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本發(fā)明涉及一種抗ＨＩＶ－１的多肽Ｃ２２、該多肽Ｃ２２表達(dá)前體、編碼多肽的 ＤＮＡ序列、單體多肽的藥物組合物，及其制法。本發(fā)明的多肽Ｃ２２用融合蛋白表達(dá) 得到多肽前體，酶切得到多肽Ｃ２２，工藝簡單，且可提高最終產(chǎn)率，適合于工業(yè)化生 產(chǎn)。 

本發(fā)明公開了一種MMP14雙靶點(diǎn)高效結(jié)合肽及多肽結(jié)構(gòu)序列的獲取方法和目標(biāo)物的用途。從MMP14蛋白誘導(dǎo)表達(dá)的人成骨肉瘤MG63細(xì)胞中篩選和獲得一組新型的雙靶點(diǎn)MMP14和Zn2+的多肽，包括：基于MG63細(xì)胞靶向誘導(dǎo)表達(dá)MMP14的噬菌體隨機(jī)十二肽庫體外消減篩選，經(jīng)3-5輪篩選，獲得富集的雙靶向MMP14和Zn2+的結(jié)合肽噬菌體和多肽結(jié)構(gòu)序列。目標(biāo)物作為先導(dǎo)分子用于疾病治療藥物研發(fā)和用于腫瘤診斷，還可用于蛋白質(zhì)分離純化、分子標(biāo)簽以及重金屬污染生物修復(fù)、采礦等。

多肽藥物研發(fā)具有廣闊的研究空間和市場應(yīng)用前景。2015 年全球多肽藥物市場為 175 億美元，據(jù)預(yù)測，2015-2025 年年增長率為10.3%，到 2025 年全球多肽藥物市場將增至 469 億美元。隨著多肽藥物價格的平民化、蛋白相互作用新靶點(diǎn)以及替代傳統(tǒng)注射給藥的新型給藥技術(shù)迅猛發(fā)展，多肽藥物的臨床應(yīng)用范圍將進(jìn)一步得以拓展。然而，多肽藥物工業(yè)化生產(chǎn)中存在合成步驟繁瑣、成本高等一系列技術(shù)問題，導(dǎo)致藥品價格昂貴，大大增加了醫(yī)療負(fù)擔(dān)，嚴(yán)重影響了這些多肽新藥投放市場的速度。而我國多肽藥物產(chǎn)業(yè)與歐美相比還

針對現(xiàn)有多肽藥物合成方法的缺點(diǎn)，發(fā)展了相變化多肽 合成法，使用多肽的收斂式合成路線研發(fā)出針對 II 型糖尿病的索馬 魯肽和利拉魯肽；針對骨質(zhì)疏松的 Abaloparatide、特立帕肽和鮭魚 降鈣素；針對前列腺癌的曲普瑞林、地加瑞克和 PSMA-617；針對特 發(fā)性便秘的利那洛肽和普卡那肽；還有比伐盧定、阿托西班、特利加 壓素、去氨加壓素等多肽藥物的全新制備工藝。

研究結(jié)果揭示，2019年的地震序列屬于沿加州東部剪切帶歷史群震的一部分。該群震自1872年始，可能與暫時升高的地殼應(yīng)變率有關(guān)。就2019年地震序列而言，該群震至少發(fā)生在五個斷層上，其中，7月4日的6.4級地震始于一個西北向的右旋走滑斷層，然后跳躍到與之共軛的東北向左旋走滑斷層并破裂至地表。7月6日的7.1級地震則發(fā)生在三個走向角變化的西北向斷層（F

