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【發 明 人】劉睿；段金廒；錢大瑋；唐于平；郭建明 【摘要】 本發明涉及藥物技術領域，具體涉及一種具有抗氧化活性的六肽、其分離方法及用途。本發明的多肽具有下列序列結構：Gln-Tyr-Asp-Gln-Gly-Val。這種多肽提取分離自水牛角，藥理試驗證明，本發明的多肽具有良好的抗氧化活性。

疼痛是人類所經受的最常見的病癥之一，每個人的一生都會經歷疼痛的困擾。據統計全球大約有 1/3 的人忍受著持續或周期性疼痛的折磨，美國在疼痛相關社會問題的花費約為 1 千億美元/年。在臨床上，嗎啡類的阿片藥物已被人們廣泛的應用于治療和緩解各種疼痛，但由于阿片類的鎮痛藥物能引起嚴重的耐受、成癮、便秘和呼吸抑制等不良反應，從而大大限制了其臨床應用范圍。已有的研究結果表明，機體內的阿片肽同樣也能通過激活阿片受體而介導鎮痛作用。為了獲得選擇性高、高效、分子較為穩定的阿片類配體分子，在腦啡肽等阿片肽的結構基礎上

在臨床上，嗎啡類的阿片藥物已被人們廣泛的應用于治療和緩解各種疼痛，但是由于阿片類的鎮痛藥能引起嚴重的不良反應和阿片依賴作用，而大大限制其在臨床治療中的應用。已有的研究表明哺乳動物中樞和外周都廣泛存在著阿片受體。1997 年，發現內嗎啡肽（endomorphins，EMs），即內嗎啡肽 1（EM-1，Tyr-Pro- Trp-Phe-NH2）和 2（EM-2，Tyr-Pro-Phe-Phe-NH2）為 μ 阿片受體（MOR）內源性的高效選擇性的激動劑，它們對 μ 阿片受體的 Ki 分別為 360 pM

肽是介于氨基酸和蛋白質之間的物質。肽具有吸收快、無過敏、生理活性強 等優點，是續蛋白質，氨基酸后新一代的營養品。 小麥胚芽是小麥加工業過程中重要副產品?，F代研究證明，小麥胚芽肽是目 前谷物類肽中抗氧化活性（能延緩衰老）和 ACE 抑制活性（抑制高血壓）最強的 蛋白肽，同時小麥胚芽肽在抗疲勞，防癌方面已經被國外消費者廣泛認可，產品市場前景廣闊。本項目經過十多年研究，開發出國內首套成熟的小麥胚芽活性肽生產技術，該技術具有設備投資小，產品品質好等優點，是小麥胚芽深加工首選。 

項目以大豆加工副產物—豆粕為原料，通過酶工程、膜分離、低溫萃取、活 性碳脫色、真空濃縮、閃蒸干燥等現代生物和食品技術的集成運用，開發得到功 能性大豆肽。功能性大豆肽產品具有優良的色澤、風味，蛋白質含量≥85％，總 肽含量≥80%，溶解度≥90％，正電荷肽含量≥40％，平均相對分子質量≤2000 道爾頓。大豆肽經精制處理，其氮回收率不低于 80％，活性回收率不低于 85％。 

抗菌肽（antibacterial peptides or antimicrobial peptides）是生物體中存在的具有廣譜抗菌活性的內源性肽類物質，具有抗細菌、真菌和病毒的活性，也具有抗腫瘤的作用。分子量在2000～7000左右，由20～60個氨基酸殘基組成。這類活性多肽多數具有強堿性、熱穩定性以及廣譜抗菌等特點，在食品和藥品方面有廣泛的應用價值。本項目采用有機溶劑提取、高速離心分離純化、真空低溫等高技術提取分離純化中國林蛙蛙皮中的活性生物肽生產天然生物抗菌劑。

