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本發(fā)明將裂解酶Bp7e氨基酸的第99位亮氨酸和102位蛋氨酸分別進行突變?yōu)楸彼岷凸劝彼幔?jīng)原核表達技術(shù)得到了突變體蛋白并經(jīng)Western-blot對其進行了鑒定，命名為Bp7c突變體蛋白。對Bp7e和Bp7e突變體蛋白進行了純化及濃度測定，通過體外裂解實驗及裂解譜檢測得知，純化的Bp7e和Bp7e突變體兩種蛋白具有廣譜的抑菌作用，對溶壁微球菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和多種血清型大腸桿菌均有裂解效果，且Bp7e突變體裂解效果整體優(yōu)于天然裂解酶Bp7e。

課題組前期從海洋淤泥中篩選出一株V. natriegens SK42.001生長迅速，該菌株攜帶天然質(zhì)粒并且能夠表達外源基因，具有作為新型模式生物的開發(fā)價值和應(yīng)用潛力。同時，該菌株含有編碼褐藻膠裂解酶的基因、編碼寡褐藻膠裂解酶的基因，還可用于生產(chǎn)制備褐藻寡糖相關(guān)產(chǎn)品。 課題組構(gòu)建了分泌表達褐藻膠裂解酶的大腸，以大腸桿菌為宿主表達來源于需鈉弧菌褐藻膠裂解酶，所得重組大腸桿菌在常規(guī)LB培養(yǎng)基中即可生產(chǎn)分泌胞外褐藻膠裂解酶，無需添加誘導(dǎo)底物海藻酸鈉，并且簡化蛋白下游加工工藝，具有較大的工業(yè)化應(yīng)用潛力。 課題組解析了編碼褐藻膠裂解酶的基因，該褐藻膠裂解酶降解活性高，酶活達65U/mg；性質(zhì)穩(wěn)定，于4℃儲存18個月后酶活仍保持初始酶活的98%以上；具有很高的產(chǎn)物特異性，可特異性生產(chǎn)褐藻寡糖三糖。該酶具有重要的工業(yè)應(yīng)用價值和科學(xué)研究價值。

已有樣品/n迅裂細菌裂解酶與核酸提取試劑盒采用專利的噬菌體裂解酶，具有常溫 5-10 分鐘內(nèi)裂解、無毒無害等特點，并結(jié)合特有的技術(shù)能實現(xiàn)在取樣拭子上的原位裂解，大大簡化從取樣拭子上獲得靶標物如細菌等的核酸提取過程，具有提取效率高、操作簡便等優(yōu)點，是臨床PCR檢測，如產(chǎn)道中B簇鏈球菌和鼻拭子中耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）,的 理想樣本前處理試劑。同時還研發(fā)了通用的真菌和細菌核酸提取試劑盒，與簡單的渦旋儀聯(lián)用，可以裂解和提取任何真菌和細菌的核酸。市場前景:可廣泛應(yīng)用于細菌裂解提取，應(yīng)用前景廣闊。

可以量產(chǎn)/n針對當前工業(yè)發(fā)展對脂肪酶的大量需求與脂肪酶實際表達水平較低 的技術(shù)瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達技術(shù)關(guān)鍵，建立了真菌脂肪酶高 效表達技術(shù)平臺，構(gòu)建的疏棉狀嗜熱絲孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)基因工程菌 10L 發(fā)酵，酶活力可達 64,000 U/ml 以上，達到世界報道的最高水平。產(chǎn)品可用于生物能源，制革，油脂水 解、轉(zhuǎn)酯、酯化，再生紙脫墨等廣泛用途。建設(shè)其發(fā)酵生產(chǎn)線預(yù)計需要 800-1000 萬元，經(jīng)濟效益可觀。針對當前工業(yè)發(fā)展對脂肪酶

本項目涉及一種新型的超級糖胺聚糖裂解酶 HCLase. 通過對提取的外周血基因組 DNA 與目的基因 GSTM3 啟動子的甲基化特異 性引物對和探針、內(nèi)參基因 ALU-C4 的特異性引物對和 Taqman 熒光探針序列， 對處理過的 DNA 進行實時定量聚合酶鏈式（PCR）反應(yīng),用甲基化特異性 PCR 205 的方法檢測目的基因 GSTM3 和內(nèi)參基因 ALU-C4 的閾值循環(huán)值，并計算出基 因 GSTM3 甲基化定量值。有助于評估病情、判斷預(yù)后及指導(dǎo)治療。

