zhì)干細(xì)胞移植前，患者存在高燒（38.5°C±0.5°C）、虛弱、呼吸急促和低氧飽和度的癥狀；移植后2?4天，所有患者的所有癥狀均消失，安靜時血氧飽和度上升至95％以上。此外，移植后兩小時內(nèi)未觀察到急性過敏反應(yīng)，此后也未出現(xiàn)遲發(fā)性超敏反應(yīng)或繼發(fā)感染，初步證明該療法的安全性。2. 迅速顯著改善患者臨床癥狀和生化指標(biāo)研究中1例危重癥患者存在高血壓史，一度達(dá)到3級高血壓，1月31日接受間充質(zhì)干細(xì)胞移植，療效尤其顯著。其直接效應(yīng)表現(xiàn)在：移植后2周內(nèi)，血漿淋巴細(xì)胞水平明顯下降，血漿C反應(yīng)蛋白水平從105.5 g/L（2月1日達(dá)峰191.0 g/L）降低10倍左右，恢復(fù)到10.1 g/L，表明炎癥反應(yīng)迅速緩解；在不額外吸氧的情況下，血氧飽和度從89%升高至98%，表明肺泡換氣功能基本恢復(fù)。間充質(zhì)干細(xì)胞移植有效阻止免疫系統(tǒng)對器官的攻擊。2月1日，患者血漿天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶活性和肌紅蛋白分別激增至57 U/L、513 U/L和138 ng/ml，表明肝臟和心臟遭受嚴(yán)重?fù)p害；但這些功能性生化指標(biāo)的水平均在移植后2?4天降至正常參考值，2月13日恢復(fù)至正常水平，分別為19 U/L，40 U/L和43 ng/ml。另外，MSC移植能顯著加快治療進(jìn)程。移植后4天，新冠肺炎危重癥患者呼吸頻率降至正常范圍、發(fā)燒和呼吸急促等癥狀消失。移植后9天，胸部CT成像顯示毛玻璃樣混濁和肺炎浸潤已大大減少。危重患者肺部影像學(xué)顯示癥狀改善3. 有效規(guī)避細(xì)胞因子風(fēng)暴研究者通過質(zhì)譜流式分析發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞移植后，導(dǎo)致細(xì)胞因子風(fēng)暴的元兇——過度活化的免疫細(xì)胞CXCR3 + CD4 + T細(xì)胞、CXCR3 + CD8 + T細(xì)胞和CXCR3 + NK細(xì)胞在3-6天內(nèi)消失。另外，CD14 + CD11c + CD11bmid調(diào)控的樹突狀細(xì)胞數(shù)量急劇增加。另外，與安慰劑對照組相比，MSC治療組的TNF-α水平顯著降低而IL-10水平升高。以上結(jié)果在重癥患者中尤其顯著。輕癥和危重癥患者外周血細(xì)胞分析4. 間充質(zhì)干細(xì)胞本身不會感染新冠病毒研究者對患者體內(nèi)移植的間充質(zhì)干細(xì)胞作RNA測序，發(fā)現(xiàn)其不表達(dá)新冠病毒受體ACE2或TMPRSS2。此外，抗炎和營養(yǎng)因子如TGF-β、HGF、LIF、GAL、NOA1、FGF、VEGF、EGF、BDNF和NGF等在MSC中高表達(dá)，進(jìn)一步證明了其免疫調(diào)節(jié)和保護(hù)功能。此外，SPA和SPC在MSC中也高度表達(dá)，提示MSC后續(xù)分化為新冠病毒易感的肺泡2型細(xì)胞的潛在可能性。 移植患者血漿細(xì)胞因子的改變本研究為新冠肺炎重癥患者提出了除激素治療、抗炎治療以外的新思路，運用成熟的間充質(zhì)干細(xì)胞移植技術(shù)有效規(guī)避細(xì)胞因子風(fēng)暴，大大減少副作用，并顯著促進(jìn)治療的進(jìn)展。該方法的安全可靠性已經(jīng)臨床實踐檢驗，為降低新冠重癥、危重癥患者的死亡率提供新的希望！參考文獻(xiàn)：Zikuan Leng, et al. Transplantation of ACE2- mesenchymal stem cells improves the outcome of patients with COVID-19 pneumonia. ChinaXiv. 28 Feb, 2020.張禮翼，等. 間充質(zhì)干細(xì)胞在器官移植中發(fā)揮免疫抑制作用及機制探討的研究進(jìn)展. 器官移植. 2019.點擊查看原文