1998 年全球中樞神經系統藥物的市場金額為 3.3×108 美元，還不到全球心血管疾病藥物市場份額的 1/2，但僅以美國為例，中樞神經系統疾病患者卻是心血管疾病患者的大約兩倍（Drug Discov. Today, 2002, 7, 223）。引起這種不平衡狀態的一個重要原因在于 98%以上的具有潛在治療中樞神經系統疾病的藥物無法穿透血腦屏障。 中樞神經系統與外環境之間存在兩重屏障。包括位于腦毛細血管內皮細胞上的血-腦屏障（blood-brain barrier

涉及一種血管活性腸肽的融合蛋白，所述融合蛋白包含 1 個人血 清白蛋白(Albumin Human，HSA)和 1 個血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide，VIP),該融合蛋白所具有的獨特的氨基酸序列可以 保證其在宿主體內高水平穩定表達，在保留 VIP 原有功能的同時，體 內半衰期顯著延長。本發明同時提供該融合蛋白的制備方法及其在制 備抗炎、抗損傷、腦血管疾病、提高睡眠質量的藥物中的應用。

所述融合蛋白包 含 1 個人血清白蛋白（Albumin Human，HSA)和 1 個血管活性腸肽 （vasoactive intestinal peptide，VIP）,該融合蛋白所具有的獨特的氨基酸序列可以保證其在宿主體內高水平穩定表達，在保留 VIP 原有功能的同時，體內半衰期顯著延長。

糖尿病已成為威脅人類健康的重要慢性流行疾病。本課題組研發 的“降糖抗栓肽口服液”能顯著改善糖尿病模型小鼠的“三多一少” 癥狀、血糖濃度、胰島素抵抗和口服糖耐量，恢復臟器損傷，減少細 胞凋亡；改善血流變特性，防治血栓形成和發展；長期高劑量口服無 毒無害，是一種安全長效的口服降糖抗栓雙功能制劑。 本技術提供了完善的“降糖抗栓肽口服液”(有效成分為長效促胰 島素-水蛭素) 高效生產菌株、中試發酵和純化制備技術生產工藝。 項目特色： 首次采用無縫串聯融合技術克隆了長效促胰島素-水蛭素基因， 創制了其高效生產菌株、中試發酵工藝和純化制備技術。相關內容已 獲 2 項國家發明專利、發表多篇 SCI 論文，并通過天津市科技支持重 點項目驗收鑒定(成果編號 14ZCZDSY00013/170800)。 完成了降糖抗栓肽的藥理、藥代和毒理學實驗研究，證明其能顯 著改善糖尿病模型鼠的“三多一少”癥狀、血糖濃度、胰島素抵抗和口 服糖耐量，恢復其臟器損傷，阻止細胞凋亡；改善血栓模型小鼠的血 液特性，延緩尾部血栓的形成和發展；口服降糖抗栓肽以快速吸收和 緩慢消除的形式發揮降糖和防栓功能；長期高劑量口服降糖抗栓肽未 發現明顯的急性、慢性、生殖和遺傳毒性，可以作為一種安全長效的 口服降糖防栓雙功能藥物。 “降糖抗栓肽口服液”具有顯著的“降糖抗栓”功效，其應用將 使數以億計的糖尿病患者擺脫“久病纏身”和長期“打針注藥”的痛 苦，并可為企業帶來巨大商機、經濟效益和社會效益。 市場應用前景： 目前我國有糖尿病患者超1.2億，全世界糖尿病患者約4.5億人， 預計到 2040 年將超過 6.5 億，糖尿病已成為威脅人類健康的重要慢 性流行疾病，足見其需求迫切、應用前景廣闊和市場潛力巨大。 “降糖抗栓肽口服液”具有顯著的“降糖抗栓”功效，其應用 將使數以億計的糖尿病患者擺脫“久病纏身”和長期“打針注藥”的 痛苦。目前我國糖尿病患者比例已接近總人口的 10%，且仍在逐年上 升，若“降糖抗栓肽口服液”能獲批上市，將給企業帶來數以億計的 經濟效益和巨大的社會效益。