研發(fā)有效的內(nèi)毒素 LPS 脫毒方法具有重要意義，本項(xiàng)目一方面通過 KDO 定量方法檢測(cè)對(duì) LPS 分子的吸附能力，從發(fā)酵食品中篩選到 LPS 吸附能力最強(qiáng)酵母菌株 CSW。證實(shí) LPS 與 Y. lipolytica 細(xì)胞共存一段時(shí)間后，會(huì)產(chǎn)生 LPS 含量降低的現(xiàn)象。通過 18s r DNA 分析，菌株 CSW1 與 1.0 mg/m L 來(lái)源于 E. coil O111:B4的 LPS 共存后，可使 LPS 水平降低約 70%，而 S. cerevisiae BY4742 僅使 LPS含量近 30%。

另外一方面，過敲除大腸桿菌 E. coli 染色體基因上與 LPS 合成相關(guān)基因，構(gòu)建了多株能夠直接合成新型特殊結(jié)構(gòu) Kdo2-lipid A 的突變菌株，具有低內(nèi)毒素，適合用于大腸桿菌表達(dá)宿主生產(chǎn)各種蛋白及氨基酸。

關(guān)鍵技術(shù)

脂多糖 LPS 是存在于大多數(shù)革蘭氏陰性菌外膜的主要組成部分，可通過激活宿主細(xì)胞內(nèi) TLR4 受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等，促進(jìn)炎性細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子，進(jìn)而引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)，造成疾病或者死亡，在食品和藥品中是重要的毒力因子，因此研發(fā)有效的 LPS 脫毒方法具有重要意義。本成果獲得了食品級(jí)的 LPS 脫毒菌株，具有應(yīng)用前景。工業(yè)發(fā)酵中大腸桿菌野生型菌株中內(nèi)毒素釋放，是導(dǎo)致熱原污染的重要原因，這增加了分離純化成本，本成果從源頭改造獲得低毒性的大腸桿菌平臺(tái)菌株，避免了發(fā)酵工程中熱原產(chǎn)生