武漢大學(xué)人民醫(yī)院、武漢市金銀潭醫(yī)院、深圳市第三人民醫(yī)院等機構(gòu)的研究人員從血型角度出發(fā)，試圖找出ABO血型與COVID-19易感性的聯(lián)系。先前已有病毒感染的易感性與血型相關(guān)的研究。如諾如病毒和乙型肝炎有明確的血型敏感性，也有報道稱O型血的人被SARS冠狀病毒感染機會較低。 這項新研究發(fā)現(xiàn)，A型血的人更容易感染，O型血的人相對風(fēng)險更低。相關(guān)研究成果以“Relationship between the ABO Blood Group and the COVID-19 Susceptibility”為題發(fā)表在預(yù)印本平臺medRxiv上。值得注意的是，這是首個新冠病毒（SARS-Cov-2）感染和血型關(guān)系的研究。具體來說，研究人員共納入1775例武漢金銀潭醫(yī)院COVID-19患者（包含206例死亡病例）、113例武漢大學(xué)人民醫(yī)院COVID-19患者、285例深圳第三人民醫(yī)院COVID-19患者的ABO型血液樣本，并以武漢3694名和深圳23386名正常人最近兩次ABO血型分布調(diào)查作為對照組。統(tǒng)計分析采用的方法是單因素方差分析 (one-way ANOVA)和雙尾(2-tailed)卡方檢驗。作者還采用隨機效應(yīng)模型(REM)，對不同醫(yī)院的數(shù)據(jù)進(jìn)行Meta分析，置信區(qū)間為95%，并且計算了OR值。結(jié)果顯示，武漢市3694名正常人的ABO血型百分比分別為，A型32.16％、B型24.90％、AB型9.10％、O型33.84％。武漢市金銀潭醫(yī)院的1775例COVID-19患者的ABO血型百分比分別為，A型37.75％、B型26.42％、AB型10.03％、O型25.80％。總結(jié)來說， 不同血型人群感染SARS-CoV-2的相關(guān)風(fēng)險也不同。A型血與風(fēng)險增加相關(guān)，而O型血與風(fēng)險降低相關(guān)。該研究成果還需要進(jìn)一步研究來證明，但其對于臨床有著積極的意義：(1) A型血患者可能需要特別加強個人防護(hù)以減少感染的機會；(2) A型血患者感染SARS-CoV-2可能需要更警惕的監(jiān)測和積極的治療；(3)作為SARS-CoV-2感染管理的常規(guī)部分，在患者和醫(yī)務(wù)人員中引入ABO血型分型可能會有所幫助。查看原文

近日，華南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院束文圣教授與合作單位廣東美格基因團(tuán)隊組織研發(fā)骨干力量，在7天內(nèi)快速研發(fā)了針對新型冠狀病毒高通量測序的優(yōu)化技術(shù)方案，研制“新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒（基于Q-PCR法）”成功。結(jié)合團(tuán)隊前期系列技術(shù)與產(chǎn)品儲備，束文圣教授及其團(tuán)隊美格基因建立了新型冠狀病毒創(chuàng)新檢測系統(tǒng)，這個新型冠狀病毒的整體解決方案，基于快速檢測試劑、檢測配套的設(shè)備、儀器和物聯(lián)網(wǎng)的熒光定量檢測病毒。“拿著這套設(shè)備，加上試劑盒，這套系統(tǒng)可以在任何地方隨時自行排查，普通人都可以操作。”束文圣表示，該系統(tǒng)簡單易用，既是小型化又是便攜式，只需人工加入樣品，就可以一鍵式全程自動化檢測，并且馬上判別是否感染。“以華師為例，可以在宿舍樓、飯?zhí)没蛘咝ａt(yī)院，學(xué)生現(xiàn)場通過咽拭子等形式進(jìn)行采樣檢測，僅需40分鐘即可完成檢測，檢測一次成本只需幾十塊錢。”束文圣介紹，該系統(tǒng)可投放到各類需求量大的公共場所，將檢測服務(wù)覆蓋到社區(qū)、村落，解決檢測系統(tǒng)下基層困難問題。據(jù)悉，優(yōu)化技術(shù)方案顯著增加了測序結(jié)果中病毒序列的占比，甚至可達(dá)到50%以上，理想情況下可得到超過90%完整度的基因組，相同樣本的基因組覆蓋度也得到了極大提升。該項技術(shù)，不僅有助于疑似病例的篩查，而且對新冠病毒的溯源、變異和進(jìn)化等研究具有重要價值。