項(xiàng)目成果/簡介:重點(diǎn)集中在功能蛋白與多肽關(guān)鍵技術(shù)突破及其應(yīng)用開發(fā)。在原料預(yù)處理方面，突破了綠色預(yù)處理提取技術(shù)，酶促溶提取、高壓輔助提取、超聲輔助提取等技術(shù)瓶頸，形成了水產(chǎn)源蛋白與功能多肽的綠色提取技術(shù)，蛋白回收率>90%，具有提取率高、綠色環(huán)保、產(chǎn)品質(zhì)量高的顯著優(yōu)勢；組合酶酶解技術(shù)，水解效率提高20%，活性肽得率提高15%。獲得了具有不同生物活性的目標(biāo)肽。梯級肽的膜分離技術(shù)，獲得高純度的特定分子量段的功能肽。國內(nèi)外首次發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用的生物傳感器與人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)定向制備技術(shù)、計算機(jī)輔助控制可控制備活性肽技術(shù)。建立了一整套規(guī)模化食品級、化妝品級的功能蛋白與多肽中試及規(guī)模化制備技術(shù)，并進(jìn)一步研究開發(fā)出功能蛋白與多肽的固體飲料、液體飲料、面膜、調(diào)味基料、食品澄清劑、醫(yī)用可吸收止血敷料等產(chǎn)品，產(chǎn)品質(zhì)量高，競爭優(yōu)勢明顯，可預(yù)期產(chǎn)生巨大經(jīng)濟(jì)效益。項(xiàng)目階段:工業(yè)化生產(chǎn)階段效益分析:我國加工副產(chǎn)物資源量大，僅魚皮、魚骨、魚鱗等每年1000~1500萬噸，根據(jù)國際國內(nèi)市場的行情，制成活性肽產(chǎn)品后，可增值幾十倍到上百倍，預(yù)計每年可新增百億元產(chǎn)值，該成果可為提高水產(chǎn)品加工廢棄物的附加值開辟了新的途徑，降低加工廢棄物的排放量，生態(tài)環(huán)境效益顯著，具有良好的示范效應(yīng)。該成果用于美泰科技（青島）股份有限公司、青島東易科技發(fā)展有限公司、青島益和興食品有限公司等其他功能蛋白、功能肽生產(chǎn)企業(yè)、保健與營養(yǎng)食品生產(chǎn)企業(yè)、醫(yī)用材料生產(chǎn)企業(yè)的生產(chǎn)與研發(fā)。知識產(chǎn)權(quán)類型:發(fā)明專利 、 軟件著作權(quán)知識產(chǎn)權(quán)編號:ZL201510603619.6 ZL201410515456.1 ZL201510784871.1 ZL201510772518.1 ZL201510662318.0 ZL201210003787.8技術(shù)成熟度:通過中試技術(shù)先進(jìn)程度:達(dá)到國內(nèi)領(lǐng)先水平成果獲得方式:獨(dú)立研究獲得政府支持情況:無

重點(diǎn)集中在功能蛋白與多肽關(guān)鍵技術(shù)突破及其應(yīng)用開發(fā)。在原料預(yù)處理方面，突破了綠色預(yù)處理提取技術(shù)，酶促溶提取、高壓輔助提取、超聲輔助提取等技術(shù)瓶頸，形成了水產(chǎn)源蛋白與功能多肽的綠色提取技術(shù)，蛋白回收率>90%，具有提取率高、綠色環(huán)保、產(chǎn)品質(zhì)量高的顯著優(yōu)勢；組合酶酶解技術(shù)，水解效率提高20%，活性肽得率提高15%。 獲得了具有不同生物活性的目標(biāo)肽。 梯級肽的膜分離技術(shù)，獲得高純度的特定分子量段的功能肽。 國內(nèi)外首次發(fā)現(xiàn)并應(yīng)用的生物傳感器與人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)定向制備技術(shù)、計算機(jī)輔助控制可控制備活性肽技術(shù)。建立了一整套規(guī)模化食品級、化妝品級的功能蛋白與多肽中試及規(guī)模化制備技術(shù)，并進(jìn)一步研究開發(fā)出功能蛋白與多肽的固體飲料、液體飲料、面膜、調(diào)味基料、食品澄清劑、醫(yī)用可吸收止血敷料等產(chǎn)品，產(chǎn)品質(zhì)量高，競爭優(yōu)勢明顯，可預(yù)期產(chǎn)生巨大經(jīng)濟(jì)效益。

