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該技術(shù)可利用人體自身存在的機(jī)制進(jìn)行RNA的單堿基編輯，避免了任何由于表達(dá)外源效應(yīng)蛋白而引起的潛在問題。 新型基因編輯技術(shù)（魏文勝團(tuán)隊(duì)） 　　LEAPER (Leveraging Endogenous ADAR for Programmable Editing on RNA)是一類具有我國(guó)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新型基因編輯技術(shù)，該技術(shù)可利用人體自身存在的機(jī)制進(jìn)行RNA的單堿基編輯，避免了任何由于表達(dá)外源效應(yīng)蛋白而引起的潛在問題。LEAPER技術(shù)具有高精度、易于遞送、長(zhǎng)時(shí)效、高安全性等多種優(yōu)點(diǎn)，并在包括遺傳性疾病治療方面展現(xiàn)出了可觀的優(yōu)勢(shì)及潛能，成功為生命科學(xué)基礎(chǔ)研究和疾病治療提供了一種全新的工具。 　　 LEAPER技術(shù)原理 　　近年來，以CRISPR/Cas9為代表的基因組編輯技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域產(chǎn)生了深遠(yuǎn)的影響，但存在的一系列問題使該技術(shù)在臨床治療應(yīng)用中遭遇瓶頸。根源之一在于當(dāng)前的基因編輯體系依賴于外源編輯酶或效應(yīng)蛋白的表達(dá)，從而造成 (1) 蛋白分子量過大使得通過病毒載體進(jìn)行裝載及人體內(nèi)遞送十分困難；(2) 由蛋白過表達(dá)引起的DNA/RNA水平的脫靶效應(yīng)；(3) 由外源蛋白表達(dá)引起的機(jī)體免疫反應(yīng)及損傷；(4) 機(jī)體內(nèi)的預(yù)存抗體使外源編輯酶或效應(yīng)蛋白被中和從而導(dǎo)致基因編輯失敗等。 　　為解決上述問題，擺脫傳統(tǒng)技術(shù)依賴于外源蛋白表達(dá)的桎梏，2019年魏文勝團(tuán)隊(duì)建立了具有我國(guó)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的名為L(zhǎng)EAPER的新型基因編輯技術(shù)。與RNAi類似，LEAPER充分利用了細(xì)胞中天然存在的機(jī)制：僅用一條RNA 就實(shí)現(xiàn)了精確高效的RNA單堿基編輯，從而避免了任何由于表達(dá)外源效應(yīng)蛋白而引起的各種潛在問題。研究人員利用LEAPER成功修復(fù)了來源于Hurler綜合征病人的缺陷細(xì)胞，為未來相關(guān)疾病的治療奠定基礎(chǔ)。此外，LEAPER還有希望衍生出多種延展型技術(shù)，為生物醫(yī)學(xué)等研究提供新型工具。

本發(fā)明涉及一種綠盲蝽唾液酶中果膠酶與淀粉酶的體外提取測(cè)定方法，利用Paraflim膜，采取膜夾營(yíng)養(yǎng)法提取綠盲蝽唾液酶，并測(cè)定綠盲蝽中果膠酶、淀粉酶活性，Paraflim膜法提取綠盲蝽唾液酶利用Paraflim膜、膠卷盒、紗布、橡皮筋、位于兩層Paraflim膜間的液體營(yíng)養(yǎng)介質(zhì)，利用酶與底物反應(yīng)的原理，測(cè)定綠盲蝽唾液中果膠酶、淀粉酶活性。本方法材料易得，操作簡(jiǎn)單方便，制作成本低，占空間小，可實(shí)現(xiàn)綠盲蝽唾液酶的大量、批量提取，并且綠盲蝽可繼續(xù)回收利用。

懸賞金額：10萬元 發(fā)榜企業(yè)：深圳市一正科技有限公司 支柱產(chǎn)業(yè)集群：生物醫(yī)藥與健康產(chǎn)業(yè)集群 需求領(lǐng)域：生物工程與檢測(cè)技術(shù)；輕工和化工生物技術(shù)；生物催化與發(fā)酵；智能制造裝備 技術(shù)關(guān)鍵詞：連續(xù)流酶催化；酶固定床；酶循環(huán)壽命；酯化反應(yīng)或酰化反應(yīng)