裂解工藝實訓(xùn)裝置 （1）裝置特色 本裝置結(jié)合《安監(jiān)總宣教（2014）139號國家安全監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)特種作業(yè)安全技術(shù)實際操作考試標準及考試點設(shè)備配備標準（試行）的通知》的標準（下稱“標準”），定制開發(fā)用于危化生產(chǎn)從業(yè)人員培訓(xùn)和考試的設(shè)備系統(tǒng)，該系統(tǒng)有如下特色： 1．本系統(tǒng)由危化工藝單元組成，并包含硬件設(shè)備、仿真模擬系統(tǒng)、集散控制系統(tǒng)、實訓(xùn)中心管理系統(tǒng)、教學(xué)培訓(xùn)軟件、音視頻和出版教材等多個組成部分，全方面服務(wù)學(xué)生教學(xué)和員工培訓(xùn)。 2．本系統(tǒng)參照“標準”要求，充分理解培訓(xùn)及考試需求，形成一套完整的、先進的、具有鮮明特色的培訓(xùn)和評價體系。 3．本系統(tǒng)還可面向企業(yè)員工、企業(yè)管理人員、企業(yè)安全管理人員、監(jiān)管部門管理和執(zhí)法人員，提供系統(tǒng)的、全面的、標準的、權(quán)威的實訓(xùn)、培訓(xùn)與考試服務(wù)。 4．本系統(tǒng)還可以滿足面向本科、高職教學(xué)，進行危化生產(chǎn)工藝實操培訓(xùn)、設(shè)備認知培訓(xùn)、設(shè)備檢維修培訓(xùn)與安全作業(yè)培訓(xùn)等。 （2）系統(tǒng)功能及訓(xùn)練目標 1．工藝培訓(xùn)： 工藝選用石油催化裂化工藝，原料為加氫重油，溫度180℃，直接送入原料油緩沖罐（V2202），然后用提升管進料泵（P2201A/B）抽出，與油漿換熱（E2201A/B）升溫至～200℃后，與回煉油混合，進入到提升管底部進料噴嘴。原料油與霧化蒸汽在原料噴嘴混合后，經(jīng)過進料噴嘴（12組，分為兩排，每排6個）噴出與第二再生器來的高溫再生催化劑（690～700℃）接觸后，立即在提升管第一反應(yīng)區(qū)內(nèi)汽化，在較高的反應(yīng)溫度和較大劑油比的條件下，裂解成輕質(zhì)產(chǎn)品（干氣、液化氣、汽油、輕柴油），并生成油漿及焦炭。 2．危化考核與工藝培訓(xùn)： 本裝置可實現(xiàn)危化工藝開停車工藝的操作以及工藝裝置隱患排查與應(yīng)急處置相關(guān)的操作。操作的流程步驟符合化工單元安全操作的要求與規(guī)范。 主要培訓(xùn)的內(nèi)容： (1)了解和掌握危險化工工藝生產(chǎn)工藝流程和工藝危險特點 (2)了解和掌握危險化工工藝需重點監(jiān)控的設(shè)備單元與工藝指標 (3)了解和掌握危險化工工藝安全控制的基本要求、宜采用的自動控制方式與聯(lián)鎖的設(shè)置 (4)了解和掌握重點反應(yīng)壓力容器的緊急斷料、冷卻系統(tǒng)的設(shè)計與控制方式 (5)了解和掌握重點反應(yīng)壓力容器的緊急泄放系統(tǒng)的設(shè)計和控制方式 (6)了解和掌握單元設(shè)備的基本操作：如離心泵開停操作；換熱器的檢修等單元操作 (7)了解和掌握異常工況下的應(yīng)急處置、多人應(yīng)急處置下的協(xié)同演練 (8)了解和掌握化工設(shè)備、管道、閥門、框架、電氣、儀表在危險化工工藝作業(yè)環(huán)境下的規(guī)范安裝和安全操作； 3．操作的記錄與考核： 危化工藝考評系統(tǒng)包括硬件和軟件兩部分組成，硬件包括數(shù)據(jù)采集模塊、控制模塊、電源模塊、通訊轉(zhuǎn)換器等組成，軟件部分由定制考核軟件組成，系統(tǒng)通過軟件與現(xiàn)場控制站模塊通訊采集數(shù)據(jù)、控制運算、控制輸出，實現(xiàn)數(shù)據(jù)交互，根據(jù)危化工藝操作步驟，將現(xiàn)場操作數(shù)據(jù)傳送至軟件之后，實現(xiàn)危化工藝操作的記錄與考核。 4．環(huán)境的建設(shè)： 本裝置在隱患點設(shè)置泄漏發(fā)生器、爆炸發(fā)生器與失火發(fā)生器；真實模擬危化工藝中遇到異常及應(yīng)急處置的情景，可以讓學(xué)員真實的感受現(xiàn)場氛圍。