研發(fā)階段/n該發(fā)明涉及人工構(gòu)建的偽狂犬病毒（pseudorabiesvirus，PrV）和豬細(xì)小病毒（porcineparvovirus，PPV）的主要結(jié)構(gòu)基因VP2。在缺失了主要毒力基因（TK）和病毒增殖非必需基因（gG）的偽狂犬病毒基因組中，定位插入豬細(xì)小病毒的VP2基因，使其位于偽狂犬病毒的強晚期啟動子下游，插入的外源基因編碼的蛋白具有良好的免疫原性，可以刺激豬產(chǎn)生抵抗豬細(xì)小病毒和豬偽狂犬病毒兩種強毒攻擊的保護(hù)性免疫反應(yīng)。該發(fā)明還包括重組的偽狂犬病毒Pseudorabiesvirus，Hzau

本發(fā)明屬于醫(yī)藥及生物工程領(lǐng)域，涉及一種可用于艾滋病基因治療的 CRISPR/Cas9 重組慢病毒載體 及其慢病毒，該重組慢病毒載體由慢病毒載體 lentiCRISPR 用 BsmBI 酶切后，連入帶 BsmBI 粘性末端 的 CXCR4 特異靶序列重組而得，獲得的 CRISPR/Cas9 重組慢病毒載體能夠在艾滋病毒輔助受體 CXCR4 的 4&nbs

在該研究中，收集了公共數(shù)據(jù)集（大量RNA-seq和單細(xì)胞RNA-seq）發(fā)現(xiàn)ACE2在胰腺（外分泌腺和胰島中）的表達(dá)和分布。而且，包括輕度和重度COVID-19患者在內(nèi)的臨床數(shù)據(jù)表明存在輕度胰腺炎。在這67例嚴(yán)重病例中，有11例（16.41％）的患者的淀粉酶和脂肪酶水平升高，有5例（7.46％）的患者顯示胰腺影像學(xué)改變。在54例輕度病例中，只有一名患者（1.85％）顯示淀粉酶和脂肪酶水平升高，而沒有影像學(xué)改變。該研究揭示了COVID-19患者輕度胰腺損傷的現(xiàn)象和可能的原因。這表明SARS-CoV-2感染后的胰腺炎也應(yīng)在臨床工作中予以重視。

2020年1月22日，華中科技大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院專家組根據(jù)包括華中科技大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院在內(nèi)的武漢各大醫(yī)療機構(gòu)診治的第一批患者的第一手資料制定了《新型冠狀病毒肺炎診療快速指南》（簡稱《指南》）。 《指南》內(nèi)容包括新型冠狀病毒肺炎究竟有什么癥狀，如何檢測，如何確認(rèn)，如何治療，怎樣做好個人防護(hù)，出院后需要注意什么等內(nèi)容：新型冠狀病毒病原學(xué)特點；起病以發(fā)熱為主要表現(xiàn)；發(fā)熱患者合并哪些癥狀要懷疑被感染；新型冠狀病毒肺炎需要鑒別的疾病；抗病毒藥、抗菌藥物以及激素應(yīng)用需要注意；老人、孕產(chǎn)婦病情進(jìn)展相對更快；出院患者要按時隨訪。

