一種非人類胚胎細胞的冷凍優化體系及應用

生物、醫藥及醫療機械

1. 痛點問題

目前，關于胚胎細胞冷凍保種體系的產品價格貴、實驗成本高、保存費用高。傳統冷凍保種體系操作流程復雜，多使用凍存管、商品化載桿；冷凍保護劑毒性相對較高的同時，冷凍保存占用液氮罐空間較大。本項成果提供了一種操作簡單、高回收率、高成活率、高存儲率的技術體系，使用了低毒的冷凍保護劑，降低對于冷凍細胞的損傷，保證技術人員的職業健康，提高了液氮罐空間使用效率。

2. 解決方案

本項成果的技術核心包括：自主研發了冷卻速率高的放置冷凍保種胚胎細胞的載體、凹槽麥管。使用自制配件將麥管按照特定角度切割出凹槽，將胚胎細胞放置于鑿槽前端，直接接觸液氮加快冷卻速率，更易于回收不丟失胚胎細胞，可達到近100%回收率。使用低毒的冷凍保護劑，提高了冷凍胚胎細胞的發育率。使用自主研發的HTF受精液作為冷凍保護劑的STOCK液，提供更充分的細胞養分，利于后續胚胎細胞的發育。

未來的產品主要涉及非人類胚胎細胞冷凍保種試劑盒，包括冷凍液、復蘇液和凹槽麥管。預期可以形成實驗動物繁育和冷凍保種的相關試劑盒，并可以提供技術支持和實驗方案設計和分析。

圖.不同冷凍保護劑基礎液對B6小鼠胚胎細胞冷凍保種的影響

本項成果屬于資源冷凍保種領域，隨著科學研究的不斷發展，實驗動物的需求量越來越多，實驗動物資源越來越多樣化，急需一種操作簡單、高回收率、高成活率、高存儲率的冷凍保種技術體系，用于保存珍貴的實驗動物資源，建立穩定有效的資源庫。

目前，全國有三千余家實驗動物生產和使用單位，產品可用于小鼠的胚胎冷凍操作實驗。

本項成果涉及的技術體系從2022年開始使用，技術成熟度高。在同類胚胎冷凍保種技術體系中，具有操作簡單、時間成本低、實驗效率高、液氮存儲占用空間低等特點，同時胚胎復蘇相對可以得到更多的活體小鼠，更符合動物福利原則。