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在唾液中敏感地檢測到肝細胞癌變過程中釋放出來的標志物。通過不斷技術創新，患者僅需通過唾液就能檢測早期肝癌，無需采取血液樣本，無創高效，敏感性超過80%、特異性接近98%，遠遠高于血液AFP檢測，適合于原發性肝癌早期預警、早期診斷、術后療效評估與復發監測，更適合于大規模社區人群普查。

l 一種高效的痕量臨床病人樣本的高通量全蛋白組學定量分析方法。中國發明專利申請號：CN201710155263.3.基于二代測序和蛋白質組學的高效價特異性抗體基因工程生產和制備。

本項目是基于PPP1CA生物標志物，進行肝癌早期篩查和診斷試劑盒開發及產業化的項目，開發PPP1CA膠體金肝癌早期篩查試劑盒，用于肝癌早期普篩。 一、項目進展 創意計劃階段 二、負責人及成員 姓名 學院/所學專業 入學/畢業時間 李昱潔 藥學院/藥學專業 2018/2022 趙祖一 藥學院/藥學專業 2020/2024 劉楚熠 藥學院/藥學專業 2020/2024 趙博韜 公共衛生學院/預防醫學專業 2018/2025 于悅 人文學院/歷史學專業 2020/2024 沈佳敏 經濟學院/經濟統計專業 2019/2023 韓一諾 生命科學學院/生物科學 2019/2023 魏翹楚 公共衛生學院/預防醫學專業 2020/2025 賴欣 藥學院/藥學專業 2020/2024 趙書悅 藥學院/藥學專業 2020/2024 譚清 法學院/法學專業 2020/2025 尹潔 醫學院/臨床醫學專業 2019/2024 楊夢嬌 經濟學院/金融工程專業 2019/2023 三、指導教師 姓名 學院/所學專業 職務/職稱 研究方向 李良成 藥學院/藥學專業 廈門大學藥學院副教授 腫瘤、自身免疫性疾病和糖尿病的發病機理及藥物開發研究 洪萬進 藥學院/藥學專業 新加坡分子與細胞生物學研究院院長、廈門大學藥學院教授 分子與細胞生物學、病毒學和癌細胞生物學 藍偉光 化學系/化學專業 廈門大學材料學院講座教授 生物膜技術 徐陳芳 藥學院/藥學專業 廈門大學藥學院輔導員 藥物分析 四、項目簡介 早期肝癌發病隱匿，最初癌變細胞與正常細胞幾乎無差異，人體不會感到不適。問題在于，目前臨床檢測肝癌的生物標志物—甲胎蛋白（AFP）存在特異性差、靈敏度低等的缺點，早期患者不能被及時發現，治愈率低、死亡率很高，所以肝癌的早期篩查對于提高患者生存率具有至關重要的臨床意義。 前期研究中利用原代培養的肝癌細胞分泌的外泌體，結合蛋白組學和生物信息學技術，尋找到PPP1CA作為肝癌腫瘤標志物，使肝癌檢測的靈敏度和特異性均達到90%以上，優于目前市面上的檢測試劑盒（以甲胎蛋白為生物標志物，靈敏度為18-60%）。 本項目是基于PPP1CA生物標志物，進行肝癌早期篩查和診斷試劑盒開發及產業化的項目，開發PPP1CA膠體金肝癌早期篩查試劑盒，用于肝癌早期普篩；同時也將開發PPP1CA免疫化學發光檢測試劑盒，用于肝癌分期檢測，并積極推進其商業化生產與應用。

中試階段/n該項目研發基于液體活檢的ctDNA甲基化肝癌早期診斷試劑盒、產品靈敏度高：擴增技術檢出標本中極其微量的核酸，檢測下限低至 ng 甚至 pg 級的痕量核酸，乃至一個細胞。能在細胞癌變之前檢測出DNA甲基化異常，真正做到早期預警。也可用于手術后病人的個性化診斷DNA甲基化檢測可以精確到單個堿基。CTC捕獲和測序技術的飛速發展，保障了檢測結果的精確性和特異性。(預期)成果的先進性或獨特性：1.已經篩選得到了在肝癌組織中差異甲基化的DNA標志物。2.實驗證實了該標志物的DNA甲基化

產品詳細介紹唾液收集管/唾液采集管（Salivette）唾液收集能通過咀嚼棉簽這種簡單的方法進行。把棉簽放回唾液收集管，再對整個管進行離心，就能還原唾液樣品。唾液收集管能保證獲得一個干凈而衛生的唾液樣品，可以用做分析使用。用這種方法采集的唾液樣品不需要進行冷凍處理。應用的范圍：用于皮質醇（cortisol）檢測、唾液檢測，在診斷、治療和大量情況控制方面起到重要的輔助作用。主要用戶群：醫院的內分泌科、口腔科、傳染科、心理疾病分析科，還可用于毒品檢疫方面，以及畜牧業方面。經濟節約：取樣可在家中完成，無需任何特殊的培訓。患者容易接受：無痛取樣，可重復多次。運輸簡便：唾液收集管保證了一個簡單而安全的運輸。干凈衛生：使用唾液收集管能得到一個干凈而衛生的唾液樣品。樣本質量：離心后能得到一個可分析的透明的液體樣本。以其它方法得到的樣品需要低溫凍存，該方法無需凍存。貨號         長度/mm 類型                包裝51.1534       97/16.8 棉簽無任何處理     500/箱（100/包）51.1534.001    97/16.8 檸檬酸處理棉簽     500/箱（100/包）51.1534.500    97/16.8 專用于皮質醇檢測的棉簽    500/箱（100/包）貨號：51.1534產地：德國品牌： Sarstedt/莎斯特供應商：北京中創先鋒科技有限責任公司數量：大量現貨狀態：現貨聯系人：廉玲地址：北京市海淀區上地信息路 22號實創總公司西區1211室郵編：100085電子郵件：ccpioneer@gmail.com電話：010-62668351手機：15300067286傳真：010-82176142QQ：1289700630公司網址：www.ccpioneer.com