該液體酶穩(wěn)定劑通用性強(qiáng)，適用于多種酶制劑，并且通用于未經(jīng)濃縮的酶液、中空纖維超濾濃縮或膜式超濾濃縮的酶液，都可在室溫保存三個(gè)月至八個(gè)月，剩余酶活力在80%。具體技術(shù)指標(biāo)為：1．未經(jīng)濃縮的液體α-淀粉酶，室溫保存9個(gè)月，剩余酶活力達(dá)80%以上。/line2．中空纖維超濾濃縮的液體α-淀粉酶，室溫保存6個(gè)月，剩余酶活力達(dá)80%以上。/line3．膜式超濾的液體堿性蛋白酶，室溫保存8個(gè)月，剩余酶活力在80%左右。/line4．未經(jīng)濃縮的液體糖化酶，室溫保存5個(gè)月，剩余酶活力接近90%。/line5．經(jīng)中空纖維超濾濃縮的液體糖化酶，室溫保存3個(gè)半月，剩余酶活力接近90%。未經(jīng)濃縮和膜式超濾的酶液添加穩(wěn)定劑后的液體酶穩(wěn)定性明顯好于經(jīng)中空纖維超濾濃縮的液體酶。因此膜式超濾較好。實(shí)驗(yàn)證明，液體酶添加劑能提高酶的抗變性能力，促進(jìn)變性酶的復(fù)性；不同添加劑之間有協(xié)同或拮抗作用，對(duì)穩(wěn)定劑配方的篩選提供了理論依據(jù)。/line所用的添加劑價(jià)格低廉，來源方便，并具有通用性。主要設(shè)備是超濾濃縮裝置及包裝容器。廠房面積約200平方米。可通過技術(shù)轉(zhuǎn)讓或技術(shù)入股方式進(jìn)行合作。

可以量產(chǎn)/n針對(duì)當(dāng)前工業(yè)發(fā)展對(duì)脂肪酶的大量需求與脂肪酶實(shí)際表達(dá)水平較低 的技術(shù)瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達(dá)技術(shù)關(guān)鍵，構(gòu)建的白地霉脂肪酶 基因工程菌 10L 發(fā)酵酶活力可達(dá) 11,200 U/ml 以上，目前國(guó)際報(bào)道的白 地霉脂肪酶表達(dá)酶活力約 200U/ml，可見本技術(shù)之精湛。產(chǎn)品可以用于生 物柴油制備，不飽和脂肪酸富集，油脂水解、轉(zhuǎn)酯、酯化，食品加工、 烘焙等廣泛用途。建設(shè)其發(fā)酵生產(chǎn)線預(yù)計(jì)需要 800-1000 萬元，經(jīng)濟(jì)效益 可觀。

成果簡(jiǎn)介： 本研究提供了一種基于ATP再生系統(tǒng)和雙功能谷胱甘肽合成酶（GshF）的酶法制備谷胱甘肽的方法。在谷胱甘肽合成過程中，經(jīng)典的酶法是由谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶兩步催化完成的。而 GshF可一步催化谷胱甘肽合成，簡(jiǎn)化的反應(yīng)步驟，且該酶反饋抑制作用小，非常適合應(yīng)用于酶法合成谷胱甘肽。酶法合成谷胱甘肽需要大量消耗ATP，通過引入高

/space電泳技術(shù)是目前檢測(cè)PCR產(chǎn)物的有效方法。電泳技術(shù)主要包括毛細(xì)管電泳技術(shù)與平板凝膠電泳技術(shù)。毛細(xì)管電泳技術(shù)雖具有靈敏度高、檢測(cè)速度快、實(shí)驗(yàn)試劑耗量少等優(yōu)勢(shì)，但是其高昂的價(jià)格限制了其在實(shí)驗(yàn)室的進(jìn)一步推廣。平板凝電泳技術(shù)憑借其價(jià)格優(yōu)勢(shì)成為實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)DNA最常見的方法。傳統(tǒng)凝膠電泳技術(shù)主要包括制膠、進(jìn)樣、電泳、染色及成像五個(gè)步驟，所涉及設(shè)備主要包括制膠槽、電泳槽、微波爐，直流電源、搖床及凝膠成像儀等。

南開大學(xué)在天津市科技發(fā)展計(jì)劃科技攻關(guān)項(xiàng)目《建立和應(yīng)用腫瘤 轉(zhuǎn)移相關(guān)基因生物芯片篩選抗腫瘤轉(zhuǎn)移藥物的研究》的資助下，進(jìn)行 了腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因生物芯片的研究，在設(shè)計(jì)探針后，完成制備了含 有 213 個(gè)腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的基因芯片。 應(yīng)用上述基因芯片所進(jìn)行的大量的研究工作，表明該基因芯片有很好的應(yīng)用前景。由于該基因芯片的成本低于全基因組芯片，有利于 大量推廣使用。與科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)院和藥廠等相關(guān)企業(yè)合作，大量制備 該基因芯片，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，投放市場(chǎng)使用，可實(shí)現(xiàn)良好的社會(huì)和經(jīng)濟(jì) 效益。 應(yīng)用價(jià)值： 基礎(chǔ)研究：可應(yīng)用該基因芯片進(jìn)行腫瘤轉(zhuǎn)移分子機(jī)制的基礎(chǔ)研究， 篩選與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑。 應(yīng)用研究：可應(yīng)用該基因芯片篩選抗腫瘤轉(zhuǎn)移的藥物；在臨床上 對(duì)切除的腫瘤組織進(jìn)行檢測(cè)，進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)上檢測(cè)對(duì)不同 化療藥物的敏感性，為臨床治療方案提供依據(jù)