從2019年12月開始，中國衛(wèi)生部門一直在密切監(jiān)測湖北省武漢市的一系列肺炎病例。在受影響的個體中引起病毒性肺炎的病原體是新的冠狀病毒SARS-CoV-2。截至2020年3月3日，中國大陸共發(fā)現(xiàn)并確診80,151例；在國際上，在72個國家中發(fā)現(xiàn)并確診的病例超過10,566例。在這項工作中，研究人員模擬了新型冠狀病毒病（COVID-19）在國內(nèi)和國際的傳播，同時該研究估算了2020年2月上旬武漢實施的旅行禁令和一些國家所采用的國際旅行限制的影響。為了模擬COVID-19暴發(fā)的國際傳播，該研究使用了全球流行和流動模型（GLEAM），這是一個基于個體，隨機和空間的流行模型。GLEAM使用與真實世界數(shù)據(jù)集成的元人口網(wǎng)絡(luò)方法，將世界分為圍繞主要交通樞紐的子人口。該模型包括大約200個不同國家和地區(qū)的3200多個子種群。在每個亞人群中，COVID-19在人與人之間的傳播均使用該疾病的區(qū)室表示來建模，其中個體可以占據(jù)以下狀態(tài)之一：易感性（S），潛伏性（L），傳染性（I）和已刪除（R）。該模型生成了一組可能的流行病場景，這些場景由新產(chǎn)生的感染數(shù)，每個亞人群中疾病的到達(dá)時間以及傳播感染的攜帶者數(shù)來描述。該研究假設(shè)疫情的開始日期在11/15/2019至12/1/2019之間，其中40例是由人畜共患病引起的。通過使用近似貝葉斯計算方法來校準(zhǔn)傳播動態(tài)，從而估計基本繁殖數(shù)R0。

2月5日，復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院藍(lán)裴、樊嘉等人在bioRxiv上發(fā)表研究成果未經(jīng)同行評議論文，發(fā)現(xiàn)新冠肺炎患者可能出現(xiàn)肝損傷并建議進(jìn)行專門的肝功能護(hù)理。 基于兩項獨立的單細(xì)胞測序數(shù)據(jù)，研究者在健康人類肝臟和大腸癌患者的肝臟樣本中，均發(fā)現(xiàn)了ACE2在肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞中的特異性表達(dá)。膽管上皮細(xì)胞在肝再生和免疫反應(yīng)中有關(guān)鍵作用。這意味著2019-nCov可能不會靶向肝細(xì)胞，或至少不會通過ACE2靶向肝細(xì)胞。因此，其導(dǎo)致的肝損害，可能是由于病毒感染了膽管細(xì)胞，而非直接感染肝細(xì)胞。研究人員指出，2019-nCov肺炎患者出現(xiàn)肝功能異常，可能是由治療中使用的藥物引發(fā)，或由肺炎引起的全身性炎癥反應(yīng)所致。 

成果介紹本成果擬采用干式熒光免疫層析、電化學(xué)、分子診斷等檢測技術(shù)，將陸續(xù)研發(fā)完成PCT/CRP檢測試劑盒（干式熒光免疫層析法）、SAA/CRP檢測試劑盒（干式熒光免疫層析法）、凝血時間檢測試劑盒（電化學(xué)法）、新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）等項目及對應(yīng)的干式熒光免疫層析、電化學(xué)手持式檢測儀器。技術(shù)創(chuàng)新點及參數(shù)本成果計劃采用免疫POCT+分子診斷的方法對新型冠狀病毒進(jìn)行篩查診斷和治療監(jiān)測。前期采用手持式免疫POCT產(chǎn)品對CRP/PCT/SAA三個炎癥指標(biāo)進(jìn)行快速檢測，判斷是否為病毒感染，而后采用《新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）》對病人樣本中的病毒核酸進(jìn)行檢測，判斷是否有新型冠狀病毒的感染；確診為感染陽性后，在日常治療過程中，利用手持式儀器快速檢測感染情況、監(jiān)測病人CRP/PCT/SAA炎癥指標(biāo)、凝血狀態(tài)的變化情況，分析治療方案是否合理。出院前，再對病人進(jìn)行新型冠狀病毒核酸檢測，判斷是否感染陰性。該項目可以對感染疑似病例全流程進(jìn)行監(jiān)控，包含了初篩排除、核酸確診、日常監(jiān)測、出院檢查四個過程。市場前景該技術(shù)是依托基因芯片（依賴進(jìn)口，國內(nèi)無法生產(chǎn)），通過堿基互補的原理，在引物或探針上標(biāo)記可檢測的物質(zhì)，將所需的探針掛載于基因芯片上，與待檢樣品進(jìn)行雜交，通過雜交的信號進(jìn)行結(jié)果判讀，其中掛載的好壞體現(xiàn)出了高校科研力量。其核心的掛載工藝，可以針對不同的疾病檢測要求掛載不同探針，非常具有普適性，目前針對新型冠狀病毒已經(jīng)和江蘇一家企業(yè)對接并著手產(chǎn)品化，但掛載技術(shù)類似汽車組裝技術(shù)，可以作為重點推廣對象對接其他類似需求的廠家，快速提升各地方診斷設(shè)備自給能力。