通過檢測少量血液中ctDNA特定位點甲基化水平，對肝癌進行早期診斷及療效和預后預測的新方法。ctDNA相當于腫瘤細胞釋放到血液中的身份指紋，由于其攜帶有與原發腫瘤相一致的甲基化改變，理論上可以利用ctDNA的甲基化譜對腫瘤進行診斷，這一被稱為“液體活檢”（Liquid Biopsy）的新技術已經成為當前腫瘤研究領域的熱點之一。但是，ctDNA在血液中的含量極微，每毫升血中僅有約20ng，相當于一滴水的一億分之一，并且混雜在更大量的正常游離DNA背景中，在這么微量的ctDNA中檢測單個堿基的甲基化水平，好比在機場和火車站的數百萬人流中找到個別犯罪分子，其難度可想而知。?先后攻克了穩定提取微量ctDNA、提高重亞硫酸鹽轉化效率、靶向甲基化PCR擴增及測序、海量數據的統計學分析處理等一個個技術壁壘，終于從40多萬個候選位點中分別尋找到10個早期診斷和療效相關以及8個預后相關的位點，就像是破獲了肝癌的“身份指紋”，讓早期的肝癌病灶也無所遁形，實現肝癌早診早治技術的關鍵突破。

本項目擬研發腫瘤特異熒光增強核酸遞送體系，該體系的制備及產業化將有助于開發原發性肝癌早期診斷的新材料和新方法，提供腫瘤的熒光成像及術中導航的新產品和新思路。

本項目提供了一種靶向肝癌細胞的納米藥物（LTAG-NPs）。該藥 物以天然多糖搭載臨床廣泛使用的鉑類抗癌藥物，具有合成簡便，成 分友好的特點，通過與肝（癌）細胞發生特異性結合，實現肝癌靶向 效果。藥物在肝部高效富集并在腫瘤細胞中釋藥。因此，LTAG-NPs 在有效抑制腫瘤生長的同時，明顯降低傳統化療藥物強烈的毒副作用， 提高患者順從度和安全性。具有較高臨床應用價值和轉化前景。 體外釋藥實驗表明，在腫瘤細胞環境下，LTAG-NPs 4 小時釋放 藥物超過 20%，6 天藥物全部釋放，既在 6 天內緩慢持續釋藥；藥物 代謝實驗證明，LTAG-NPs 在注射小鼠體內 24 h 后仍保持較高藥物 濃度，具有血液長循環效果；生物分布實驗證明，納米藥物在肝部的 富集是傳統化療藥物的 5-6 倍，明顯降低了在腎臟的積累；對于同時 種有肝異位瘤和肺異位瘤的小鼠，LTAG-NPs 在肝異位瘤的富集量為 肺異位瘤的 2.5 倍，說明具有優異的肝腫瘤靶向能力。體內抑瘤實驗 證明，納米藥物具有與傳統化療藥物相當的抑瘤效果但毒副作用明顯 降低，尤其是明顯降低了腎毒性。大劑量注射傳統化療藥物的小鼠在 5 天內全部死亡，而納米藥物組則保持存活率 100%，且小鼠體重穩 步上升，體征良好。 以上動物實驗全部由醫院完成并進行相關評價

 高志良教授團隊與雙聘教授鄺棟明教授團隊合作，在“十三五”國家科技重大專項和國家自然科學基金重點項目等基金的支持下，發現了PD-L1+肝癌免疫微環境存在高度的異質性。研究證實巨噬細胞和T細胞釋放的炎性介質均參與了PD-L1+肝癌形成，但巨噬細胞同時賦予了PD-L1+肝癌可抵抗傳統化療、T細胞殺傷和免疫檢查點治療的特征。聯合免疫檢查點治療和巨噬細胞功能調控有望成為新型的肝癌治療策略。同時，上述主體研究結論同時在多種人類腫瘤中得到驗證。

本研究將構建重組溶瘤腺病毒，以期達到治療實體腫瘤（肝癌）的目的。在腫瘤局部，利用溶瘤腺病毒誘導的炎癥引起免疫細胞浸潤。同時病毒可以感染并裂解腫瘤細胞，導致腫瘤相關抗原釋放。而重組溶瘤腺病毒可以同時使被感染的細胞表達免調控融合蛋白PD1CD137L，在活化T 細胞的同時封閉腫瘤表面PD-L1 傳遞的負向信號。最終使得機體的免疫細胞能夠識別腫瘤抗原，并產生特異性抗腫瘤免疫應答，最終達到清除腫瘤的目的。