高效的 多肽 - 多肽偶聯(lián)反應(yīng)對于 制備蛋白 - 藥物綴合物、調(diào)控蛋白質(zhì)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)、生物成像 、化學(xué)生物學(xué) 等 領(lǐng)域 具有重要的意義 ，并因其可基因編碼的特性 而 備受關(guān)注 。目前， 研究 報道 此類連接方法 并不太多 見 ，其中 分選酶（ sortase ） 或 蝶豆粘酶 -1 （ butelase 1 ） 介導(dǎo)的偶聯(lián)反應(yīng)具有較好的底物 序列特異性 ， 內(nèi)含肽 （ intein ） 介導(dǎo)的蛋白質(zhì)連接方法 可實(shí)現(xiàn) 可基因編碼的高效主鏈連接， 而 轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶 （ transglutaminase ） 則 可以 介導(dǎo) 非特異性的 側(cè)鏈異肽鍵 偶聯(lián) 。近年來 ， 多肽 - 蛋白質(zhì)反應(yīng)對 的 蓬勃發(fā)展 為此類工具 的 發(fā)展 提供了新的契機(jī) 。 已 有 諜連接酶（ SpyLigase ）和探連接酶（ SnoopLigase ） 介導(dǎo) 的多肽 - 多肽偶聯(lián)體系 見諸報道 ，但其效率仍 有 待提高， 而 其 細(xì) 胞內(nèi)的應(yīng)用前景仍有待探索。 最近 ， 張文彬課題組發(fā)展了 獨(dú)特的具有無序結(jié)構(gòu)的 諜訂書機(jī) 酶 （ SpyStapler ），可實(shí)現(xiàn) 諜標(biāo)簽 （ SpyTag ）和北大 標(biāo)簽 （ BDTag ）在 細(xì) 胞內(nèi)和 細(xì) 胞外的高效偶聯(lián) （圖 1 ） 。

成果簡介： 自 2012 年以來，承擔(dān)多項(xiàng)省級及企業(yè)研究課題，包括江蘇省產(chǎn)學(xué)研項(xiàng)目、企業(yè)原料藥及制劑的技術(shù)開發(fā)、仿制藥一致性評價工藝開發(fā)等。在透皮制劑方面開發(fā)了聯(lián)苯乙酸水凝膠透皮貼劑等產(chǎn)品。

2020年2月4日上海復(fù)旦大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院張永振團(tuán)隊在《自然》雜志發(fā)表了與中國呼吸道疾病爆發(fā)相關(guān)的病毒的基因組序列，該病毒基因組從就職于出現(xiàn)首批患者的海鮮市場的一名病人身上獲得。基因組分析顯示，該病毒與此前在中國蝙蝠體內(nèi)找到的一組SARS樣冠狀病毒密切相關(guān)。 張永振及同事研究了一名41歲的男性海鮮市場工人，其于2019年12月26日在武漢一家醫(yī)院住院，表現(xiàn)出呼吸系統(tǒng)疾病癥狀，包括發(fā)燒、胸悶和咳嗽。聯(lián)合使用抗生素、抗病毒藥和糖皮質(zhì)激素進(jìn)行治療，但患者表現(xiàn)出呼吸衰竭，治療三天后病情無改善。團(tuán)隊對從患者收集的支氣管肺泡灌洗液（肺分泌物）進(jìn)行了基因組測序。他們鑒定出了一種新型病毒，并發(fā)現(xiàn)該病毒基因組與蝙蝠體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的SARS樣冠狀病毒有89.1%的核苷酸相似性。盡管從單個患者的分析中不可能得出該冠狀病毒是當(dāng)前疫情爆發(fā)原因的結(jié)論，不過團(tuán)隊的這些發(fā)現(xiàn)已被針對其他患者的獨(dú)立調(diào)查研究證實(shí)。