噬菌體由和 Twort 在 1907 年和 D，Herelle 在 1909 年發(fā)現(xiàn)。凡存 在細菌的場所就可能有相應(yīng)的噬菌體存活。20 世紀初，由于抗生素 的發(fā)現(xiàn)及臨床應(yīng)用為治療細菌感染提供了有效途徑，以至于對噬菌體 生物制劑的研究放緩了步伐。但隨著多重耐藥致病菌威脅的不斷加 大，人們需要尋找抗生素以外的療法治療感染性問題。因此，噬菌體 療法又引起人們廣泛關(guān)注。 噬菌體是感染細菌、真菌、放線菌或螺旋體等微生物的病毒的

發(fā)現(xiàn)自噬蛋白激酶復(fù)合體成員ATG1和ATG13蛋白在營養(yǎng)缺陷及恢復(fù)條件下，其穩(wěn)定性受26S蛋白酶體動態(tài)調(diào)控。在正常生長條件下，E3泛素連接酶SINAT1和SINAT2與自噬起始復(fù)合體中的ATG13蛋白相互作用，通過K48連接的泛素化修飾，促進ATG13蛋白的降解，從而抑制自噬過程的發(fā)生。在營養(yǎng)缺陷條件下，SINAT6則通過競爭性結(jié)合ATG13，抑制ATG13蛋白的泛素化降解，促進自噬發(fā)生。深入研究表明，ATG13a蛋白中K607和K609兩個關(guān)鍵的賴氨酸殘基對于其泛素化及抑制自噬發(fā)生至關(guān)重要。進一步，研究發(fā)現(xiàn)TRAF1a和TRAF1b作為接頭分子，參與了SINAT1/SINAT2及SINAT6對ATG13蛋白的穩(wěn)定性調(diào)控。同時，該研究揭示了ATG1蛋白通過磷酸化修飾，在營養(yǎng)缺陷條件下反饋調(diào)節(jié)TRAF1接頭分子蛋白的穩(wěn)定性，進一步維持植物自噬發(fā)生水平的穩(wěn)態(tài)（如上圖所示）。與其生理功能一致，擬南芥atg1a atg1b atg1c三突變體表現(xiàn)出提前衰老、對營養(yǎng)缺陷異常敏感、及TRAF1a蛋白穩(wěn)定性下降的表型。該論文揭示了擬南芥SINAT家族蛋白通過介導(dǎo)ATG13蛋白的泛素化修飾和穩(wěn)定性，影響植物自噬發(fā)生的分子機制，具有重要的科學(xué)意義。

選擇性自噬能動態(tài)靶向I型干擾素抗病毒通路中關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子IRF3，從而平衡抗病毒通路的激活以及免疫抑制過程。這一發(fā)現(xiàn)不僅解析了I型干擾素抗病毒免疫與選擇性自噬之間的交互聯(lián)系，也為抗病毒信號網(wǎng)路的動態(tài)修飾提供了重要的分子證據(jù)。?在靜息態(tài)細胞中，去泛素化酶家族成員PSMD14能與IRF3結(jié)合，并依賴其酶活性去除IRF3上的K27泛素化，抑制IRF3降解并維持IRF3的本底表達。然而在病毒入侵過程中，IRF3發(fā)生磷酸化并活化，活化的IRF3與PSMD14解離，導(dǎo)致IRF3上的泛素化增強。而IRF3上的K27泛素化會成為選擇性自噬貨物識別受體NDP52/CALCOCO2的識別信號，并被NDP52識別并帶入自噬體中降解，從而導(dǎo)致抗病毒免疫反應(yīng)的削弱。因此，在病毒入侵過程中，PSMD14通過調(diào)控IRF3上的動態(tài)泛素化修飾，控制IRF3的選擇性自噬降解過程，從而平衡干擾素抗病毒免疫信號的激活與抑制。本研究不僅發(fā)現(xiàn)了IRF3在病毒入侵過程中動態(tài)修飾與調(diào)控，也為抗病毒免疫通路與選擇性自噬的交互聯(lián)系提供了新的證據(jù)。

項目簡介 本成果針對農(nóng)村廢棄生物質(zhì)資源豐富的情況，利用熱裂解副產(chǎn)物炭和不可凝氣體作 為熱裂解液化的能源，有效利用熱載體加熱裝置排放的煙氣作為流化氣。采用該技術(shù)研 發(fā)的生物質(zhì)裂解制油系統(tǒng)具有工藝過程合理、無二次污染、節(jié)能、成本低等優(yōu)點。 性能指標 系統(tǒng)能耗: <10kW； 覆蓋面積:100m2 ； 生物油質(zhì)量產(chǎn)率:>55%。 適用范圍、市場前景